Автореферат (1141210), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Количественное определение суммарного содержания метаболитов оксида азота(NO3/NO2) в среде инкубации нейтрофилов проводили с помощью реактива Грисса.5. Содержание эстрадиола в сыворотке крови человека определяли методом твердофазногоиммуноферментного анализа с использованием набора реагентов ИммуноФА-Эстрадиол(ЗАО «НВО Иммунотех», Россия).6. Концентрацию тестостерона в сыворотке крови определяли методом твердофазногоиммуноферментного анализа с использованием реактивов Иммуно-ИФА-тестостерон (ЗАО«НВО Иммунотех», Россия).РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕДля изучения феномена функциональной неоднородности нейтрофилов, определенияего взаимосвязи с показателями, характеризующими течение и активность патологическогопроцесса, а также изменения гормонального статуса при СКВ и ССД, были рассчитаныреференсные интервалы изучаемых признаков (Реброва, О.Ю., 2006).
Основываясь наопределении референсных значений показателей ФА нейтрофилов, пациенты былиразделены на группы с низким, средним и высоким уровнем кислородзависимогометаболизма клеток. Показатель спонтанной люминолзависимой хемилюминесценции(сХЛлл), использовавшийся для определения коэффициента активации, в таблицах неприводился, так как являлся дифференцирующим фактором для определения референсныхзначений, делящих пациентов на группы низкой, средней и высокой активности.В настоящем исследовании установлено, что у пациентов с СКВ преобладаютнейтрофилы со средней ФА: 20% больных имели низкие показатели ФА клеток; нейтрофилы54% пациентов обладали средним уровнем кислородзависимого метаболизма, у 26%больных зарегистрированы высокие показатели биоцидности нейтрофильных гранулоцитов.У больных ССД в 43% случаев выявлен низкий показатель ФА клеток, в 43% - средний и в14% - высокий уровень кислородзависимого метаболизма нейтрофилов.
Таким образом, приобоих заболеваниях преобладает группа со средней ФА нейтрофилов.11На фоне увеличения общего количества нейтрофилов при длительных хроническихвоспалительных процессах имеет место значимое снижение их фагоцитарной активности,аэробной и анаэробной бактерицидности, снижение уровня ИЛ-1β и ИЛ-1 Ra, а также ИНФ-γпри повышении ФНО-α (Абакумова Т. В., 2016). В то же время, повышенная активностьнейтрофильных гранулоцитов крови определяет сокращение времени реагирования настимул и увеличивает готовность к реализации функциональных возможностей клеток,позволяяпредположить,чтопреобладаниепациентовсвысокимуровнемкислородзависимого метаболизма нейтрофилов ведет к острому возникновению илиобострению имеющегося заболевания (Аджигайтканова С. К., 2013).В таблице 1 представлены данные изменения кислородзависимого метаболизманейтрофилов у пациентов с СКВ в зависимости от ФА клеток.Таблица №1Функциональная неоднородность нейтрофилов у больных СКВ в зависимости отуровня ФА клеток, Me (Q25-Q75)ПоказательиХЛлл,104, имп/минсХЛлн,104, имп/миниХЛлн,104, имп/минКА ХЛлл,ЕдКА ХЛлн,ЕдNO3/NO2,мкМ/лIIIIIIСКВ сСКВ соСКВ снизкимсреднимвысокимКонтрольуровнемуровнемуровнем(n=25)ФАФАФАнейтро-нейтро-нейтро-филовфиловфилов(n=10)(n=27)(n=13)1,10,61,012,5(0,2-3,0)(0,1-1,3)(1,0-3,2)(1,0-22,8)0,550,351,51,6(0,2-1,1)(0,1-0,5)(0,6-2,8)(1,2-2,5)0,30,1*1,00,9(0,1; 0,9)(0,- 0,4)(0,3-1,0)(0,5-1,0)1,691,570,981,36(0,9-3,3)(0,86-11,0)(0,29-1,33)(0,03-1,65)0,750,670,50,4(0,3-1,5)(0,2-2,0)(0,33-1,0)3,62,65(3,3-4,1)(1,6-5,0)pI-III-IIIII-III0,170,090,080,010,010,610,010,010,620,0930,120,85(0,25-0,75)0,970,370,431,5*1,40,0360,040,59(0,93-2,5)(0,62-1,85)Примечание:* - p <0,05 по сравнению с контролем12По данным таблицы 1 у пациентов с СКВ с низким уровнем ФА нейтрофиловотмечается статистически значимое снижение потенциала образования супероксид-анионапо данным иХЛлн 0,1 (0,1-0,4)<0,3 (0,1-0,9), р<0,05.Снижение потенциала образования супероксидного аниона нейтрофилами с низкимуровнем метаболизма зависит от:1) длительности заболевания: в группе с длительностью заболевания менее пяти лет и низкойбиоцидностью нейтрофилов отмечалось снижение потенциала продукции супероксидногоаниона по данным иХЛлн 0,1 (0,1-0,1)<03, (0,1-0,9) при p<0,05 в сравнении с контролем, упациентов с длительностью заболевания более пяти лет и низким уровнем биоцидностинейтрофильных гранулоцитов так же регистрировалось снижение потенциала продукциисупероксидного аниона по данным иХЛлн в сравнении с контролем 0,1 (0,1-0,8)<0,3 (0,1-0,9)при p<0,05;2) характера течения заболевания: у пациентов с подострым течением заболевания и низкойбиоцидностьюклетокрегистрируетсяснижениеуровняпотенциалапродукциисупероксидного аниона и концентрации метаболитов азота по данным иХЛлн 0,1 (0,10,1)<0,3 (0,1-0,9) при p<0,05 и NO3/NO2 2,25 (1,2-2,5)<3,6 (3,3-4,1) при p<0,05соответственно.
При хроническом течении в группе с низкой функциональной активностьюнейтрофилов имеется статистически значимое уменьшение потенциала образованиясупероксидного анион радикала, по данным иХЛлн, в сравнении с контрольнымипоказателями (0,1 (0,1-0,8)<0,3 (0,1-0,9), р<0,05);3) активности процесса: нейтрофилы, обладающие низким уровнем кислородзависимогометаболизма, у пациентов с активностью СКВ I и II демонстрируют статистически значимоеснижение потенциала образования супероксидного анион-радикала по данным иХЛлн 0,1(0,1-0,4)<0,3 (0,1-0,9), р<0,05 и 0,1 (0,1-0,1)<0,3 (0,1-0,9) при р<0,05 в сравнении с контролем;4) сроками повторной госпитализации: в группе пациентов, госпитализированных повторнов срок менее 12 месяцев обнаружено снижение потенциала продукции супероксидногоаниона по данным иХЛлн в сравнении с контролем 0,1 (0,1-0,1)<0,3 (0,1-0,9) при p<0,05.
Присроке регоспитализации более 12 месяцев у нейтрофилов с низкой ФА отмечалось снижениепотенциала продукции супероксид-аниона по данным иХЛлн 0,1 (0,1-0,4)<0,3 (0,1-0,9), прир<0,05.У больных ССД с низким уровнем функциональной активности нейтрофиловнаблюдалось значительное увеличение резервного потенциала клеток (КАХЛлл) в сравнениис показателями контроля (7,3 (1,2-17,7)>1,06 (0,74-2,25), р<0,05), ассоциированное суменьшением содержания метаболитов оксида азота. Кроме того, в группах наблюдения13определялась статистически значимая дифференциация показателей, характеризующихпродукцию свободных форм кислорода, а так же резерва продукции супероксид-аниона.Повышение резерва и продукции АФК напрямую связано с патогенезом ССД.Известно, что окислительный стресс играет в этих процессах важную роль (P.
Sambo, 1999).АФК могут оказывать различные эффекты, например, повреждение эндотелиальных клетокили усиленную активацию тромбоцитов, приводящую к повышенной секреции молекуладгезии или секреции воспалительных и профиброгенных цитокинов, таких, как TGF-β. Приэтом синтез АФК является одним из основных процессов в патогенезе склеродермии (P.Sambo, 2001).У пациентов с ССД со средним уровнем функциональной активности нейтрофилов вгруппе с длительностью заболевания более 5 лет регистрируется более высокий потенциалвыработки супероксидного анион-радикала в сравнении с пациентами с длительностьюзаболевание менее 5 лет по данным иХЛлн 1,9 (1,0-3,2)>0,2 (0,1-0,5) при p<0,05.При сравнении нейтрофилов больных ССД с подострым течением заболевания сразной степенью ФА с группой контроля достоверных различий не установлено.
В то жевремя,обращаетнасебявниманиеотсутствиепациентов,нейтрофилыкоторыхснизкимуровнемвысокимрезервомдемонстрируют высокую функциональную активность.Прихроническомкислородзависимоготеченииметаболизмасклеродермиинейтрофиловпациентыобладаютболеепродукции АФК в сравнении с контрольными показателями по данным КАХЛлл 9,0 (3,011,0)>1,69 (0,9-3,3), при p<0,05. У больных со средней функциональной активностьюрегистрируется увеличение продукции супероксидного аниона по данным сХЛлн 1,6 (0,72,1)>0,55 (0,2-1,1), при p<0,05.При внутригрупповом сравнении наблюдается динамика постепенного повышенияпродукции супероксидного аниона от группы с низкой функциональной активностью квысокой. В группе с высокой биоцидностью нейтрофилов наблюдается снижение резерваобразования АФК, в том числе супероксидного аниона в сравнении с показателями группы снизкой ФА по данным КАХЛлл 0,53 (0,1-1,0)<9,0 (3,0-11,0), при p<0,05 и КАХЛлн 0,17 (0,040,4)<2,7 (0,5-7,8), при p<0,05.Снижение резерва продукции АФК в группе с высокой ФА нейтрофилов, болееактивно, чем в группе с низким уровнем кислородзависимого метаболизма, продуцирующихсупероксид-анион, вероятно, связано с истощением механизмов образования активныхметаболитов кислорода.14Тот факт, что половые стероиды являются одной из причин полового диморфизма,наблюдаемого при аутоиммунных заболеваниях, определил большой интерес ревматологов кизучению влияния половых стероидов на иммунитет.Установлено, что иммунная реактивность более выражена у женщин, чем у мужчин, счем связана более высокая распространенность аутоиммунных заболеваний среди женщин.Во многом это обусловлено эффектами половых гормонов, которые влияют навозникновение и тяжесть иммунноопосредованных патологических состояний посредствоммодуляции деятельности клеток.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
