Диссертация (1141412), страница 24
Текст из файла (страница 24)
Расчет количественного содержания фенольных соединений вели сиспользованием удельного коэффициента поглощения хлорогеновой кислоты в спиртеэтиловом 50% равном 504 [31]. Результаты определения представлены в таблице 37.Таблица 37 – Результаты изучения антиоксидантной активности извлечений из травыкульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистойАнтиоксидантная активность мг/гЭкстрагентВодаочищеннаяСпиртэтиловый 30%Спиртэтиловый 50%Спиртэтиловый 70%Спиртэтиловый 96%ВодаочищеннаяСпиртэтиловый 30%Спиртэтиловый 50%Спиртэтиловый 70%Спиртэтиловый 96%в пересчетена рутинв пересчетена цинарозидв пересчетенакверцетинСодержаниефлавоноидов%Содержаниесуммыфенольныхсоединений %Кульбаба осенняя10,750±0,41010,670±0,4106,380±0,2500,130±0,0051,640±0,05010,430±0,53010,360±0,5306,190±0,3200,130±0,0051,420±0,0504,920±0,1604,880±0,1502,920±0,1100,200±0,0090,670±0,0705,900±0,2305,860 ±0,2303,500±0,1400,240±0,0110,630±0,0204,580±0,1804,550 ±0,1802,720±0,1200,110±0,0020,590±0,040Кульбаба шершавоволосистая10,550±0,48010,470±0,4806,26±0,2900,130±0,0061,630±0,0608,610±0,2908,550±0,2905,11±0,1700,130±0,0041,170±0,0604,060±0,1704,030±0,1702,42±0,1000,200±0,0040,630±0,0405,110±0,1805,080±0,1703,03±0,1000,230±0,0100,600±0,0204,200±0,1504,180±0,1802,49±0,0800,110±0,0020,570±0,050Из данных таблицы 37 и рисунков 65 и 66 следует, что антиоксидантной активностьюобладают все исследуемые извлечения из травы кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой.
Наибольшая активность извлечений наблюдается при использовании вкачестве экстрагента воды очищенной (рисунки 65, 66), при этом же наблюдается наиболееполное извлечение фенольных соединений.Антиоксидантная активность водных извлечений составила (6,380+0,250 мг/г и6,260±0,290 мг/гв пересчете на кверцетин, 10,750+0,410 мг/г и 10,550+0,480 мг/г в пересчетена рутин, 10,670+0,410 мг/г и 10,470±0,480 мг/г в пересчете на цинарозид для кульбабы126осеннейикульбабышершавоволосистойсоответственно),содержаниефенольныхсоединений при этом составило 1,640±0,050% и 1,630±0,060% соответственно.
Это говорит отом, что антиоксидантная активность кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой вбольшей степени обусловлена водорастворимыми соединениями, содержащимися в них(гидроксикоричными кислотами, аскорбиновой кислотой, аминокислотами, полисахаридамиАнтиоксидантная активностьи т.д.).12,0010,75 10,6710,43 10,3610,008,006,386,195,90 5,864,92 4,886,004,58 4,553,502,924,002,722,000,00Водаочищеннаяв пересчете на рутинСпиртСпиртСпиртСпиртэтиловый 30% этиловый 50% этиловый 70% этиловый 96%Экстрагентв пересчете на цинарозидв пересчете на кверцетинРисунок 65 - Значения антиоксидантной активности извлечений из травы кульбабыосенней в пересчете на рутин, цинарозид и кверцетин при использовании различныхАнтиоксидантная активностьэкстрагентов (мг/г)12,0010,55 10,478,61 8,5510,008,006,265,11 5,085,116,004,06 4,034,002,423,034,20 4,182,492,000,00Водаочищеннаяв пересчете на рутинСпиртСпиртСпиртСпиртэтиловый 30% этиловый 50% этиловый 70% этиловый 96%Экстрагентв пересчете на цинарозидв пересчете на кверцетинРисунок 66 - Значения антиоксидантной активности извлечений из травы кульбабышершавоволосистой в пересчете на рутин, цинарозид и кверцетин при использованииразличных экстрагентов (мг/г)1275.3 Результаты определения отхаркивающей активностиОценку отхаркивающей активности исследуемых фитокомплексов проводили пометодике, основанной на измерении скорости сокращения реснитчатого эпителия пищеводалягушки [глава 2, раздел 2.6.3].Принимая во внимание значительное варьирование первоначальных скоростейдвижения мерцательного эпителия у различных животных, нами предложен расчеткоэффициента ускорения (КУ) движения ресничек мерцательного эпителия пищеводалягушки, как отношение скорости, полученной после нанесения исследуемых препаратов, кпервоначальной.Уменьшениеданногопоказателясвидетельствуетоповышениидвигательной активности мерцательного эпителия [20].
В качестве препарата сравненияиспользовали Мукалтин. Результаты исследования представлены в таблице 38.Таблица 38 – Изучение отхаркивающей активности фитокомплексов, выделенных изтравы кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистойФитокомплексМукалтинВремя заглатываниянити, сконтрольисследуемыйфитокомплекс24,16±1,6714,98±1,50КоэффициентускоренияПовышениедвигательнойактивностимерцательногоэпителия, %0,62±0,0138,33±1,35*Настой кульбабы23,06±1,1013,89±1,280,60±0,0340,16±3,24*осеннейВодорастворимыйполисахаридный24,28±0,6212,28±0,480,58±0,0349,20±2,62*комплекс кульбабыосеннейНастой кульбабы24,28±1,5214,89±0,970,61±0,0138,88±0,88*шершавоволосистойВодорастворимыйполисахаридный20,61±0,5811,89±0,750,58±0,0342,36±3,09*комплекс кульбабышершавоволосистойПримечание * - различия по сравнению с контролем статистически достоверны приР<0,05.Данные, представленные в таблице 38, говорят о том, что все исследуемыефитокомплексы обладают отхаркивающим действием сопоставимым или превышающим пофармакологической активности действие препарата сравнения Мукалтина, получаемого изтравыалтеялекарственного.Наибольшуюотхаркивающуюактивностьпроявили128водорастворимыеполисахаридныекомплексыкульбабыосеннейикульбабышершавоволосистой, увелечение двигательной активности которых составило 49,20±2,62% и42,36±3,09%, для мукалтина – 38,33±1,35%.5.4 Результаты определения противовоспалительной активностиВоспаление–этосложнаямногостадийнаязащитнаяреакцияорганизма,возникающая в ответ на воздействие повреждающих факторов различной природы.Воспалительные реакции, возникающие при заболеваниях инфекционной и неинфекционнойприроды, могут приводить к нарушению функции органов и тканей, а также осложнятьтечение многих заболеваний.Хроническое течение воспалительных процессов приводит не только к утратетрудовой деятельности на длительный период, но и значительному снижению качестважизни.Следовательно,возможностьфармакологическойкоррекции воспалительныхпроцессов является актуальной проблемой современной медицины.
Высокий интереспредставляют лекарственные растения, обладающие противовоспалительной активностью,так как отличаются низкой токсичностью, существенно меньшим числом побочныхэффектов и противопоказаний.Противовоспалительнуюактивностьводныхизвлеченийиводорастворимыхполисахаридных комплексов, полученных из изучаемых видов, оценивали с учетом ихвлияния на различные стадии воспалительного процесса.Влияние на процессы экссудацииС целью изучения противоэкссудативного действия исследуемых видов моделировалиострый воспаленый процесс, для чего вводили мышам самцам в заднюю лапу 0,05 млводного раствора формалина 2,5% [глава 2, раздел 2.6.4].
Полученные экспериментальныеданные представлены в таблице 39.Из результатов представленных в таблице 39 видно, что величина отека лап мышей вконтрольном опыте составляет 58,27+2,65 мг. Данная величина взята нами за 100%. Поддействием настоя и водорастворимого полисахаридного комплекса, полученных из травыкульбабы осенней, происходило снижение величины отека лап мышей до 69,85% для настояи до 63,55% для водорастворимого полисахаридного комплекса. Противовоспалительныйэффектданныхфитокомплексов составил30,15% и36,45% соответственно,чтосвидетельствует об их выраженной антиэкссудативной активности.
При применении129фитокомплексов, полученных из травы кульбабы шершавоволосистой установлено снижениевеличины отека лап мышей до 36,90% для настоя и до 44,69% для водорастворимогополисахаридного комплекса.Таблица 39 – Влияние фитокомплексов травы кульбабы осенней и травы кульбабышершавоволосистой на отек лапы у мышей, вызванный формалиномПрепарат/фитокомплексправойлевой(М±m), мг%126,51184,7858,27+2,65100,0Противовоспалительныйэффект, %-114,82158,2743,45+2,93*74,5725,43121,75162,4540,70+2,77*69,8530,15100мг/кг108,14145,1737,03+2,97*63,5536,451000мг/кг123,52160,2836,76±1,99*63,1036,90100мг/кг130,75162,9832,23±2,27*55,3144,69ДозаКонтрольКислотаацетилсалициловаяНастой кульбабыосеннейВодорастворимыйполисахаридныйкомплекс кульбабыосеннейНастой кульбабышершавоволосистойВодорастворимыйполисахаридныйкомплекс кульбабышершавоволосистойПримечание * Р<0,05.300мг/кг1000мг/кгВес лапок, мгВеличина отекаразличия по сравнению с контролем статистически достоверны приАнтиэкссудативная активность анализируемых фитокомплексов превышает таковуюпрепарата сравнения – ацетилсалициловой кислоты.Влияние на пролиферациюДля установления влияния исследуемых фитокомплексов на пролиферативную фазувоспалительного процесса использовали фармакологическую модель «ватная гранулема»[глава 2, раздел 2.6.4].
Результаты представлены в таблице 40.На основании данных, представленных в таблице 40, следует, что вес грануляционнофиброзной ткани в контрольной группе животных составил 140,55±8,07 мг. Данное значениебыло принято нами за 100%. В сериях опытов с применением исследуемых фитокомплексовмасса грануляционно-фиброзной ткани по сравнению с результатами контроля снижалась: на58,28% для настоя и на 70,30% для водорастворимых полисахаридных комплексов,полученныхизтравыкульбабыосенней.Полученныеизтравыкульбабышершавоволосистой настой и водорастворимые полисахаридные комплексы снижали массугрануляционно-фиброзной ткани на 59,47% и 64,30% соответственно, что приводило кдостоверному снижению воспалительного процесса.130Таблица 40 – Влияние фитокомплексов, полученных из травы кульбабы осенней икульбабы шершавоволосистой, на образование грануляционно-фиброзной ткани у крысПрепарат/фитокомплексМасса сухихгранулем(М+m), мг140,55+8,0744,27+3,34*ЧисложивотныхДозаУгнетениеобразованиягранулемы, %68,50Контроль6Индометацин6 мг/кг6Настой кульбабы1000 мг/кг660,30+4,76*58,28осеннейВодорастворимыйполисахаридный100 мг/кг641,75+3,37*70,30комплекс кульбабыосеннейНастой кульбабы1000 мг/кг656,97+6,41*59,47шершавоволосистойВодорастворимыйполисахаридный100 мг/кг650,17+3,95*64,30комплекс кульбабышершавоволосистойПримечание * - различия по сравнению с контролем статистически достоверны приР<0,05.Наиболеевыраженноеантипролиферативноедействиевыявленодляводорастворимых полисахаридных комплексов, полученных из исследуемых видов.
Так,антипролиферативная активность водорастворимого полисахаридного комплекса травыкульбабы шершавоволосистой близка к антипролиферативной активности препаратасравнения-индометацина, в то время как водорастворимый полисахаридный комплекскульбабы осенней превзошел индометацин по изучаемому виду активности.Влияние на проницаемость капилляров у кроликовОсновныммаркеромостроговоспаленияявляетсяповышеннаясосудистаяпроницаемость, ведущая к выходу насыщенного белками экссудата во внесосудистоепространство, что приводит к воспалительному отеку.ОпределениепроводилисогласноантифлогистическойметодикеОйвина,активностиисследуемыхоснованнойнафитокомплексовмоделированиилокальнойвоспалительной реакции с помощью ксилола на кроликах-альбиносах [глава 2, раздел 2.6.4].В ходе эксперемента было установлено, что при введении изучаемых фитокомплексовнаблюдаетсязначительнаязадержкаотносительноконтрольнойгруппы.времениТакимдопроявленияобразом,окращенныхисследуемыепятенфитокомплексыспособствуют снижению проницаемости гистогематического барьера.
Установлена задержкапоявления пятен окрашивания от 4,20+0,32 мин до 6,28+0,34 мин, а также уменьшение ихдиаметра от 1,29+0,06 см до 1,08+0,04 см. Введение водорастворимых полисахаридных131комплексов травы кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой показало снижениепроницаемости сосудистой стенки, которое однако является не достоверным по сравнению сконтрольной группой. В то же время, настои травы кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой проявили большую ангиофлогистическую активность (таблица 41).Таблица 41 – Влияние изучаемых фитокомплексов, полученных из травы кульбабыосенней и кульбабы шершавоволосистой, на проницаемость капилляров кроликовФитокомплексДозаКонтроль-Настой1000мг/кгВодорастворимыйполисахаридныйкомплексНастойВодорастворимыйполисахаридныйкомплексУвеличениеЛатентныйлатентногопериодпериодапоявленияпоявления пятенпятенокрашиванияокрашивания,минмин%3,96+0,18*Кульбаба осенняя5,93±0,40*1,9649,49100мг/кг1000мг/кг100мг/кгДиаметр пятенокрашиваниясмУменьшениедиаметра пятенокрашивания,%1,74+0,03*-1,08±0,04*49,491,29±0,06*25,86Кульбаба шершавоволосистая6,28±0,34*2,3258,591,23±0,06*29,314,20±0,32*1,18±0,05*32,184,69±0,32*0,730,2418,436,06Примечание * - различия по сравнению с контролем статистически достоверны приР<0,05.Таким образом, капилляроукрепляющим действием обладают только настои травыкульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой.5.5 Результаты определения антибактериальной активностиАнтибактериальноедействиеизучаемыхнастоевопределялиметодомкультивирования микроорганизмов на питательной среде с добавлением исследуемогопрепарата в сравнении с контролем [глава 2, раздел 2.6.5].Антибактериальные свойства исследуемого настоя изучали в отношении следующихкультур: Staphylococcus aureus, Esherichia coli, Candida, Bacillus cereus, Pseudomonasaeruginosa, Proteus vulgaris.Результаты исследования антимикробного действия представлены в таблице 42.132Таблица 42 – Антимикробная активность настоев из травы кульбабы осенней икульбабы шершавоволосистойCandiaStaphylococcusaureusEscherichiacoliBacilluscereusPseudomonasaeruginosaProteusvulgarisТест - культура1:21:4++++++++-1:10++++++1:2--+---1:4+-++--1:10+++++Примечание: «-» - отсутствие роста, «+» - слабый рост, «+» - сильный рост.+Лекарственная формаРазведениеНастой травы кульбабыосеннейНастой травыкульбабы шершавоволосистойИзданныхтаблицы42следует,чтонастойкульбабыосеннейпроявилантибактериальную активность в отношении грибов рода Candida и Bacillus cereus вразведении 1:2 и Proteus vulgaris в разведении 1:2 и 1:4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
