Диссертация (1154491), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Приэтом снижается встречаемость численных аномалий аутосом.Выделение группы пациентов репродуктивного возраста обусловленостремлением минимизировать материнский эффект, так как в литературе можнонайти множество работ, в которых связывают частоту анеуплоидий в эмбрионах ивозраст матери [Verlinsky Y.
et al., 1997; Marquez C. et al., 2000; Kuliev A. et al.,2005; Munné S.. et al., 2005; Gianaroli L. et al., 2010; Nagaoka S.I. et al., 2012].Особоследуетотметить,чтостатистическийанализрезультатовпредимплантационного генетического скрининга эмбрионов все-таки выявилдостоверныеотличиямеждугруппамипарсолигозооспермиейинормозооспермией. Так, при снижении концентрации сперматозоидов ниженормы ВОЗ наблюдалось значимое повышение встречаемости эмбрионов скариотипом 45, XO, фенотипически соответствующим синдрому ШерешевскогоТернера как в общей группе исследуемых, так и в группе репродуктивноговозраста, причем во втором случае отличия более выражены (табл.
3).Таблица3.ВстречаемостьсиндромаШерешевского-Тернерауэмбрионов исследованных парОбщая группа исследуемых парКонцентрацияменее15болеесперматозоидовмлн/млмлн/млВстречаемостьсиндрома 1,37150,79P t-тестШерешевского-Тернера, %0,0515Группа репродуктивного возрастаКонцентрацияменеесперматозоидовмлн/млВстречаемостьсиндрома 1,59Шерешевского-Тернера, %15 более15млн/мл0P t-тест0,019367Синдром Шерешевского-Тернера сопровождается аномалиями физическогоразвития и половым инфантилизмом и обусловлен моносомией по X-хромосоме(XО) либо крупной делецией в одной из Х-хромосом [Gawlik A., Malecka-TenderaE.,2013]. Существует также предположение, что сопутствующие аутосомныемутации играют определенную роль в появлении пороков развития, посколькуобнаруживаютсясостояния,сходныесданнымсиндромом,нонесопровождающиеся хромосомной патологией [Sybert V.P.
et al., 2004]. Диагнозбазируется на исследовании фенотипа и кариотипа пациента [Bondy C.A. 2007].Данный синдром встречается реже, чем трисомия Х, синдром Клайнфельтера(ХХY, ХХХY) и полисомия Y (ХYY), что возможно связано с наличием отборапротив гамет, не содержащих половых хромосом и зигот ХО. Это предположениеподтверждается достаточно часто наблюдаемой моносомией Х среди спонтанноабортированных зародышей. Данный факт позволяет полагать, что выжившиезиготы ХО чаще являются результатом потери X-хромосомы на ранних стадияхразвития. Популяционная частота синдрома составляет 1:1500 [Gorlin R. et al.,2001]. Достоверной связи возникновения синдрома Шерешевского-Тернера свозрастом и заболеваниями родителей не выявлено.
Однако беременности обычноосложняютсятоксикозом,угрозойвыкидыша,ародычастобываютпреждевременными и патологическими.Наши результаты согласуются с данными, полученными Magli C. et al.,согласно которым в парах с мужским фактором бесплодия наблюдалосьповышенное количество получаемых анеуплоидных эмбрионов. Другая группаисследователей показала наличие корреляции между количеством хромосомныханомалий в сперме и эмбрионах от данного мужчины [Magli C. et al., 2009,Rodrigo L.
et al., 2010]. Эти данные совпадают с результатами Tang et al. (2004) иKaarouch I. et al., (2015), где также была повышена частота нулисомий пополовым хромосомам в эмбрионах в парах с мужским фактором бесплодия.Вышеуказанные факты можно объяснить тем, что олигозооспермия зачастуюявляетсяследствиемглубокихгенетическихнарушенийсперматогенеза[Poongothai J. et al., 2009].683.2. Подвижность сперматозоидовПеремещение сперматозоида представляет собой достаточно сложныйпроцесс, в котором задействовано множество белков, и, соответственно, мутацияв любом из генов данных белков может привести к нарушению подвижности.Отмечается также и сочетанное нарушение ультраструктуры ряда компонентовсперматозоидов.Дажеуфертильныхмужчинсперматозоидыобычногетерогенны: наряду с нормальными клетками в эякуляте обнаруживаютсяразнообразные формы с патологией акросомы, укладки хроматина, с различнымианомалиями ультраструктуры жгутика.
Показано, что повышенное количествосперматозоидовсизмененнымположениемакросомыупациентовсастенозооспермией и нарушениями структуры жгутика обнаруживают в 1,5 разачаще, чем у пациентов с нормальной подвижностью клеток [Хаят С.Ш., БрагинаЕ.Е., Курило Л.Ф., 2012].Подвижность сперматозоидов – один из важнейших факторов, влияющих надоставку отцовского генетического материала к яйцеклетке. Первоначальнонеподвижные клетки приобретают способность к перемещению по мере своегосозревания, причем данная способность зависит как от структурных компонентов,так и от энергетических ресурсов. Генетический материал располагается вголовке, в то время как митохондрии – в хвосте.
Хвост сперматозоида имеетсложную структуру и содержит также микротрубочки и моторные белки [Wang D.et al., 2003; Алоян К.А. и др., 2013].В рамках представленной работы изучалась взаимосвязь подвижностисперматозоидов с результатами ПГС эмбрионов. Пары были разделены на 2подгруппы: с долей сперматозоидов категорий подвижности A и B в сумме неменьше 32% (норма по критериям ВОЗ) и с долей сперматозоидов категорийподвижности A и B в сумме меньше 32% (патология). Полученные данныеприведены в таблицах 4 и 5.69Таблица 4.
Частота (%) аномалий числа и структуры хромосом принормальной и патологической подвижности сперматозоидов (общая группаисследуемых пар)Подвижностьсперматозоидовв эякулятеКариотип эмбрионаМенееБолее32%32%рpМУУтест(n=45)(n=102) T-тестНормальный42,9749,680,2648 0,5664Трисомии по аутосомам39,1531,30,1871 0,4009Моносомии по аутосомам35,1732,680,6293 0,7496Трисомии по половым хромосомам4,674,840,935хромосомам1,611,120,6546 0,36Делеции и амплификации13,5512,370,755Моносомиипо0,8677половым0,880370Таблица 5.
Частота (%) аномалий числа и структуры хромосом принормальнойипатологическойподвижностисперматозоидов(группарепродуктивного возраста)Подвижностьсперматозоидовв эякулятеКариотип эмбрионаМенееБолее32%32%рpМУУтест(n=29)(n=64) T-тестНормальный57,8256,730,8824 0,7828Трисомии по аутосомам23,8625,420,8186 0,4688Моносомии по аутосомам24,6726,790,6939 0,5126Трисомии по половым хромосомам3,314,870,5234 0,8244хромосомам2,01,040,5369 0,2623Делеции и амплификации16,5913,860,6002 0,9058МоносомииВходепопроведенногополовымнамиисследованиябылообнаружено,чтоподвижность сперматозоидов не ассоциирована с нарушениями в хромосомномнаборе эмбрионов как в общей группе исследуемых, так и в групперепродуктивного возраста.
Диагноз астенозооспермия сам по себе не связан суменьшением числа эмбрионов с нормальным набором хромосом и увеличениемуровня анеуплоидий. Это можно объяснить техникой оплодотворения методом71ИКСИ, при которой выбор сперматозоида с помощью микроманипуляторанивелирует влияние ослабленной подвижности сперматозоидов, так каксперматозоид не совершает «длинный путь» через половые пути к яйцеклетке.Также в последних опубликованных данных доказана ассоциацияснижения подвижности сперматозоидов с различными инфекциями, такими какусловно-патогенная Ureaplasma spp.
Инфекция оказывает влияние на продукциюАТФ в жгутике сперматозоида в зараженном эякуляте. Поэтому сниженнаяподвижность сперматозоидов отца в эякуляте не влияет на хромосомный наборэмбрионов [Zhou Y.H. et al., 2017]. Также такие распространеные бактерии какстафилококки, эшерихии, стрептококки и энтерококки также негативно влияютна прогрессивную подвижность сперматозоидов, не воздействуя на кариотипсперматозоида [Zeyad A. et al., 2017].Ряд авторов сходятся во мнении, что на подвижность сперматозоидов вэякуляте существенное влияние оказывает содержание витамина D в организме,что актуально для тех регионов нашей страны, где снижен уровень воздействияультрофиолета на организм человека.
Роль витамина D в модуляции функциисеменников, в том числе выработке гормонов и сперматогенезе, была доказанаисследованиями на животных и людях. Экспериментальные исследованияподтверждают благотворное влияние витамина D на мужскую фертильность, вчастности, путем улучшения качества спермы, и, прежде всего, подвижностиклеток, реализующееся через воздействие на обмен внутриклеточного кальция иактивацию молекулярных путей, участвующих в подвижности сперматозоидов,и акросомной реакции. Но данный эффект не сказывается на генетическомматериале эмбриона [de Angelis C. et al., 2017].3.3.ВОЗМорфология сперматозоидовпостепенноснижаетпоказатели«нормы»дляхарактеристиксперматозоидов.
Так, если в 2002 г. норма концентрации сперматозоидов вмиллилитре эякулята, как упоминалось выше, составляла 20 млн., то в 2010 г.нормой уже признается 15 млн. сперматозоидов. Показатель «нормы» для72морфологии сперматозоидов также снизился с 14% до 4%. Во всем мире принятоопределять эталон правильной морфологии по Крюгеру. В 1986 г. Т.