Диссертация (1141140), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Врожденный иммунитет у лабораторных животных придесинхронозевусловияхлюминесцентногоосвещенияоценивалипоколичественному представительству лейкоцитов и функциональной активностинейтрофилов в периферической крови.59При исследовании количественного состава лейкоцитов в относительныхвеличинах на 10 сутки не обнаружено отличий от группы стандартногофиксированного люминесцентного освещения; на 20 сутки снижается содержаниемоноцитов, остальные показатели не отличаются от данных группы стандартногофиксированного люминесцентного освещения (таблица 8). На 30 суткиувеличивается общее количество нейтрофилов за счет сегментоядерных форм,снижается количество лимфоцитов.Анализ количественного состава лейкоцитов в периферической крови вабсолютных величинах установил, что общее количество лейкоцитов неизменяется по сравнению данными группы стандартного фиксированноголюминесцентного освещения во все сроки наблюдения (таблица 9).
При оценкепопуляционного состава лейкоцитов на 10 сутки отсутствуют отличия от группыстандартного фиксированного люминесцентного освещения. На 20 суткиобнаруженоповышениеобщегоколичестванейтрофиловзасчетсегментоядерных форм, снижение количества моноцитов периферической крови.На 30 сутки выявлено достоверное повышение общего количества нейтрофилов засчет сегментоядерных форм, снижение количества лимфоцитов (в среднем на33,86 % от значений группы стандартного фиксированного люминесцентногоосвещения) и моноцитов (в среднем на 23,53 % от значений группы стандартногофиксированного люминесцентного освещения).
При анализе количественногосостава лейкоцитов в динамике 10-30 суток десинхроноза не обнаруженоизменений на 20 сутки по сравнению с 10 сутками, на 30 сутки отмеченоснижение количества лимфоцитов и моноцитов на 30 сутки по сравнению с 10сутками.Функциональную активность нейтрофилов оценивали, во-первых, поспособности поглощать частицы монодисперсного полистирольного латекса, вовторых, по НСТ-редуцирующей активности в НСТ-тесте. Во все срокинаблюдения поглотительная способность нейтрофилов, включая количествофагоцитирующих клеток и способность отдельного нейтрофила к захвату частиц,статистически значимо не изменяется (таблица 10).
При оценке НСТ-60редуцирующей активности нейтрофилов отмечено, что на 20 сутки повышаютсяпоказатели активности и интенсивности индуцированного НСТ-теста, на 30 суткиповышаются активность и интенсивность как спонтанного НСТ-теста, так ииндуцированного(таблица10).Функциональныйрезервнейтрофилов,оцениваемый по приросту активности и интенсивности НСТ-теста, не отличаетсяот значений группы стандартного фиксированного люминесцентного освещенияво все сроки наблюдения.
При анализе функциональной активности нейтрофиловв динамике 10-30 суток десинхроноза не обнаружено изменений на 20 сутки посравнению с 10 сутками, на 30 сутки по сравнению с 10 и 20 сутками.Итак, при экспериментальном десинхронозе в условиях люминесцентногоосвещения отмечается повышение в периферической крови общего количестванейтрофилов за счет сегментоядерных форм, снижение количества моноцитов на20 и 30 сутки, снижение количества лимфоцитов периферической крови на 30сутки, повышение НСТ-редуцирующей активности нейтрофилов на 30 сутки.61Таблица 8 - Количественный состав лейкоцитов в относительных величинах впериферической крови при десинхронозе в условиях люминесцентного освещения(M±m)ПоказателиЭозинофилы,10 сутки20 сутки30 суткиГруппа 2Группа 4Группа 2Группа 4Группа 2Группа 4СФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛО(n=6)(n=6)(n=8)(n=8)(n=6)(n=8)00,67±0,111,00±0,0100,5±0,0103,77±0,703,41±0,436,28±1,145,31±0,104,30±0,855,73±0,7546,48±6,2351,26±3,3645,85±4,5254,62±4,7148,13±2,360,64±3,016*52,45±2,5566,37±3,62%Нейтрофилып/ядерные,%Нейтрофилыс/ядерные, %Нейтрофилы50,26±5,9054,67±2,8852,14±4,8959,93±4,79всего, %Лимфоциты,*44,41±5,5039,51±3,1741,44±5,3335,64±4,5642,62±2,49 29,60±3,62%Моноциты, %*5,33±0,425,15±0,335,67±0,404,42±0,30*Примечание.
* – значимые (р<0,05) различия с группой СФЛО4,76±0,484,02±0,4762Таблица 9 - Количественный состав лейкоцитов в периферической крови вабсолютныхвеличинахпридесинхронозевусловияхлюминесцентногоосвещения (M±m)ПоказателиЛейкоциты, •10 сутки20 сутки30 суткиГруппа 2Группа 4Группа 2Группа 4Группа 2Группа 4СФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛО(n=6)(n=6)(n=8)(n=8)(n=8)(n=8)10,97±0,3911,15±0,3211,22 ±0,3910,95±0,6010,57±0,389,90±0,2800,08±0,010,11±0,0300,05±0,0100,41±0,070,38±0,050,68±0,110,58±0,030,45±0,090,56±0,065,20±0,875,72±0,455,09±0,456,00±0,595,13±0,436,00±0,33109/лЭозинофилы,• 109/лНейтрофилып/ядерные,• 109/лНейтрофилыс/ядерные,**• 109/лНейтрофилы5,62±0,866,10±0,415,77±0,46всего, • 109/лЛимфоциты, •6,58±0,625,58±0,45*4,77±0,474,40±0,374,72±0,623,87±0,49*4,46±0,11109/лМоноциты, •6,56±0,362,95±0,36*#0,58±0,030,57±0,04109/л0,63±0,050,49±0,04*0,50±0,060,39±0,04*#Примечание. * – значимые (р<0,05) различия с группой СФЛО; # – значимые (р<0,05)различия с 10 сутками в группе ДЕСЛО63Таблица10-Показателифункциональнойактивностинейтрофиловвпериферической крови при десинхронозе в условиях люминесцентного освещения(M±m)ПоказателиАктивность10 сутки20 сутки30 суткиГруппа 2Группа 4Группа 2Группа 4Группа 2Группа 4СФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛО(n=6)(n=6)(n=8)(n=8)(n=6)(n=8)29,00±0,3731,33±2,232,50±1,3831,25±2,5527,75±1,70 26,00±1,391,04±0,031,13±0,051,18±0,101,04±0,041,11±0,061,03±0,053,57±0,093,64±0,173,40±0,193,53±0,354,11±0,324,03±0,2142,67±3,3943,67±2,0143,25±4,9545,00±4,8243,00±2,38 47,25±1,63фагоцитоза, %Интенсив.фагоцитоза,у.е.Фагоцитарн.число, у.е.НСТ-тестспонт.,*активность, %НСТ-тест1,42±0,041,55±0,151,45±0,121,63±0,041,40±0,10спонт., интенс.,1,75±0,06*у.е.НСТ-тест инд.,74,33±0,9277,33±7,5070,75±3,51активность, %НСТ-тест инд.,71,75±2,79 80,25±3,35*1,71±0,041,76±0,061,55±0,11интенс., у.е.Функц.
резерв78,25±4,871,79±0,08*1,67±0,35*1,81±0,04*1,89±0,131,76±0,121,84±0,271,95±0,311,68±0,041,70±0,041,21±0,031,18±0,080,97±0,061,10±0,051,42±0,431,04±0,04(активностьНСТ-теста)Функц. резерв(интенсивностьНСТ-теста)Примечание. * – значимые (р<0,05) различия с группой СФЛО643.1.1.2.2. Показатели адаптивного иммунитета при десинхронозе в условияхлюминесцентного освещенияАдаптивный иммунитет оценивали косвенно по выраженности реакциигиперчувствительностизамедленноготипа(ГЗТ),количествуантителообразующих клеток (АОК) в селезенке.Приисследованииадаптивногоиммунитетаустановленоснижениеинтенсивности реакции ГЗТ на 20 и 30 сутки эксперимента по сравнению созначениями группы стандартного фиксированного люминесцентного освещения,косвенно свидетельствующее об угнетении Th1-зависимого иммунного ответа(таблица 11).
Кроме того, наблюдается уменьшение абсолютного количества АОКв селезенке и количества АОК в пересчете на ядросодержащие клетки (ЯСК)селезенки на 20 и 30 сутки, что демонстрирует подавление Th2-зависимогоиммунного ответа.Таблица 11 - Показатели адаптивного иммунитета при десинхронозе в условияхлюминесцентного освещения (M±m)ПоказателиГЗТ, мл10 сутки20 сутки30 суткиГруппа 2Группа 4Группа 2Группа 4Группа 2Группа 4СФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛОСФЛОДЕСЛО(n=14)(n=16)(n=14)(n=16)(n=14)(n=16)0,42±0,030,39±0,010,38±0,030,29±0,020,40±0,020,32±0,02*#АОК,31,68±2,4929,91±1,97• 104 ед.АОК,30,63±4,7826,71±1,99*338,60±26,51*#29,52±4,6022,92±2,00*#323,26±30,76 310,80±19,24 248,13±26,22 280,49±18,12 238,67±15,38• 106 ЯСК*#*#Примечание. * – значимые (р<0,05) различия с группой СФЛО; # – значимые (р<0,05)различия с 10 сутками в группе ДЕСЛО.65При оценке показателей Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа вдинамике10-30сутокдесинхронозаотмеченодостоверноеснижениеинтенсивности реакции ГЗТ, количества АОК в пересчете на ЯСК селезенки на 20сутки по сравнению с 10 сутками, снижение интенсивности реакции ГЗТ,уменьшение абсолютного количества АОК в селезенке и количества АОК впересчете на ЯСК селезенки на 30 сутки по сравнению с 10 сутками.Такимобразом,приэкспериментальномдесинхронозевусловияхлюминесцентного освещения отмечается угнетение Th1- и Th2-зависимогоиммунного ответа на 20 и 30 сутки.Механизм депрессии адаптивного иммунитета при десинхронозе можетбыть многофакторным.
Во-первых, имеет значение лимфоцитопения. Учитывая,что реализация иммунного ответа требует достаточного количества клеток,принимающих участие в его обеспечении, то снижение количества лимфоцитов впериферической крови приводит к подавлению выраженности иммунного ответа.Одним из механизмов лимфоцитопении при десинхронозе может выступатьповышение концентрации кортизола в крови, что приведет к угнетениюпролиферации и дифференцировки клеток лимфоидного ряда в тимусе и вселезенке и активации гибели лимфоцитов [77].Во-вторых, полагаем, что депрессия Th1-, Th2-зависимого иммунногоответа при десинхронозе может быть обусловлена дизрегуляцией иммунногоответа с участием ИФН-γ, ИЛ-12, ИЛ-18, определяющих поляризацию Th0 CD4+лимфоцитов в Th1 CD4+ лимфоциты, и ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-13, опосредующихполяризацию Th0 CD4+ лимфоцитов в Th2 CD4+ лимфоциты.В-третьих, изменения адаптивного иммунитета при десинхронозе могутбыть обусловлены дефицитом эндогенного мелатонина.
Имеются данные оналичии на лимфоцитах рецепторов к мелатонину, связываясь с которыми,мелатонин оказывает стимулирующее действие на продукцию внутриклеточнойцАМФ, что активирует функциональную активность лимфоцитов [141]. Крометого, сами лимфоциты способны вырабатывать мелатонин, имеющий значение вауто- и паракринной стимулирующей регуляции функциональной активности66клеток [297]. В связи со снижением количества лимфоцитов при десинхронозе,можно предположить, что участие экстрапинеального мелатонина в регуляциифункции лимфоцитов ограничено и вносит вклад в формирование дисфункциилимфоцитов.Для проверки гипотезы о дизрегуляции иммунного ответа при десинхронозена следующем этапе исследования проведена оценка концентрации в кровиосновных цитокинов– регуляторов иммунного ответаи концентрациимелатонина и кортизола.3.1.1.2.3.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
