Диссертация (1151583), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Материал для анатомическихисследований селезѐнки сельскохозяйственных животных (лошадь, свинья,крупный рогатый скот, овца, коза и кролик) получали при их убое схозяйственной целью. Материал для исследования морфологии селезѐнкидикихживотныхполучалипутѐмотлова(суслик),отохотниковохотоведческих хозяйств Оренбургской области (лисица, хорѐк, заяц-русак,сурок-байбак).68Исследования проводились на трупах животных без признаковпатологий.
Возраст животных определяли по данным регистрационныхзаписей журналов эвтаназий клиник, журналов учета зооветслужб хозяйств,сопроводительных документов, со слов владельцев, по зубным формулам искелету (Шевченко Б.П., Дегтярев В.В., Абрамова Л.Л. и др., 2010). Всего вэксперименте использовано 177 голов.Таблица 1 – Характеристика исследованных животных (n–голов)Количествоисследуемыхживотных (n)Вид животныхКласс: Млекопитающие (лат.
Mammalia):Отряд: Непарнокопытные (лат. Perissodactyla)Лошадь (лат. Equus ferus caballus)Отряд: Парнокопытные (лат. Artiodactyla)Подотряд: Нежвачные (лат. Nonruminantia)Домашняя свинья (лат. Sus scrofa domesticus)Подотряд: Жвачные (лат. Ruminantia)Крупный рогатый скот (лат. Bos taurus taurus)Овца (лат.
Ovis aries)Коза (лат. Capra hircus)Отряд: Хищные (лат. Carnivora)Собака домашняя (лат. Canis lupus familiaris)Лисица обыкновенная (лат. Vulpes vulpes)Хорѐк (лат. Mustela)Кошка домашняя (лат. Felis silvestris catus)Отряд: Грызуны (лат. Rodentia)Суслик большой (лат. Spermophilus major)Байбак (лат. Marmota bobak)Отряд: Зайцеобразные (лат. Lagomorpha)Кролик домашний (лат. Oryctolagus domesticus)Заяц-русак (лат. Lepus europaeus)ИТОГО:151216101010861266588177На первом этапе исследований изучали сравнительную синтопиюселезѐнки, распилы по Н.И.
Пирогову, сравнительные характеристики массы69тела и селезѐнки, еѐ линейных показателей (длины, ширины, толщины),формы, цвета, плотности. С помощью методов коррозии, инъекции сосудовлатексом и контрастными массами, тонкого и послойного препарирования,рентгенографии селезѐнки, а также морфометрии изучали сравнительнуюархитектонику экстра- и интраорганных кровеносных сосудов органа.Проводили сравнительно-гистологические исследования селезѐнки и еѐгемомикроциркуляторного русла.На втором этапе исследовали реактивные изменения тканей селезѐнкии крови половозрелых самцов кроликов с целью выяснения адаптивныхспособностей животных в условиях индуцированного стресса и воздействияпрепаратов «Ронколейкин ®» и «Гамавит».«Ронколейкин ®»Препаратполучаютсовременнымибиотехнологическими методами из клеток продуцента рекомбинантногоштамма пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в генетическийаппарат которых встроен ген человеческого интерлейкина-2 (рИЛ-2),солюбилизатор-додецилсульфат натрия (ДСН), стабилизатор – D-маннит ивосстановитель – дитиотреитол (ДТТ).
Активная субстанция Ронколейкина®–рекомбинантныйдрожжевойинтерлейкин-2человека–являетсяполипептидом, состоящим из 133 аминокислот с молекулярной массой около15,4 кДа. По внешнему виду препарат представляет собойпрозрачнуюопалесцирующую жидкость.Согласно наставлениям по применению «Ронколейкин ®» обладаетвыраженнойиммунокоррегирующейактивностью,направленнойнаусиление и оптимизацию противобактериального, противовирусного ипротивогрибкового иммунитета, главный стимулятор образования такихважнейшихкомпонентовпротивоопухолевогоиммунитета,каклимфокинактивированные киллеры и опухольинфильтрирующие клетки,активирует процессы репарации и регенерации тканей при тяжелойсистемной патологии с проявлениями тотальной иммунной недостаточности.70«Гамавит» – комплексный препарат, основными действующимивеществамикоторогоявляютсяплацента,денатурированнаяэмульгированная (ПДЭ), нуклеинат натрия.
Препарат изготавливается наоснове ростовой питательной среды, содержащей сбалансированный растворсолей, аминокислот и витаминов. По внешнему виду препарат представляетсобой прозрачную красного цвета (от светло-розового до малинового)жидкость.Препарат «Гамавит» обладает антистрессорным действием, важнымпоказанием,дляприменениякоторогоявляется,вчастности,антиоксидантная активность, способствующая нейтрализации вредноговоздействия свободных радикалов, предупреждению оксидативного стрессаизащищающаяорганизмотпоражениятоксическимивеществамивнутреннего и внешнего происхождения.Для решения поставленных задач исследования с моделированиемэкспериментального стресса, приближенного к производственным условиям,проведены в КФХ «Раздолье» Тюльганского района и в КФХ «Зобнин»Кваркенского района Оренбургской области, где были сформированы почетыре группы (контрольная и три опытные) клинически здоровых самцовкроликов породы советская шиншилла в возрасте восьми месяцев.
Всего вопыте использовано 48 голов (табл. 2).При формировании групп-аналогов (в соответствии с периодизациейRommers J.M., Kemp B., Meijerhof R., 1999) животных отбирали по возрасту,живой массе, упитанности, телосложению, клиническому (t°С, ЧСС, ЧДД),физиологическомусостоянию.Учитываливозрастиполовуюпринадлежность животных, так как организм половозрелых самцов кроликовимеет стабильный гормональный фон и достоверные отличия биохимическихпоказателей крови в сравнении с самками (Малинин М.Л., Тихомирова Е.И.,Обух Л.Б. и др., 2008). Возраст кроликовустанавливали по даннымрегистрационных записей журналов учѐта зооветслужб хозяйств.71Таблица 2 – Характеристика объектов, использованных в эксперименте(n – голов)№ группыВозраст, мес.Группы животныхКоличествоживотныхКФХ «Раздолье» Тюльганского района8Контроль3Ι8Стресс3®ΙΙ8«Ронколейкин »3ΙΙΙ8«Гамавит»3Повторение эксперимента (КФХ «Зобнин» Кваркенского района)8Контроль9Ι8Стресс9®ΙΙ8«Ронколейкин »9ΙΙΙ8«Гамавит»9ИТОГО:48КФХ «Раздолье» Тюльганского района и КФХ «Зобнин» Кваркенскогорайона Оренбургской области находятся в благополучной зоне поинвазионным и инфекционным заболеваниям.
В каждом хозяйстве в течениевсего экспериментального периода животные содержались по группам водинаковых условиях и обслуживались одним кролиководом. Кормлениеживотных осуществляли по нормам ВИЖа (табл.3).Таблица 3 – Схема рациона самцов-кроликов в летний период, на головув сутки (по Калашникову А.П., Клейменову Н.И., Баканову В.Н. и др.,1985)ПоказателиКФХ «Раздолье»Тюльганского района238,0КФХ «Зобнин»Кваркенского района240,068,070,013,012,0Жмых подсолнечный, г13,012,0Поваренная соль, г1,01,0Трава подвяленная(луговая), гЗерновые (ячмень +овес), гОтруби пшеничные, г72Кроликам контрольной группы не давали препараты, их не подвергалистрессу, животные содержались в отдельных стандартных односекционныхклетках (площадь пола 0,80м2) в помещении, защищенном от солнечныхлучей, с хорошей вентиляцией.Эксперимент с моделированием стрессового состояния у животныхпервой опытной группы производили в течение 14 суток, с использованиемуплотненной посадки и теплового климатического фактора (33±2°С).Кролики экспериментальных групп (первой, второй и третьей)находились в клетках под открытым небом, за стеной-преградой розе ветров(площадь пола общего стада на одну голову составляла 0,14 м2 при норме от0,45м2 до 0,87 м2).Самцам кроликов второй опытной группы перед постановкой наэкспериментвводили препарат «Ронколейкин ®» из расчета 5000 МЕ/кгмассы тела, трехкратно, один раз в сутки, с интервалом 48 часов.
Третьюинъекциюпрепарата«Ронколейкин ®» производиливпервыесуткиэксперимента. Животным третьей опытной группы вводили препарат«Гамавит» курсом за 8, 6, 4 суток – до и в первые сутки воздействия стрессфакторов, из расчета 0,1 см3/кг массы тела.Объектом исследования служили селезѐнка и кровь клиническиздоровых половозрелых самцов кроликов и экспериментальных животных(первой, второй и третьей групп).Материал для исследования получали при убое самцов кроликов схозяйственной целью, непосредственно перед убоем проводили визуальнуюи клиническую оценку их состояния (t°С, ЧДД, ЧСС). Отбор проб кровипроводили из краевой ушной вены для морфологического и биохимическогоисследований, определения в сыворотке крови концентрации гормонов:кортизола и ДГЭА-С.
Гистологические пробы брали поствитально (не менеечем от трех голов) и не позднее одного часа после убоя.Экспериментальная часть включала в себясогласно схеме (рис. 1).73комплекс исследованийСЕЛЕЗЁНКА ЖИВОТНЫХАнатомические исследованияСинтопия селезѐнки, распилы по Н.И. Пирогову. Определение массы тела,массы селезѐнки, еѐ линейных показателей (длины, ширины, толщины).Коррозия, инъекция латексом и контрастными массами сосудов,рентгенография органа, тонкое и послойное препарирование,морфометрия (177 животных)структур селезёнки.Гистологические исследованияТривиальные методы окрашивания (гематоксилин и эозин, поРомановскому-Гимза), селективное выявление углеводсодержащихбиополимеров, по Хочкису и РНК по Браше (692 пробы)Субмикроскопические исследованияТрансмиссионная электронная микроскопия органотипическихструктур селезѐнки (36 проб)Морфологические и биохимические исследованиякрови самцов-кроликов (964 пробы), еѐ сыворотки на содержаниегормонов: кортизола, ДГЭА-С (72 пробы)МОРФОМЕТРИЯСТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛАРЕАЛИЗАЦИЯВ УЧЕБНЫЙ ПРОЦЕССВ ПРОМЫШЛЕННОЕКРОЛИКОВОДСТВОРис.