Диссертация (1141406), страница 12
Текст из файла (страница 12)
1512345БИОСИНТЕТИЧЕСКИЕ ТИПЫ АРОМАДЕНДРАНА И ГВАЯНАГвайа-1(5),7(11)-диен;1,2,3,4,5,6,7,8Октагидро-1,4диметил-7изопропилиденазулен1,1,4,7-Тетраметилдекагидро-1H-циклопропа[e]азулен-4-ол1,1,7-Триметил-4метилендека-гидро-1Hциклопропа-[e]азулен7-ол (Спатуленол)1,1,4,7-Тетраметилдекагидро-1H-циклопропа[e]азулен эпоксид(Аромадендрена эпоксид), сумма стереоизомеров1595HO16530,290,2316830,74170517201723среднеезначение17160,030,030,03суммарно0,09OHOМ+• 204(71), 189(28),175(23), 161(85),147(19), 133(53),119(40), 105(64),91(70), 81(100),69(83), 55 (34),41(72)М+• 220(2), 204(16),189(17), 177(10),161(62), 147(21),135(28), 121(51),105(77), 93(94),79(96), 69(46),55(49), 43(100)М+• 220(6), 205(14),187(16), 177(17),162(45), 159(50),147(39), 131(27),119(100), 105(57),91(91), 79(44),67(24), 55 (23),43(87)Типичный спектр:М+• 220(17), 204(8),187(7), 177(4),162(14), 147(10),135(34), 121(18),107(21), 93(30),81(20), 67(26), 55(20), 41(27)БИОСИНТЕТИЧЕСКИЙ ТИП БИСАБОЛАНА4-[(1Z)-1,5-Диметил1,4-гексадиенил]-1метил-1-циклогексен(Цис-α-Бисаболен)1422СледовыеколичестваМ+• 204(5), 189(13),175(5), 161(26),147(15), 133(20),121(36), 105(36),93(100), 79(54),67(69), 53 (31),41(51)90Продолжение табл.
1512345ПРОЧИЕ7-Метил-4изопропилиденбицикло[5.3.1]ундец-1ен-8-ол, сумма стереоизомеров18291836среднеезначение1832HO6,10,14-Триметил-2пентадеканон0,170,15суммарно0.3218520,10OТипичный спектр:М+• 220(100),202(20), 187(52),176(32), 173(10),159(70), 145(50),131(66), 119(48),105(60), 91(70),79(46), 67(36), 55(42), 41(66)267(3), 135(16),123(14), 109(23),95(31), 85(23),71(48), 58 (76),43(100)СОЕДИНЕНИЯ, НЕ ОТНОСЯЩИЕСЯ К КЛАССУ ТЕРПЕНОИДОВГлицерилтриацетат(Триацетин)AcOн-Гептил-δвалеролактон; 6Гептилтетрагидро-2Hпиран-2-он13360,1017450,26OAcOOAcO158(13), 145(15),116(8), 103(23),86(3), 53(2), 43(100)М+• 198(1), 180(2),162(6), 151(3),136(8), 127(6),114(12), 99(100),84(12), 71(40), 55(40), 41(48)ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫЕ КОМПОНЕНТЫ97,33 %НЕИДЕНТИФИЦИРОВАННЫЕ КОМПОНЕНТЫ2,67 %Содержание эфирного масла в почках черной смородины составляет2,74 %.
В эфирном масле почек черной смородины определено 59 компонентов. Основными компонентами эфирного масла, содержание которых превышает 1 %, являются 12 компонентов: сабинен карен, α – пинен, β – пинен,борнил – ацетат, лимонен, фелландрен, терпинолен, β – мерцен, оцимен, β –цитропеллол, 1 – винил – 2 изопропенил – 4 – пропилидин – 1 - метилциклогексан (τ – элемен).914.8. Изучение качественного состава флавоноидов почек и листьевПредставляет интерес сравнительное исследование состава и содержания флавоноидов в почках и листьях черной смородины, поскольку в качестве ЛРС используются оба вида сырья.Целью данного исследования являлось: подбор условий и разработкаметодики определения флавоноидов в сырье черной смородины методомВЖХ/МС и сравнительное изучение флавоноидов в почках и листьях данногорастения.Методика.
4 г высушенных почек или листьев, измельченных до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм, помещалив круглодонную колбу вместимостью 250 мл; прибавляли 60 мл спирта этилового 70 %, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения фильтровали черезбумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы сырье непопало на фильтр.
В круглодонную колбу со штифтом прибавляли 40 млспирта этилового 70 % и нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. После охлаждения извлечение фильтроваличерез тот же фильтр в ту же мерную колбу. Колбу и осадок на фильтре промывали 5 мл спирта этилового 70 % и доводили объем раствора до метки(раствор А).
Аналогичным способом получали извлечение из листьев (извлечение Б).Определение качественного состава флавоноидов проводилось методом ВЭЖХ на хроматографе Waters Acquility с тандемным квадрупольнымMC-детектором TQD (Waters). Подвижная фаза А (ПФ А): вода – ацетонитрил (95 : 5) с муравьиной кислотой. Подвижная фаза В (ПФ В): ацетонитрил смуравьиной кислотой. Хроматографируют испытуемый раствор, приготовленный как указано выше, в следующих условиях:- объем пробы 1 мкл;- колонка 0,21 х 5,0 см Acuility UPLC BEH C18 (1,7 мкм);92- температура колонки 35 °С;- скорость потока 0,5 мл/мин;- градиентный режим хроматографирования формируется путем смешивания подвижных фаз А и В по следующей схеме:Время, мин03,03,1ПФ А, %956095ПФ В, %5405- МС детекция в режиме позитивных ионов;- параметры детектора: напряжение на капилляре - 3 кВ; напряжение наконусе - 55 В; температура капилляра 450 0С; температура источника 120 0С;скорость потока осушающего газа 800 л/ч, скорость потока газа в конусе 50л/ч и сканирование в диапазоне масс от 100 до 1000 ед.Полученные результаты представлены на хроматограммах.
На рис. 29приведены результаты анализа методом ВЭЖХ/МС извлечения А из почекчерной смородины.Из почек выделено и установлено 4 флавоноида, из них 2 производныхкверцетина и 2 производных мирицетина: кверцетин-3-O-[6-O-малонил-β-Dглюкопиранозид] (I), кверцетин-3-O-D-галактопиранозид (гиперозид) (II),мирицетин-3-O-[6-O-малоноил- β-D-глюкопиранозид] (III), мирицетин-3-O-βD-глюкуронид (IV) (рисунки 30-33).На рис. 36 представлены результаты анализа извлечения Б из листьевчерной смородины. Установлено, что в листьях черной смородины содержится 2 производных кверцетина и 2 производных кемпферола: кверцетин-3(I),O-[6-O-малонил-β-D-глюкопиранозид]галактопиранозид(гиперозид)(II),кверцетин-3-O-D-кемферол-3-O-[6-O-малоноил-β-D-глюкопиранозид] (V), кемферол-3-O-D-галактопиранозид (VI) (рисунки 30,31, 34, 35).Производные кверцетина, выделенные из почек и листьев черной смородины по химическому строению совпадают.93Рис.
29. ВЭЖХ флавоноидов в извлечении из почек черной смородиныHOHOOH31HOOOHHOOOOHOOOHOOHOHOOOHHOOOHOMr 551OOHРис. 30. Кверцетин-3-O-[6-OMr 465малонил-β-D-глюкопиранозид](I)HOOHРис. 31. Кверцетин-3-O-Dгалактопиранозид (гиперозид)(II)94HOHOOH24OHOOHHOOOHOHOOOHOOHHOOHOOHOOOHOOHOHOOOHOРис. 32. Мирицетин-3-O-[6-OMr 495малонил-β-D-глюкопиранозид](III)Mr 567OHРис. 33. Мирицетин-3-O-β-Dглюкуронид(IV)OHOH6HO5HOOOOOOHOOHOHOOOOHHOOOHOMr 535OHOHOOHM 449rРис. 34. Кемферол-3-O-[6-Oмалоноил-β-D-глюкопиранозид](V)Рис. 35. Кемферол-3-O-Dгалактопиранозид(VI)OH95Рис.
36. ВЭЖХ флавоноидов в извлечении из листьев черной смородиныТаким образом, установлено, что почки и листья черной смородиныимеют различный качественный состав флавоноидов, что должно учитываться при получении лекарственных препаратов из данных видов сырья.96ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 41. Качественными реакциями и методом ТСХ установлено в почках илистьях черной смородины наличие углеводов (в том числе свободных и связанных сахаров при отсутствии полисахаридов), аминокислот, кумаринов,стероидов, тритерпеноидов, флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, иридоидов, дубильных веществ и аскорбиновой кислоты.2. Изучен качественный и количественный состав углеводов в почках илистьях черной смородины.
Методом ВЭЖХ установлено, что свободные сахара в почках и листьях черной смородины представлены глюкозой и фруктозой; содержание их в почках в 5 раз выше, чем в листьях. Связанные сахарав почках представлены арабинозой, глюкозой и галактозой, в листьях содержатся арабиноза, глюкоза, ксилоза и галактоза; методом капиллярного электрофореза установлено содержание связанных сахаров: в почках - 9,53%, влистьях - 5,53%.3.
Установлен качественный состав и оценено содержание аминокислот в почках и листьях черной смородины; в почках идентифицировано19 аминокислот, в листьях – 18 аминокислот, причем состав аминокислот впочках и листьях одинаков, в листьях отсутствует аминокислота оксипролин.Установлено количественное содержание аминокислот в почках 12,20 %, влистьях 10,65%.4. Разработана спектрофотометрическая методика определения суммысапонинов в пересчете на эсцин в сырье. Установлено содержание сапониновв почках смородины 2,01-2,92%; в листьях 2,81-3,39%. Проведена валидацияметодики.5.
Методом ВЭЖХ проведено сравнительное изучение содержания аскорбиновой кислоты в почках и листьях черной смородины. Установленысущественные колебания в содержании в различных образцах сырья. Содержание аскорбиновой кислоты в почках черной смородины колеблется от 22,5до 71,2 мг/%; в листьях от 60,4 до 191,2 мг/%.976. Установлен качественный состав и количественное содержание катехинов в сырье методом ВЭЖХ. В листьях и почках черной смородиныидентифицированы: галловая кислота, эпигаллокатехин, катехин, эпикатехин, эпигалокатехин галлат, эпикатехин галлат, в почках присутствует ещегаллокатехин; содержание катехинов в почках черной смородины 0,234%, влистьях 0,097%.7.
Исследован компонентный состав эфирного масла почек чернойсмородины методом газовой хромато-масс-спектрометрии. Содержаниеэфирного масла в почках черной смородины составляет 2,74 %. Определено59 компонентов. Основными компонентами эфирного масла, содержание которых превышает 1 % являются 12 компонентов: сабинен карен, α – пинен, β– пинен, борнил – ацетат, лимонен, фелландрен, терпинолен, β – мерцен,оцимен, β – цитропеллол, τ – элемен.8.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
