Диссертация (1154482), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Собственный слой слизистой102оболочки на всех изученных образцах отделялся от мышечного, имелосьналичие белкового секрета, все слои были высоко инфильтрированылимфоцитами.Рисунок 16 Поверхность слизистой оболочки и стенок крипт. Окраскагематоксилином и эозином. Увеличение окуляром А - х5 Б - х10 В – 20 Г – 20.1-мышечный слой; 2-лимфоидная инфильтрация; 3-зоны десквамациислизистой оболочки; 4-белковые наложения на поверхности ворсинок;5-кровенаполненные сосудыСосудистое русло также было характерно изменено: выявлялись очагирасширениявенул,стенкиартериальныхсосудовбылинаполненыклеточными элементами.
Сами ворсинки толстой кишки были изменены103значительно иимели как зоны разрушения так зоны трансформации,охарактеризованные как гиперпластические полипы.Кроме того, с целью уточнения интенсивности реакции на воспаление,были измерены размеры селезенки как маркера перенесенного остроговоспалительного процесса. Установлено, что при макроскопическом осмотреорган имел выраженную дольчатую структуру, длина органа в группепрооперированных животных колебалась от 4,7 до 6,8 см (значимостьразличий с контролем в сторону увеличения р = 0,00005), при ширине всредней части 3,5-4 см (значимость различий в сравнении с контролем всторонуувеличениянаблюдалииприр = 0,0002).Статистическисравнениивесаорганазначимыегруппыизмененияконтроляипрооперированных животных (р = 0,00005). Типичные результаты измененийпредставлены в таблице 18.Таблица 18Изменения длины, ширины и веса селезенкиГруппаКол-животныхво, nПараметры сравненияДлина, смШирина, смВес, гМе(25;75)%Ме(25;75)%Ме(25;75)%контроль83,83,4/4,03,02,9/3,31,81,6/1,9язва105,6*4,9/6,23,8**3,5/3,93,0***2,9/3,5* увеличение длины селезенки у прооперированных животных р=0,00005 (Манн-Уитни-тест)** увеличение ширины селезенки у прооперированных животных р=0,0002 (Манн-Уитни-тест)*** увеличение веса селезенки у прооперированных животных р=0,00005 (Манн-Уитни-тест)Интересно отметить, что при воспалении кишки были отмеченыизменения в тканях легких.
При осмотре трупов животных была проведенамакро- и миркроскопическая оценка органов дыхания, в связи с тем, что приначальном этапе общей анестезии у животных возникала икота, которая моглаприводить к осложнениям в виде аспирационной пневмонии и/или апноэ.104Таких животных из эксперимента выбраковывали, однако, учитывая такоедействие анестетика, в экспериментальных группах были исследованы легкие.Установлено, что у интактых животных и группы с проведеннойоперацией состояние ткани легких различалось. При исследовании наплавучесть в группе с оперированных животных в 8 случаях из 10 легкиетонули, в 7 случаях имели спавшиеся участки, при надрезе приходилосьприлагать некоторое усилие.
Не смотря на то, что мы считаем, что цвет легкихне был информативным, так как для эвтаназии применяли эфир, следуетуточнить, что макроскопически органы группы с язвой и контроля сильноразличались между собой. При относительно сохранной паренхиме уинтактных животных в группе сравнения наблюдали мелкоточечныекровоизлиянии, которые носили более выраженный характер: были в областикрупных бронхов крупноочаговыми и заметно более кровенаполненными.Типичная картина ткани легких в группе с язвой представлена на рисунках 17и 18.
Установлено, что совокупность признаков макроскопического имикроскопическогоисследованиявэкспериментальнойгруппе«язва»соответствовала перенесенному бронхиту. В группе интактных животныхтакиеизмененияневыявляли.Микроскопическипаренхималегкихотличалась разнообразной картиной на разных участках среза. Форма и размеральвеол варьировала, большая часть альвеол мелкого и среднего размера снебольшой неравномерно округлой формы полостью, межальвеолярная стенкабыла несколько утолщена за счѐт умеренного отѐка интерстициальной ткани.105Рисунок 17 Общий вид легких у крыс контрольной (А) и оперированной (Б)групп. 1 – единичные кровоизлияния на боковых поверхностях легких; 2 –крупное кровоизлияние; 3 – участок взятия образца для морфологическогоисследования.На периферийных участках гистологического среза лѐгких отмечалинебольшого размера участки эмфиземы в виде расширения альвеол,истончения их стенок с разрывом межальвеолярных перегородок и слияниемальвеолярных полостей.АБРисунок 18 Микроскопическая картина легких крысы группы с язвой.А - увеличение100.соединительную тканьОбщийвид.Б - увеличение100.Окраскана106В полости некоторых альвеол обнаруживали скопления большогоколичества макрофагов.
Также наблюдали неравномерное кровенаполнениекрупных и мелких сосудов с преобладанием сильного их кровенаполнения ископления в их просвете большого количества форменных элементов крови сявлениями эритростаза. В срезах были представлены бронхи без признаковсклероза стенок крупного, среднего и мелкого размера.
Слизистая оболочкабронхов была утолщена, имела складчатую форму, что свидетельствовало обих спазме. Эпителий слизистой оболочки крупных бронхов высокийпризматический без признаков повреждения. Эпителий средних и мелкихбронхов вытянутой пальцевидной формы, апикальная часть реснитчатыхэпителиоцитов в состоянии деструкции, часто отпадает в просвет бронха,ворсинчатая каѐмка на апикальной части большинства клеток плоховыражена, часто полностью отсутствует, что оценивалось, как признак ярковыраженной слизистой дистрофии. В просвете некоторых бронхов встречаетсяскопление большого количества зернистой белковой массы - слизи.
Вэпителиальном слое слизистой оболочки встречаются немногочисленныебокаловидные клетки. Базальная мембрана эпителия бронхов не утолщена.Перибронхиальные лимфатические узлы значительно увеличены, частовстречаются диффузные скопления лейкоцитов в перибронхиальной ткани.Таким образом, наиболее типичным нарушением в группе животных с язвойбыли изменения со стороны ткани легких.При оценке изменений со стороны печени грубых макроскопическихизменений не выявили, однако, в обеих группах определяли участки развитияжировой дистрофии, что мы связываем с составом корма.Кромеморфологическойоценкисостояниякишкивгруппах«интактные» и «язва» была определена концентрация Ах в областивоспаления в послеоперационный период с 3 по 20 день. Предпосылкой дляисследования послужили данные литературы о роли Ах в процессе репарациии иммунной реактивности. Также, учитывая собственные данные о влиянииАх на секрецию факторов роста и поддержания межклеточных контактов, а107также выводов Raufmann, Novotny и их соавторов о возможном участииnα7AcH в процессах опухолевого роста, требовалось установить егоконцентрацию в биологических образцах, полученных от животных синдуцированным воспалением.Для этого применили биохимический метод титрования Хестрина, вмодификации Трубицыной И.Е.
На 30 образцах ткани оценили динамикуизменения концентрации Ах в СО ТК у крыс, которым индуцировали язвуописанным выше способом. Контролем служили интактные одновозрастныеживотные. Было установлено, что при индукции язвы толстой кишки методомхимического ожога изменение концентрации Ах носят времязависимыйхарактер. Диаграмма изменения концентрации представлена на рисунке 19.Рисунок 19 Динамика концентрации ацетилхолина в образцах слизистойоболочкитолстойкишкикрысгруппыконтроля(красный)исиндуцированной язвой (синяя).Как видно из диаграммы, увеличение количества Ах происходило впервые сутки (0,52±0,04 мг/мг ткани) и достигало максимума к 5-омупослеоперационному дню (1,2±0,04 мг/мг ткани).
Через 2 дня после пиканаблюдали плато-эффект, который предвещал падение концентрации Ах к 12ому дню (от 0,95±0,04 мг/мг ткани и до 0,6±0,04 мг/мг ткани) вплоть до 20 дня108и далее. Все это время количество Ах в группе контроля не превышалозначения 0,38±0,03 мг/мг ткани.Таким образом, было установлено, что при индукции язвы СОТК крысметодом химического ожога концентрация Ах изменяется со временем и егодействие минимизировано после 12-ого дня. Основываясь на данныхлитературы [48] мы не можем игнорировать тот факт, что это явление должнонайти отражение в работах, посвященных исследованию болезни Крона, таккак до сих пор нет надежных маркеров начала воспалительной реакции иразвитиярефрактерностикпрепаратам.Возможно,именнопрофильнейромедиаторов как регуляторов воспаления может решить эту проблему.Суммируя полученные данные, были сделаны выводы, что процессвоспаления толстой кишки не носил узконаправленное действие, а егопоследствия имели генерализованный эффект.
В частности, в связи с тем, чтоАх мог оказывать дистантное действие на органы и системы [31], в частностина легкие наши наблюдения позволяют по-новому взглянуть на проблемуранних послеоперационных осложнений, которые формируются в системеорганов дыхания [29].В частности, в публикациях Barnes P. J.(2013) [40] Montuschi P. (2014)[123] указано возможное участие Ах в процессах бронхообструкции иуказывается перспективность использования Ах и рецепторов к нему,расположенных на поверхности клеток альвеолярной выстилки, в качестветаргетных компонентов для лекарственных средств при хроническойобструктивной болезни легких. Аналогичного мнения придерживаютсяMedjber, K.
(2015) и Improgo, M.(2013), и ряд других авторов, которыеуказывают на недостаточную изученности системы Ах и, в частности, егорецепторной части при раке легких[98; 118]. Авторы указывают на то, чтосоздание таргетных препаратов для лечения рака легкого не может бытьполноценным, если не будет детально изучена роль nα7AcHR. Учитываяданные литературы и собственные результаты, следует наметить дальнейшиепути изучения роли Ах при воспалении, но уже для тканей легких.109Резюмируя, можно заключить, что модифицированная модель язвыжелудка по Okabe, с учетом уменьшения диметра кольца и времениаппликации оказалась технически воспроизводимой на толстой кишке, чтоможет быть использовано для экспериментального моделирования.3.2.2. Патофизиологические изменения внутренних органов на фонеприменения канцерогена АОММоделирование опухоли толстой кишки выполняли двукратным,внутрибрюшинным введением АОМ (на 0 и 14 день эксперимента).Соответственно, следующим этапом работы было выявление возможныхтоксических эффектов от двукратного применения 1,2-азоксиметана (АОМ)[137].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
