Автореферат (1154754), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Для изучения полиморфизмов гена CYP3A4 использовалсяметод ПЦР-РВ (набор реагентов и протокол исследования от компании «Синтол»,Москва). Для определения полимофных вариантов гена АРОА1 проводилась ПЦР споследующей рестрикцией ампликонов с использованием рестриктазы МspI(Pulkkinen A., et al., 2000) и детекцией результатов рестрикции в 10%полиакриламидном геле (рис 1). Материалом для исследования являлась ДНК,выделенная из периферических лейкоцитов венозной крови с использованиемпротокола и набора реагентов для выделения геномной ДНК из цельной крови ДНКэкстран-1 («Синтол», Москва).10Рисунок 1. Идентификация полиморфных вариантов –75G/A и +83C/T гена APOA1.У всех пациентов в начале исследования и через 6 мес от начала интенсивнойтерапии статинами с помощью Монреальской шкалы оценки когнитивных функцийпроводилась оценка внимания, исполнительных функций, памяти, речи, зрительноконструктивных навыков, абстрактного мышления и ориентации с начислениембаллов за выполнение заданий согласно инструкции (www.moca.org).
Критериемкогнитивной дисфункции являлось количество набранных баллов меньше 26 (из 30возможных).До и через 6 мес интенсивной терапии статинами, с применениемрусскоязычной версии опросника SF-36 оценивались показатели качества жизни по8 доменам: физическое функционирование (ФФ), ролевое физическоефункционирование (РФФ), физическая боль (ФБ), общее здоровье (ОЗ),жизнеспособность (ЖС), ролевое эмоциональное функционирование (РЭФ),психологическое здоровье (ПЗ). Максимальное количество баллов по каждомудомену – 100, минимальное – 0.Статистический анализ результатов исследования. Статистический анализпроводили с использованием пакета прикладных статистических программ Statistica8.0 для Windows.
Для количественных показателей рассчитывалось среднееарифметическое значение, медиана и стандартное отклонение. В случаераспределения, близкого к нормальному, данные представлялись в виде в видеM±SD, где M - среднее значение, SD – cтандартное отклонение среднего значения.В случае ненормального распределения данных указывалась медиана сминимальным и максимальным значением.
Для сравнения частот признаков икачественных переменных пользовались критерием хи-квадрат (χ2) с поправкой направдоподобие. Оценку достоверности различий между группами проводили припомощи непараметрического критерия Манна-Уитни, различия в одной группе вразных точках - по критерию Вилкоксона. Для выявления многомерных11зависимостей между различными признаками использовались процедурымногофакторного и нелинейного регрессионного анализа. Для расчета пороговыхвеличин, чувствительности и специфичности строили ROC-кривые в пакетепрограмм SPSS.
Различия средних величин и корреляционные связи считалисьстатистически значимыми при уровне р<0,05.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯИзучение частоты и предикторов достижения целевого уровня ХС-ЛНП и ХСнеЛВП при интенсивной липидснижающей терапии.На фоне терапии аторвастатином в дозе 80 мг/сут отмечалось достоверноеснижение уровня ОХС на 1,4±1,1 ммоль/л, ТГ на 0,5±0,4 ммоль/л, ХС-ЛНП на1,2±1,1 ммоль/л, ХС-ЛОНП на 0,3±0,2 ммоль/л, ХС-неЛВП на 1,4±1,2 ммоль/л снезначимым изменением уровня ХС-ЛВП (рис. 2).ОХСХС-ЛНПХС-ЛОНП10ХС-ЛВП99ХС-неЛПВПТГ00-10-20-30-40-50-21-26* -31 **-33*-43*-30*-25-31-33 -33 ** *Общая группаНе достигли целевого уровня ЛНП-33* -42 *-25-29 -30* * **Достигли целевого уровня ХС-ЛНП* p<0,05Рисунок 2.
Динамика показателей липидного спектра на фоне терапииаторвастатином 80 мг/сут в течение 6 месяцев (%).Через 4 нед терапии аторвастатином 80 мг/сут 76 (40,6%) пациентов достиглицелевого уровня ХС-ЛНП <1,8 ммоль/л, 81 (43,3%) пациент достиг целевого уровняХС-неЛВП <2,6 ммоль/л, 36 (19,2%) – достигли обоих целевых уровней. 18 (9,6%)пациентов снизили ХС-ЛНП на 50 и более процентов от исходного уровня.
Через 6мес терапии аторвастатином 80 мг/сут произошло дополнительное увеличение числапациентов, достигших целевых уровней липидов. Распределение пациентов взависимости от достижения целевых уровней липидов через 6 мес интенсивнойтерапии статинами представлено на рисунке 3.1220,353,557,846,542,2ХС-ЛНП<1,8 ммоль/л>1,8 ммоль/лХС-неЛВП<2,6 ммоль/л>2,6 ммоль/л79,7ХС-ЛНП<1,8ммоль/л+ ХС-неЛВП<2,6 ммоль/лХС-ЛНП>1,8ммоль/л+ ХС-неЛВП>2,6 ммоль/лРисунок 3.
Распределение пациентов в зависимости от достижения целевых уровнейлипидов через 6 месяцев терапии аторвастатином 80 мг/сут (%).Сравнительные анализы групп пациентов в зависимости от достиженияцелевых уровней липидов представлены в таблицах 2-3.Таблица 2.Сравнение групп пациентов, достигших и не достигшихцелевого уровня ХС-ЛНП.ХС-ЛНП<1,8ммоль/лМужчины, n (%)50 (65,8%)Возраст, годы (M±SD)60,3±8,9Курящие, n (%)29 (38,1)Абдоминальное ожирение, n (%)44 (57,9)Артериальная гипертония, n (%)61 (80,3)Инфаркт миокарда в анамнезе, n (%)46 (60,5)Ишемический инсульт в анамнезе, n (%)21 (27,6)Сахарный диабет, n (%)13 (17,1)ХСН NYHA II, n (%)39 (51,3)вчСРБ>2,0 мг/дл, n (%)18 (23,7)ОХС, ммоль/л (M±SD)4,8±1,1ХС-ЛВП, ммоль/л (M±SD)1,1±0,2ХС-ЛНП, ммоль/л (M±SD)2,8±1,1ТГ, ммоль/л (M±SD)2,0±1,1ХС-ЛОНП, ммоль/л (M±SD)0,9±0,5ХС-неЛВП, ммоль/л (M±SD)3,8±0,9MCP-1, пг/мл515±456sVCAM-1,нг/мл980±500Примечание: *p<0,001 по сравнению с группой ХС-ЛНП<1,8 ммоль/л.ХарактеристикиХС-ЛНП>1,8ммоль/л70 (63,9%)59,7±7,449 (44,1)77 (69,3)107 (96,4)90 (81,1)35 (31,5)28 (25,2)63 (56,7)63 (56,7)5,6±1,5*1,1±0,43,6±1,3*2,0±1,30,8±0,34,5±1,5399±91758±22313Таблица 3.Сравнение групп пациентов, достигших и не достигшихцелевого уровня ХС-неЛВП.ХарактеристикиMужчины, n (%)Возраст, годы (M±SD)Курящие, n (%)Абдоминальное ожирение, n (%)Артериальная гипертония, n (%)Инфаркт миокарда в анамнезе, n (%)Ишемический инсульт в анамнезе, n (%)Сахарный диабет, n (%)ХСН NYHA II, n (%)вчСРБ>2,0 мг/дл, n (%)ОХС, ммоль/л (M±SD)ХС-ЛВП, ммоль/л (M±SD)ХС-ЛНП, ммоль/л (M±SD)ТГ, ммоль/л (M±SD)ХС-ЛОНП, ммоль/л (M±SD)ХС-неЛВП, ммоль/л (M±SD)MCP-1, пг/млsVCAM-1,нг/млПримечание: *p<0,05, *p<0,001 *p<0,0001ммоль/л.ХС-неЛВП < 2,6ХС-неЛВП > 2,6ммоль/лммоль/л59 (72,8%)70 (63,9%)60,8±10,961,7±8,431 (38,3)47 (44,3)54 (66,7)67 (63,2)70 (86,4)98 (92,4)69 (85,2)67 (63,2)27 (33,3)29 (27,4)24 (29,6)17 (16,0)52 (64,2)60 (47,2)20 (24,6)61 (57,5)5,0±1,15,8±1,5**1,1±0,31,2±0,43,1±0,93,6±1,3*1,6±0,72,1±1,3**0,7±0,30,9±0,43,8±1,04,6±1,4**396±201511±139***914±423734±219по сравнению с группой ХС-неЛВП<2,6Методом многофакторного корреляционно-регрессионнного анализа быливыявлены следующие независимые предикторы раннего ответа на высокодозовуютерапию аторвастатином:1.
Для достижения целевого уровня ХС-ЛНП - исходные уровни ХС-ЛНП (ОШ=0.424,95% ДИ 0.284-0.632, р<0,001) и ОХС (ОШ=0.658, 95% ДИ 0.503-0.860, р=0,002)2. Для достижения исходного уровня ХС-не ЛВП - исходные уровни ХС-неЛВП(ОШ=0.572, 95% ДИ 0.413-0.79, р<0,001), ОХС (OШ=0.597, 95% ДИ 0.444-0.802,р<0,001), ХС-ЛНП (OШ=0.671, 95% ДИ 0.490-0.917, р=0,01) ТГ (OШ=0.495, 95% ДИ0.307-0.798, р=0,003) и МСР-1 (ОШ=0.517, 95% ДИ 0.37-0.71, р<0,0001).Для оценки чувствительности и специфичности прогностического значениявышеуказанных показателей был проведен ROC-анализ. Исходный уровеньОХС<4,6 ммоль/л предсказывал достижение целевого уровня ХС-ЛНП счувствительностью 56,4% и специфичностью 75% (ППК=34,3%, 95% ДИ 0,2560,431, р=0,002), ХС-ЛНП<2,9 ммоль/л - с чувствительностью 61,8% испецифичностью 75,7% (ППК=35,5%, 95% ДИ 0,27-0,44, р=0,001) (рис.
4a).Достижение целевого уровня ХС-неЛВП предсказывали исходные уровни: ОХС<5,0ммоль/л с чувствительностью 69,3% и специфичностью 70% (ППК=34,3%, 95% ДИ140,234-0,453, р=0,01), ХС-неЛВП<3,9 ммоль/л с чувствительностью 66,7% испецифичностью 80% (ППК=35,2%, 95% ДИ 0,242-0,462, р=0,015), ТГ<1,4 ммоль/лс чувствительностью 66,7% и специфичностью 60% (ППК=34,2%, 95% ДИ 0,2250,458, р=0,01) и МСР-1<471 пг/мл с чувствительностью 53,3% и специфичностью90% (ППК=29,0%, 95% ДИ 0,177-0,403, р=0,001) (рис. 4б).
Прогностическоезначение исходного уровня ХС-ЛНП для достижения целевого уровня ХС-неЛВПпри проведении ROC-анализа было недостоверно (р=0,08).Рисунок 4. Результаты ROC-анализа: а) для достижения целевого уровня ХС-ЛНП;б) для достижения целевого уровня ХС-неЛВП.Не выявлено ассоциации достижения целевых уровней ХС-ЛНП и ХС-неЛВПс полом, возрастом и другими клинико-демографическими показателями, а также скоморбидным фоном, в том числе с наличием или отсутствием метаболическогосиндрома и сахарного диабета.Изучение ассоциаций полиморфных вариантов –75G/A и +83C/T гена-регулятораметаболизма ХС-ЛВП - APOA1 и F189S гена-регулятора метаболизма статиновв печени - СYP3A4 с ответом на интенсивную липидснижающую терапию.У всех 58 пациентов очень высокого сердечно-сосудистого рискаисследованием выявлен генотип CYP3A4*1.Распространенность полиморфных вариантов -75G/A и +83С/Т гена АРОА1 визучаемой группе представлены в таблице 4.
Частота аллели G составила 0,53,аллели А – 0,47, аллели С – 0,94, аллели Т – 0,06.Таблица 4.Распределение вариантов гена АРОА1 у пациентов очень высокого сердечнососудистого рискаАРОА1 (-75G/A)GG n(%)GA n(%)16 (27,6)30 (51,7)AA n(%)12 (20,7)АРОА1 (+83С/Т)CC n(%)CT n(%)TT n(%)51 (87,9)7 (12,1)0 (0)15Встречаемость аллели -75G была статистически значимо выше в группепациентов, недостигших целевого уровня ХС-неЛВП (рис.5).100%2580%60%7468,776,740%20%752631,323,3(-75)GG+GA(-75)GG(-75)GA0%ХС-неЛВП<2,6 ммоль/л(-75)AAХС-неЛВП>2,6 ммоль/лРисунок 5.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
