Автореферат (1151567), страница 5
Текст из файла (страница 5)
А., Тонаева Х. Д.,Борзенок С. А., 2014).Лидером по степени прозрачности роговицы явились особи, которымвводили гомологичные стволовые клетки лимба. По количеству слоев вцентральной части роговицы опережали особи, которым вводили стромальноваскулярную фракцию, а в группе животных с трансплантированнымигомологичными стволовыми клетками лимба морфометрические показателироговицы были наиболее приближены к норме, чем во всех остальныхслучаях.На сегодняшний момент, наши исследования направлены на выяснениетонких механизмов регуляции процессов дифференцировки стволовыхклеток, после трансплантации их на поверхность глаза. После подтвержденияэффективности и безопасности нового метода лечения станет возможным егоприменение у пациентов с тяжелыми заболеваниями и повреждениями глаз,ранее неизбежно приводивших к значительному снижению зрительноговосприятия и утрате зрительных функций.При некоторых заболеваниях органа зрения нет острой необходимостиприбегать к клеточной терапии, однако при ожоговой болезни глаз или прирецидивирующей эрозии роговицы стандартное лечение зачастую не21приводит к желаемым результатам.
А позднее закрытие эпителиальногоповреждения заканчивается необратимыми изменениями в тканях роговицы.Поэтому в данных случаях трансплантация стволовых клеток не толькожелательна, но и необходима, ведь их внедрение в организм приводит кснижению помутнения роговицы, стимуляции процессов репаративногогистогенеза, затуханию воспалительного процесса и нормализации кровотокав конъюнктиве.Положительный эффект от внедрения стволовых клеток дают такиесодержащиеся в них элементы, как цитокины, интерлейкины и факторы роста,именно их наличие активизирует восстановительные процессы иподдерживает жизнедеятельность клеток в тканях.
Проведение процедурытрансплантации стволовых клеток животному отличает чрезвычайнаяпростота, атравматичность и отсутствие необходимости хирургическоговмешательства.ЗАКЛЮЧЕНИЕ1. На основании проведенных исследований экспериментальнообоснована возможность использования разных типов клеточных продуктов вветеринарной офтальмологии для лечебной коррекции поврежденийроговицы, что подтверждается установленными нами ее клиникоморфологическими характеристиками у животных.2. В экспериментальный период наблюдений у животных, подвергшихсярегенеративной терапии клеточными продуктами, воспалительная реакция натравму была менее выражена, чем в контроле, в поврежденных тканях активнопротекали пролиферативные процессы, что косвенно указывает на индукциюих заживления стволовыми клетками.3.
Результаты гистологического исследования позволяют заключить,что скорость и качество заживления дефекта роговицы глаза у подопытныхживотных превосходили таковые у контрольных, что согласуется сморфометрическими линейными показателями его эпителизации уэкспериментальных животных на 14 сутки наблюдений (от 6,1±0,3 вподопытной группе против 4,5±1,5 мм в контрольной), что можетсвидетельствовать о пролиферативных потенциях стволовых клеток.4.
Сравнительный анализ регенераторного влияния разных типовстволовых клеток показал, что эпителизация зоны дефекта роговицы уживотных после введения лимбальных СК происходила активнее и в болеекороткие сроки в сравнении с животными, которым вводили другие клеточныепродукты. Лидером по количественному представительству эпителиальныхслоёв явились особи, которым вводили стромально-васкулярную фракцию (5слоев клеток в центральной части роговицы, при анатомической норме – 6слоев), а по толщине роговицы в зоне повреждения – стволовые клетки лимба(345±12,97 в опыте и 379±17,15 у интактных животных).5. Клиническое наблюдение за животными в динамике показало, чтопосле введения стволовых клеток лимба было более интенсивное, чем вконтроле проявление воспалительной реакции, раннее созревание22грануляционной ткани, быструю трансформацию ее в соединительную, атакже активизацию процесса эпителизации дефекта, что привело кформированию органоспецифического регенерата и сокращению общихсроков заживления.6.
Установлено, что трансплантация стромально-васкулярной фракцииэкспериментальным животным восполняет полнослойный дефект роговицы свосстановлениемегоструктурнойполноценности.Вобластииндуцированного повреждения при трансплантации стволовых клеток посравнению с самопроизвольным заживлением, уменьшается степеньвыраженности воспалительной реакции, ускоряется процесс восстановленияповрежденных тканей и прозрачности роговицы.
Наилучший результат постепени прозрачности роговицы после ее восстановления выявлен у животныхс локальной трансплантацией стволовых клеток лимба (от 0 до 4 баллов пошкале Войно-Ясенецкого).7. Клиническая апробация терапевтической эффективности клеточныхпродуктов на пяти собаках с поверхностными повреждениями роговицыподтверждает эффективность применения стволовых клеток лимбальной ижировой ткани.РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ1. Полученные данные об особенностях морфологического иморфометрического строения роговицы кролика вносят вклад всравнительную межвидовую морфологию животных и могут бытьиспользованы в учебном процессе на кафедрах анатомии, гистологии,звероводства, биологии и патологии мелких домашних, лабораторных иэкзотических животных, ветеринарной хирургии, а также при написаниисоответствующих разделов учебников, учебных пособий и монографий.2.
Полученные экспериментальные данные по применению стволовыхклеток разных типов являются базовыми для использования в практическойветеринарной медицине при терапии повреждений роговицы глаза.3. Трансплантация клеточных продуктов может быть показанаживотным, при состояниях, сопровождающихся синдромом лимбальнойнедостаточности, а также при кератопластике высокого риска с цельюулучшения приживления трансплантата за счет улучшения пролиферации имиграции собственных стволовых клеток роговицы из их биологическогопула.СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВРезультаты исследований используются в учебном процессе (при чтениилекций и проведении лабораторно-практических занятий) и научноисследовательской работе на кафедрах анатомии и гистологии животныхимени профессора А.Ф.
Климова ФБГОУ ВО МГАВМиБ – МВА имениК.И. Скрябина; морфологии, физиологии и патологии Оренбургскогоаграрного университета, анатомии; акушерства и хирургии Самарскойгосударственной сельскохозяйственной академии; анатомии и ветеринарной23хирургии Казанской государственной академии ветеринарной медициныимени Н.Э. Баумана. Полученные результаты исследований внедрены влечебный процесс отделения офтальмологии Инновационного ветеринарногоцентра Московской ветеринарной академии.СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1.
Вологжанина Н.В. Перспективы применения стволовых клетокразличных типов в ветеринарной офтальмологии (Экспериментальноеисследование) / Слесаренко Н.А., Ставицкий С.Б., Еремин И.И. //Естественные и технические науки. – 2013. – № 3. – С. 1052. Вологжанина Н.В. Морфологическое обоснование применениястволовых клеток разных типов в условиях моделированного дефектароговицы глаза у кролика // Морфология. – 2016. – №3. – С. 523. ВологжанинаН.В.Морфологическаяифункциональнаяхарактеристика регенерации роговицы после применения аутологичнойстромально-васкулярной фракции. Экспериментальное исследование. //Ветеринария, зоотехния и биотехнология. – 2017.
– №4. – С. 64. Вологжанина Н.В. Клеточные технологии в ветеринарнойофтальмологии // PetСовет. – 2017. – №2. – С. 175. Вологжанина Н.В. Аутотрансплантация лимба при унилатеральномсимблефароне у кошек / Н.А. Слесаренко, Н.В. Вологжанина // Сборниктрудов VI всероссийской межвузовской конференции по ветеринарнойхирургии 2016 г. ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина. – 2016.24.