Диссертация (1151754), страница 13
Текст из файла (страница 13)
(поливная норма),расчетное значение которой составило 300 м3/га. Второй полив через 10 дней.Перед поливами из сосудов отбирались пробы почвы для определенияосновных групп почвенных микроорганизмов (бактерии аммонификаторы,бактериинитрификаторы,актиномицеты,грибы,азотобактер).Изотобранных проб приготавливались почвенные суспензии, из которыхпроводились посевы на соответствующие среды. Кроме показателейбиогенности почвы, определялись показатели ферментативной активностипочвы:инвертазной,каталазнойиуреазной,атакжепроводилосьисследование на содержание водорастворимых солей водной вытяжки почвы,валовых и подвижных форм тяжелых металлов – свинца, кадмия, меди,цинка. По результатам исследований судили о приемлемости изученныхконцентраций для полевого опыта.План проведения лабораторного и полевого опытов следующий:- 2010 г.
– определение участка полевого опыта, отбор проб дляопределения исходного состояния почвы и проведения лабораторнолизиметрического опыта.2011 г. – разбивка участка по повторностям и вариантам проведенияполевого опыта. Внесение ферментативного комплекса в соответствии сосхемой. Отбор проб почвы для определения влияния ферментативногокомплекса на восстановительные свойства почвы.692012–2013 гг.
– отбор проб почвы для исследования наблюдениявлияния ферментативного комплекса после внесения его в почву на участкеполигона захоронения ТБО.3.2. Методы проведения анализов по изучению примененияферментативной стимуляции почвыИсследования по изучению агрохимических и мелиоративных свойствпочвы проводились в основном по двум направлениям: 1) пищевой режимпочвы; 2) солевой режим почвы. Динамика состояния почв изучалась вразрезе 2010–2013 гг. Почвенные образцы с каждого варианта отбиралисьпослойно, через 10 см из 5 скважин, расположенных в одну линию.Расстояние между скважинами составляло 0,5 м. При последующем взятииобразцов линию скважин располагали на расстоянии 1 м от предыдущей.Отобранные образцы из 5 скважин смешивались по горизонтам ианализировались. Такая методика отбора проб обеспечивает получение болеедостоверныхданныхвусловияхбольшойкомплексностипочвинеравномерности содержания солей в почвенном профиле, свойственныхзоне светло-каштановых солонцеватых почв (Пак К.А., Степанец Т.Т., 1967).Анализы почв проводились по следующим методам: солевой составводной вытяжки по Е.В.
Аринушкиной (Аринушкина Е.В., 1970), доступный(легкогидролизуемый) азот по Тюрину И.В. и Кононовой М.М., усвояемыйфосфор по Мачигину Б.П., валовый и водорастворимый гумус поИ.В. Тюрину, рН водной вытяжки потенциометрическим методом, емкостьпоглощения по Пфефферу в модификации Беляевой. Солевой состав почвы ипищевой режим исследовались по верхнему метровому почвенномупрофилю.
Сравнивая исходное состояние с состоянием под действиемферментов, выявляли изменение агрохимических и агромелиоративныхсвойств почвы.70Содержаниетоксичныхсолейрассчитывалипоэмпирическойзависимости Базилевич Н.И. и Панковой Е.И. (Базилевич Н.
И., Панкова Е.И.,1968), тип химизма солей по Ковде В.А. и соавторам (Ковда В.А., 1960),классификациюпочвпостепенизасоленияпоМинашинойН.Г.(Минашина Н.Г., 1973), обеспеченность почв питательными элементами – пометодам, обобщенным Аринушкиной Е.В. (Аринушкина Е.В., 1970),солонцеватостипочв–поАнтипову-КаратаевуИ.Н.визложенииКауричева И.С. (Кауричев И.С., 1982).3.3.
Методика исследований микробиологических процессов в почвеБиологическая активность почвы определялась следующими методами:1. По биогенности учитывалось количество микроорганизмов основныхфизиологических групп в 1 г почвы методом посева почвенных образцов насоответствующие питательные среды.Изучались следующие группы микроорганизмов:а) бактерии – аммонификаторы (среда МПА);б) бактерии, растущие на минеральном азоте (среда Чапека);в) группа азотобактера;г) целлюлозоразрушающие микроорганизмы;д) актиномицеты;е) микроскопические грибы.Опыты по биогенности проводились в соответствии с рекомендациямиСелибера (Селибер, 1962).Протеазную активность определяли по методике Вавуло Ф.П. при срокеэкспозиции 10 сут.
(Вавуло Ф.П., 1971). Определение инвертазы и уреазыпроводили по методу Купревича В.Ф. и Щербаковой Т.Т. (Купревич В.Ф.,Щербакова Т.А., 1966), каталазы – газометрическим методом.2. По методу Мишустина Е.Н. и Петровой А.Н. (Мишустин Е.Н.,ПетроваА.Н.,1963)определялинакоплениеаминокислот71целлюлозоразрушающимимикроорганизмаминальняномполотне,помещенном в почву на определенное время экспозиции. Этот метод даетвозможность судить об интенсивности процессов круговорота углерода иазота.3.4. Определение тяжелых металлов в почвеВ настоящий момент разработаны и внедрены достаточное количествометодов по определению различных форм тяжелых металлов (ТМ),отличающиеся методом «вскрытия почвы» и обусловливающие источникисистематическихрасхожденийрезультатовмеждуметодами(Пуховский А.В., 2013).
В связи с чем для объективного обоснованиярезультатов подробно описана методика, используемая в исследованиях дляопределения форм тяжелых металлов в почве. Валовые и подвижные формытяжелыхметалловвпочвеопределялиметодоминверсионнойвольтамперометрии на анализаторе типа ТА. Данная методика разработанаООО «НТП «Томьаналит» и аттестована в соответствии с ГОСТ Р 8.563.2009 «ГСИ. Методики (методы) измерений».Приготовление вытяжки для определения валового содержания цинка, кадмия,свинца, меди(5,0+0,1) г воздушно-сухой пробы, измельченной и пропущенной черезсито 1 мм, поместили в коническую колбу вместимостью 250 см3 и залили25,0 см3 азотной кислоты (50 %).
Вращательным движением осторожноперемешали содержимое колбы и поставили ее на электроплитку, довели докипения и кипятили на медленном огне 10 минут. Дали раствору остыть до(40–70) °С.К пробе по каплям прилили 5,0 см3 концентрированной перекисиводорода при перемешивании и вновь поместили на электроплитку, довелидо кипения и кипятили еще 10 минут.Послеохлаждениядокомнатнойтемпературывытяжкуотфильтровывали в мерную колбу вместимостью 50,0 см3 через складчатый72фильтр «белая лента», предварительно промытый азотной кислотойконцентрации 1 моль/дм3.
Фильтр с осадком поместили в колбу с остаткомпробы. Прилили в колбу 20,0 см3 азотной кислоты концентрации 1 моль/дм3.Поместили колбу на плитку, нагревали и кипятили содержимое еще 30 мин.После охлаждения до комнатной температуры жидкость в колбеотфильтровали в мерную колбу с первым фильтратом. Осадок на фильтрепромыли горячей азотной кислотой концентрации 1 моль/дм3 в ту же колбу сфильтратом. Объем охлажденного фильтрата в мерной колбе доводили дометки бидистиллированной водой при подготовке проб почвенной вытяжки канализу.Приготовление вытяжки для определения содержания подвижных формцинка, кадмия, свинца, медиВ коническую колбу вместимостью 250 см3 внесли навеску воздушносухой пробы (5,00±0,01) г.
Мерным цилиндром прилили к пробе 50,0 см3ацетатно-аммонийного буферного раствора с рН=4,8 (соотношение проба:раствор – 1:10). Вращательным движением колбы смочили и перемешалипробу. Колбу с почвой закрывали резиновой пробкой и выдерживали 24 часапри комнатной температуре. В течение этого времени 5–7 раз круговымивращательными движениями перемешивали содержимое колбы.После экспозиции пробу перенесли для фильтрования на воронку сбумажным складчатым фильтром «белая лента», предварительно промытымацетатно-буферным раствором, по возможности полностью. Фильтратсобирали в мерную колбу вместимостью 50,0 см3. Полученный фильтратдовели до метки ацетатно-аммонийным буферным раствором.Приготовление вытяжки для определения содержания водорастворимых формцинка, кадмия, свинца, медиВ коническую колбу вместимостью 250 см3 внесли навеску воздушносухой пробы (5,00 ± 0,01) г.
В другую коническую колбу вместимостью250 см3 отобрали мерным цилиндром 125 см3 бидистиллированной воды. Из73этой колбы приливали небольшое количество бидистиллированной воды(около 20 см3) в колбу с почвой и перемешивали пробу с водой, встряхиваявращательными движениями.Полученную суспензию пробы с водой сразу же перевели на воронку соскладчатымфильтром«белаялента»,предварительнопромытымбидистиллированной водой. Добавляли бидистиллированную воду в колбу,ополаскивая ее и таким образом перенося остатки пробы на фильтр.Фильтрат собирали в чистую коническую колбу вместимостью 250 см3.
Впроцессе фильтрования постепенно добавляли в фильтруемую пробубидистиллированную воду из колбы, следя, чтобы процесс фильтрованиябыл равномерным.После того, как все 125 см3 бидистиллированной воды былиизрасходованы на фильтрование пробы, фильтр с пробой убирали, а колбу сфильтратом и воронкой ставили на электроплитку и выпаривали фильтрат дообъема около 20 см3. Фильтрат охладили до комнатной температуры.Воронку сняли и ополоснули бидистиллированной водой в колбу сфильтратом.Перевелиупаренныйфильтратвмернуюпробиркувместимостью 25,0 см3. Ополоснули колбу 2–3 раза бидистиллированнойводой, переводя раствор в пробирку с фильтратом.