Диссертация (1151535), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Группы крови и полиморфизм белков крови определяли в лаборатории генетики сельскохозяйственных животных ВИЖ имениЛ.К. Эрнста совместно с д.б.н., профессором Н.С. Марзановым, к.б.н. Л.К.Марзановой и к.б.н. С.Н. Петровым. Определение эритроцитарных антигенов7 систем групп крови овец проводили по 15 сывороткам–реагентам. Постановку реакций гемолиза и агглютинации осуществляли по описанным ранееметодикам (Марзанов Н.С., 1994).Полиморфизм белков крови изучалис помощью электрофореза наполиакриламидном геле (ПААГ).
Идентификацию вариантов белков крови45по локусам гемоглобина (НВ), трансферрина (TF), альбумина (ALB), преальбумина (PRE) проводили методом вертикального электрофореза на полиакриламидном геле (Петров С.Н., 2008).Для исследования влияния полиморфного гена костного морфогенетического белка 15 (BMP-15) на плодовитость была взята цельная кровь от50 овцематок романовской породы МУСХП «Прогресс» Воронежской области. Возраст животных на момент взятия образцов крови составлял 4–5 лет.Выделение ДНК из цельной крови для определения нормального или дикого(W–wild) и мутантного (M–mutant) аллелей гена костного морфогенетического белка 15 (BMP-15) проводили по методике, описанной Polley Sh. et al.(2009) и Малюченко О.П.
и др. (2011). Работа по отработке режима ПЦР–анализа была выполнена с использованием научного оборудования Центраколлективного пользования ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии"Биотехнология". Учет полученных данных по количеству родившихся ягнят,количеству ягнят на момент отбивки, числу яловых и выбракованных матокза три года осуществляли совместно со специалистами МУСХП «Прогресс»Воронежской области с учетом генотипов ВМР-15 локуса.Обработку популяционно-генетических характеристик проводили наоснове общепринятых подходов. Частоту встречаемости антигенов, аллелейи генотипов рассчитывали исходя из уравнения Харди–Вайнберга (МарзановН.С., 1991). Коэффициент эксцесса (D), показывающий нехватку или избыток наблюдаемой гетерозиготности у исследуемых популяций в сравнении сожидаемой, определяли по формуле, описанной И.А. Захаровым (2006): D =(Ho–He)/He, где Ho–наблюдаемая гетерозиготность, He–ожидаемая гетерозиготность.Статистический анализ полученных данных осуществлялся по Спирмену и Стьюденту (С.
Гланц, 1999). Часть цифровых материалов обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики с применениемкомпьютерных программ: Microsoft Office Excel, 2003; STATISTICA for Windows. Version 7. 1999.46ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ3.1 Характеристика овец местной селекциииз различных регионов Российской Федерациии Республики Монголия по микроядерному тестуЭдильбаевская порода имеет высокую приспособленность к условиямзон сухих степей, пустынь и полупустынь, обладает большой живой массойи исключительными убойными качествами. С 1959 г.
порода была утверждена как основная в мясосальном овцеводстве и самая продуктивная извсех сохранившихся казахских курдючных овец. Генофонд эдильбаевскойпороды сыграл большую роль в создании грубошерстных и полугрубошерстных курдючных овец, таких, например, как казахская полугрубошерстная,сарыаркынская, казахская и многие другие.
Самым главным признакомэдильбаевской породы является скороспелость молодняка, особенно в первые четыре месяца постнатального периода развития. Через 15 дней послерождения ягнята удваивают свой вес, за 40 дней увеличивают в четыре раза.Живая масса 4–х месячного молодняка достигает 40–45 кг при высоком качестве мяса и курдюка (И.А. Ельсукова и др., 2010).В Приуралье создано и утверждено новое селекционное достижение сполучением патента на внутрипородный «бирликский» тип эдильбаевскойпороды овец.
Высокопродуктивные заводские типы эдильбаевской породыразводятся путем чистопородного линейного разведения в племзаводе «Бирликский» Западно–Казахстанской области, а также в племзаводах «Суюндукский», ПК имени Макаш, ПК имени Курмангазы и ТОО «Акжонас» Республики Казахстан. В Российской Федерации на основании приказа Минсельхоза РФ за № 538 от 29 декабря2014 г. в отношении ООО «Волгоград–Эдильбай» произведена запись в «Государственный племенной регистр иприсвоен статус «Селекционно–генетический Центр».Таким образом, в этом племенном хозяйстве содержится два внутрипородных типа – бирликский и суюндукский. Отличия между этими двумя типами до сих пор остаются недостаточно исследованными.
В данном разделе47приводятся результаты исследований по сравнению животных этих двух типов по микроядерному тесту.В результате проведенных исследований установлено, что частотавстречаемости эритроцитов с микроядрами статистически достоверно вышеу животных бирликского типа (Р<0,01) (таблица 3).Таблица 3 - Частота встречаемости эритроцитов с микроядрами уисследованных двух внутрипородных типов эдильбаевской породы овец(в ‰)Внутрипородные типы эдильбаевской породыБирликскийСуюндукскийНомерЧисло микроядерНомерЧисло микроядерживоногона 1000 клетокживотногона 1000 клеток75,013,0155,094,5165,3173,7213,0223,3313,3283,3375,3326,0404,1443,0486,0453,3494,0514,0525,0533,0563,0594,0603,3753,0683,3763,3785,3773,3924,8804,0936,0892,7913,0943,0n=164,6±0,3 **n=183,5±0,2***Примечания: ** – Р<0,01; *** – Р<0,001Различия по результатам микроядерного теста в эритроцитах наиболеевыражены между ярочками разных внутрипородных типов.
У ярок бирликского типа частота встречаемости эритроцитов с микроядрами (5,2±0,2‰)была статистически достоверно выше (Р<0,001) по сравнению с овцами суюндукского типа (3,5±0,2‰).48Поскольку известно, что повышение частоты встречаемости клеток периферической крови с цитогенетическими аномалиями, в т.ч. эритроцитов смикроядрами, тесно связано с уменьшением вероятности репродуктивногоуспеха, можно ожидать, что суюндукский тип эдильбаевской породы овецподвергался более интенсивному давлению естественного отбора по сравнению с бирликским типом. В пользу этого предположения свидетельствуюттакже данные о том, что у баранчиков суюндукского внутрипородного типамасса курдюка за период от 4 до 7 мес.
увеличивается существенно больше,чем у сверстников бирликского типа. Как известно, курдюк овцы сформировался в результате естественного отбора в условиях круглогодичного пастбищного содержания под воздействием засушливого климата.Одной из причин такой дифференциации суюндукского и бирликскоготипов может быть то, что племенные заводы, из которых были взяты два этихтипа эдильбаевской породы, отличались по экологической обстановке. Так,племзавод «Бирлик», источник бирликского типа для племзавода «Волгоград– Эдильбай», расположен в Приуралье, в Джангалинском районе Западно–Казахстанской области. А овцы суюндукского типа были приобретены из ПК«Макаш» Курмангазинского района Атыраузской области. Данный племзавод располагается рядом с широко известным Азгирским ядерным полигоном.
Наблюдаемая дифференциация по микроядерному тесту обусловленатем, что овцы суюндукского типа подвергались более интенсивному постоянному действию факторов экологического стресса в связи с близостью местих разведения к региону с высоким уровнем радионуклидного загрязнения.Хроническое действие естественного отбора способствует воспроизводствуживотных с повышенной устойчивостью к факторам экологического стресса.Вероятно, этим объясняется относительно низкая частота встречаемости клеток с цитогенетическими аномалиями у животных суюндукского типа.Таким образом, полученные нами данные позволяют сделать вывод отом, что, судя по результатам микроядерного теста, суюндукский тип эдильбаевской овцы обладает более высоким потенциалом адаптации к неблаго49приятным условиям содержания и разведения по сравнению с бирликскимтипом, что является результатом действия в поколениях естественного отбора с относительно повышенной интенсивностью.Сравнительный анализ результатов микроядерного теста был выполнену овец местной селекции, разводимых в различных зонах Российской Федерации и Монголии.Калмыцкая курдючная овца появилась на территории России в XVIIвеке из Монголии и Западного Китая при переселении калмыков.
Калмыцкаякурдючная овца относится к мясо–сальному типу. У этих животных имеетсянекоторая схожесть с овцами эдильбаевской породы. В целом животные характеризуются крупным ростом, крепким массивным костяком, высоконогостью, относительно грубой шерстью. Масть калмыцких курдючных овец до70 % рыжая, до 20 % белая.У традиционной калмыцкой овцы грубая шерсть, но приблизительно в70–х годах в Калмыкию были завезены мериносы (Л.Т. Дорджиев, 1993).После скрещивания результат превзошёл все ожидания – не утратив своихвкусовых качеств, калмыцкая овца стала давать ещё и высококачественную,близкую к мериносовой шерсти. Основным методом разведения овец калмыцкой курдючной породы является чистопородное разведение, при которомсовершенствование племенных и продуктивных качеств как породы в целом,так и отдельных генетических групп осуществляется методом внутрипородной селекции.Группы овец калмыцкой породы, разводимые в различных зонах республики,имеютсущественныеразличияпоконституционально-продуктивному комплексу.
Выбор наиболее эффективного типа овец для определенной зоны разведения может быть осуществлен лишь на основаниисравнительной оценки с учетом продуктивных и биологических особенностей (И.В. Церенов, 2013). Лучшие стада калмыцкой курдючной овцы находятся в Республике Калмыкия, в настоящее время в хозяйствах всех категорий республики имеются 37,2 тыс. овец, в том числе маток – 24536 голов50калмыцкой курдючной породы. Зоной разведения овец, кроме Калмыкии, является юго-восток Ростовской области, северо-восток Ставрополья, Астраханская и Волгоградская области. По данным правительства РеспубликиКалмыкия, численность калмыцких курдючных овец к концу 2015 года составила более 800 тыс.
голов (Ю.А. Юлдашбаев, И.В. Церенов, 2013). Получены данные по микроядерному тесту у 27 овец калмыцкой породы (таблица4). Установлено, что средняя встречаемость эритроцитов с микроядрами составляет 4,3±0,3 ‰ на 1000 клеток.Таблица 4 - Частота встречаемости эритроцитов с микроядрамиу исследованных пород овец, взрослые животные (‰)Породы овецКоличествоисследованныхживотныхРомановскаяМонгольская местная2927Число микроядер на 1000клеток5,3±,035,3±,04Калмыцкая27Эдильбаевская, внутрипородные типы:Бирликский164,3±0,3Суюндукский183,5±0,2*1174,6±0,3Всего4,6±0,3Примечание: * - разница между породами оказалась недостоверной, кроме овец суюндукского типа, сравнение животных этого типа с бирликским типом и породами: романовская, монгольская местная и калмыцкая показало достоверное различие (Р<0,001)В Монголии первое место по количеству поголовья занимают овцы,второе козы, затем лошади и крупный рогатый скот.