Диссертация (1141406), страница 14
Текст из файла (страница 14)
2 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью25 мл, прибавляют 5 мл 2 % спиртового раствора алюминия хлорида, 0,1 млуксусной кислоты и объем раствора в колбе доводят 95 % этанолом до метки.Через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора с помощью спектрофотометра при длине волны 409 ± 2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.Раствором сравнения служит раствор, состоящий из 2 мл раствора А, 0,1 млуксусной кислоты и доведенный 96 % этанолом до метки в мерной колбевместимостью 25 мл. Параллельно в тех же условиях измеряют оптическуюплотность раствора, содержащего 1 мл раствора РСО рутина, 5 мл 2 % спиртового раствора алюминия хлорида, 0,1 уксусной кислоты, доведенный 95 %этанолом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.Примечание. 1. Приготовление раствора стандартного образца.
Около 0,05 г (точная навеска) (ГФ Х, ст. 587) предварительно высушенного при130 -135 0С в течение 3 часов, растворяют в 90 мл 95 % этанола в мернойколбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем раствора тем же этанолом до метки и перемешивают.2. Приготовление 2 % спиртового раствора алюминия хлорида. 2 галюминия хлорида (ГОСТ 13759-75) растворяют в 90 мл 95 % этанола в мерной колбе вместимостью 100 мл. После растворения тем же этанолом доводят до метки.104Рис 38. УФ – спектр поглощения продуктов реакции флавоноидов салюминия хлоридом1 - извлечение из листьев черной смородины; 2 – РСО рутинаСодержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле (4):D × m × 1 × 100 × 25 × 100 × 100D × m × 5000Х = ——————————————— = ————————, (4)D0 × 100 × 25 × а × 2 × (100- W)D × а × (100- W)где: D – оптическая плотность испытуемого раствора;D0 – оптическая плотность РСО рутина;m – масса рутина для приготовления РСО;а – навеска сырья, граммы;W – потеря в массе при высушивании, проценты.Был построен калибровочный график продуктов реакции рутина салюминия хлоридом.
Установлено, что калибровочная кривая зависимостимежду оптической плотностью и концентрацией рутина носит линейный характер в пределах концентраций от 0,0002 до 0,0020 %. Чувствительностьопределения 0,002 мг/мл рутина. Методика была апробирована с целью изучения еѐ воспроизводимости и точности. Полученные результаты представлены в табл. 18.105Таблица 18Метрологическая характеристика методики количественного определения флавоноидов в свежих листьях смородиныX, г1,94f7S x0,033P,%95Т (p,f)2,36∆ x0,078А+%+ 4,01Ошибка единичного определения при доверительной вероятности 0,95составляет + 4,01 %. Отсутствие систематической ошибки доказано проведением опытов с использованием метода добавок рутина (табл. 19).Таблица 19Результаты количественного определения флавоноидов в свежихлистьях смородины черной с использованием метода добавок рутина№/№серии12345Найденофлавоноидов, г/100г1,711,461,941,361,70ДобавДолжно быть влено ру- суммефлавотина, гноидов и рутина,г/100г0,432,140,732,190,972,971,022,380,432,13Найденов Относисумме флаво- тельнаяноидов и ру- ошибка, %тина, г/100г2,11- 1,42,24+ 2,32,93- 1,42,34- 1,72,19+ 2,8Для установления границ содержания флавоноидов с помощью разработанной методики были проанализированы свежие и высушенные листьячерной смородины.
Результаты представлены в табл. 20 и 21.106Таблица 20Количественное содержание флавоноидовв свежих листьях смородины чернойНомер образца12345Содержание флавоноидов, %1,711,461,941,361,70Содержание флавоноидов колеблется от 1,36 до 1,94 %. На основанииполученных результатов рекомендовано установить границу содержаниясуммы флавоноидов в свежих листьях смородины в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье не менее 1 %.Для установления границ содержания флавоноидов с помощью разработанной методики были проанализированы высушенные листья чернойсмородины.
Установлено, что содержание флавоноидов колеблется от 1,29 до1,84 %.Таблица 21Содержание суммы флавоноидов в высушенных листьяхчерной смородиныНомер образца12345Содержание флавоноидов, %1,291,631,681,391,84На основании полученных данных рекомендуется норма содержаниясуммы флавоноидов в высушенных листьях черной смородины не менее 1,0%.1075.1.3. Установление сроков годности сырьяСвежие листья смородины чернойКонтроль за микробиологической чистотой должен осуществляться всоответствии с требованиями Государственной фармакопеи РФ. Учитывая,что сырье подвергается немедленной переработке, считаем необходимым дополнить этот раздел предложением «определение микробиологической чистоты должно осуществляться по специальному требованию потребителя»,поскольку анализ достаточно длительный.Упаковку сырья рекомендуется производить в ящики с отверстиями вбоковых стенках и крышках, по 0,5 кг нетто.Транспортирование.
Свежесобранное сырье следует отправлять дляпереработки немедленно после сбора любым видом транспорта.Условия хранения. Сырье подлежит переработке в течение 24 часов смомента сбора.Срок годности. В гомеопатии срок хранения сырья, как правило, составляет не более 24 часов, поэтому мы провели контроль качества исследуемого сырья в течение суток. Результаты представлены в табл. 22.Таблица 22Результаты анализа свежесобранного сырья листьев смородины чернойв процессе храненияВремя допереработкиЛРС, часы0ВнешниепризнакиМикроскопия, Влажность,реакции, ТСХ %соответствует соответствует65,71Остальныечисловые показателисоответствует6соответствует соответствует65,62соответствует12соответствует соответствует65,61соответствует18соответствует соответствует65,17соответствует24соответствует соответствует64,91соответствуетИз данных табл. 22 видно, что с момента сбора изменилась тольковлажность после 18 часов хранения.
Влажность изменилась с 65,71 % до10865,17 %. Остальные характеристики: внешние признаки, подлинность и другие показатели качества сырья в процессе хранения сырья в течение 24 часовпрактически не изменилась.Высушенные листья смородины чернойРезультаты по изучению срока годности высушенного сырья представлены в табл. 23. На основе полученных данных установлено, что в течение 2лет сырье отвечает всем требованиям ФС.Таблица 23Показатели качества высушенных листьев черной смородиныв процессе храненияНаименование показателей качества идопустимые отклонения1Сумма флавоноидовв пересчете на рутин,не менее 1,0 %.Влажность,не более 15 %Зола общая,не более 14,0 %Зола не растворимаяв 10 % кислоте хлористоводородной, неболее 1,0 %№ образца212345123451234512345Срок храненияИсходные ЧерезЧерезданные1 год2 года3451,681,371,721,291,4912,4413,0712,5714,1011,7712,3412,4411,7612,9913,110,110,540,420,200,101,591,331,651,211,4212,4113,0012,5414,0111,7112,3012,4211,7412,9513,100,100,550,430,210,121,471,241,511,141,3912,3912,8112,4013,9711,6912,3112,4111,7512,9313,110,120,530,420,190,11Через2 года 6месяцев61,371,171,491,111,2712,3512,4812,4513,5411,5512,2712,3911,6912,9113,090,130,520,440,210,13109Продолжение табл.
231Органические примеси,не более 0,5 %12345Минеральные при1меси,2не более 0,5 %345Микробиологическая 1чистота,2ОФС 42–0016-043(категория 4 А).45230,360,410,380,330,370,340,270,380,400,31Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.40,370,400,360,350,350,330,260,370,390,30Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.50,350,420,380,320,350,320,270,380,370,29Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.60,370,430,370,310,360,330,290,360,390,31Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.Соотв.Полученные результаты использованы при разработке проектов ФС насвежее и высушенное сырье черной смородины.1105.2. Получение и стандартизация настоек гомеопатических матричных из свежих и высушенных листьев смородины чернойСырьем для получения настоек служили свежие и высушенные листьясмородины черной (Ribes nigrum L.), заготовленные в 2011-2012 гг.5.2.1.
Технология приготовления НГМ из свежих листьев смородины чернойСырьем для получения настойки гомеопатической матричной служат свежие листья черной смородины, собранные в июле-августе.Настойку листьев черной смородины гомеопатическую матричную готовили из свежего сырья методом мацерации по методу 3 ОФС «Настойкигомеопатические матричные» с использованием 86 % (по массе) этанолом.Данный метод применяется для свежего сырья, содержащего эфирные масла.Лекарственное растительное сырье взвешивали, определяли влажность,тщательно измельчали и массу немедленно заливали не менее, чем половинным от массы ЛРС количеством спирта этилового 86 % (по массе), перемешивали и оставляли для мацерации в хорошо закрытом сосуде при температуре не выше 20 °С.Расчет количества экстрагента определяли по влажности свежего растительного сырья.По формуле (5) рассчитывали необходимое для растительной массыколичество спирта этилового 86 % (по массе) в килограммах (Е).2.m.WE = ---------------- , (5)100где: m - масса растительного сырья, в килограммах;W - влажность сырья, в процентах.От рассчитанного количества спирта этилового 86 % (Е) вычитали количество ранее прибавленного спирта, и остаток спирта смешивали с полученной массой.
Массу оставляли не менее чем на 10 дней при температуре111не выше 20оС при периодическом встряхивании, затем отжимаюли и фильтровали.Если содержание сухого остатка или количественное содержание превышают нормируемое частной нормативной документацией, проводят разбавление настойки, используя спирт этиловый 62 % (по массе).
Количествоспирта этилового 62 % (по массе) (Е1) в килограммах, необходимое для разбавления, вычисляют по формуле (6):M . (Bx - Bo)E1 = -------------------- (6),Boгде: M - масса фильтрата, в килограммах;Bx - содержание сухого остатка или количественное содержание действующих веществ в фильтрате, в процентах;Bо - содержание сухого остатка или количественное содержание действующих веществ, нормируемые частной нормативной документацией, в процентах.После добавления спирта этилового настойку отстаивают не менее 5дней при температуре не выше 20°С, после чего при необходимости фильтруют.Содержание спирта в настойке, полученной по методу 3, составляетоколо 60 % (по массе).Таблица 24Расчетное соотношение масс сырья и экстрагента для получения настоекгомеопатических матричных из свежих листьев смородины чернойОбразец сырьяМасса сырья,кгМасса экстрагента (спирта этилового86%), кг123450,5000,5000,5000,5000,5000,6570,6560,6560,6520,649112Настойки гомеопатические фильтровали через фильтровальный складчатый картон.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
