Автореферат (1141106), страница 6
Текст из файла (страница 6)
На 30-ый день средняяприбавка массы тела составил 31,5±1,3 г. Все язвы зарубцевались в течение 3 нед, а среднийразмер язвы равнялся 0 см2. Степень местного поражения уменьшилась в 74 раза (3,1±0,7против 0,042±0,02) (р<0,05) и кожные проявления были представлены лишь небольшойинфильтрацией на месте язвы (у одного животного), т.е. происходило их активное рубцевание.Результаты микроскопического исследования показали снижение инфицированности очагапоражения в 4 раза (3,6±0,4 против 0,9±0,3) (р<0,05). На 60-ый день по сравнению с началомэксперимента средняя прибавка массы тела составила 30,8% (31,8±1,9 г). Степень местногопоражения равнялась 0, а показатель инфицированности очага поражения лейшманиямиулучшился на 98,9% (3,6±0,4 против 0,04±0,01).Сроки разрешения клинических проявлений на коже при использовании комбинированнойтерапии были идентичными монотерапии доксициклином (19,2±0,9 дня и 20,1±2,3) (р>0,05).Однако прибавка массы тела животных на 30 день эксперимента была в 5,5 раза больше, чемпри монотерапии (30,8% против 5,6%) (р<0,05), степень местного поражения – в 25,5 разменьше (0,042±0,02 против 1,07±0,7) (р<0,05), а результаты микроскопического исследованиялейшманий в мазках из очага поражения – в 1,4 раза лучше (0,9±0,3 против 1,27±0,45,соответственно).
На 60 день при полном рубцевании язв у животных при комбинированнойтерапии и монотерапии в мазках лейшмании отсутствовали. Сравнительный анализэффективности препаратов и методов лечения экспериментального ЗКЛ GSH (табл. 7).20Таблица 7 – Показатели эффективности противолейшманиальных препаратов в эксперименте in vivo на GSH: меглумина антимонат (МА),доксициклин (ДЦ), интерфероном альфа-2b человеческим рекомбинантным (ИФ) и их комбинаций меглумина антимонат + интерферональфа-2b человеческий рекомбинантный (МА + ИФ), доксициклин + интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный (ДЦ + ИФ)ПоказателиМАДЦИФМА + ИФДЦ + ИФПоказатели до начала терапииМасса лабораторной модели (г.)107,8±1,7103,3±2,3109,5±1,9110,5±3,6103,3±1,10,60,440,490,470,46Степень местного поражения (0/+)3,2±0,73,1±0,83,2±0,63,2±0,83,1±0,7Микроскопия/число лейшманий (0/+)3,5±0,43,7±0,33,6±0,43,7±0,33,6±0,4Средний размер язв (см2)Показатели через 30 дней после начала терапииМасса лабораторной модели (г.)109,3±1,6109,1±1,6126,2±4,5136,0±3,4134,8±1,30,060000Степень местного поражения (0/+)1,2±0,71,07±0,701,07±0,740,46±0,50,042±0,02Микроскопия/число лейшманий (0/+)1,5±0,51,27±0,451,27±0,451,3±0,460,9±0,3Средний размер язв (см2)Показатели через 60 дней после начала терапииМасса лабораторной модели (г.)112,8±1,6113,3±1,4136,9±4,3136,1±1,7135,1±1,300000Степень местного поражения (0/+)0,1±0,030,07±0,010,17±0,0800Микроскопия/число лейшманий (0/+)0,6±0,60,03±0,011,17±0,380,09±0,030,04±0,01Средний срок клинического выздоровления (дни)40,7±3,220,1±2,327,2±3,822,1±1,219,2±0,9Средний размер язв (см2)21Средняя прибавка массы тела GSH была минимальной при монотерапии МА (1,4%) имаксимальной – при комплексной терапии доксициклином + ИФ (30,5%).
Значительнаяприбавка наблюдалась и при комплексной терапии МА + ИФ (23,1%).При сравнение средних сроков клинического выздоровления GSH максимальный срокотмечен при монотерапии МА (40,7±3,2 дня). При других видах терапии он был значительноменьше. При монотерапии ИФ срок (27,2±3,8) был достоверно больше, чем при монотерапиидоксициклином (20,1±2,3) и при обоих видах комбинированной терапии (22,1±1,2 и 19,2±0,9).Полученные данные с определенной долей вероятности свидетельствуют о синергизмеспецифического действия доксициклина, МА и ИФ. Уменьшение сроков клиническоговыздоровления при комбинированной терапии МА +ИФ по сравнению с монотерапией в 1,8раза (40,7±3,2 против 22,1±1,2) возможно обусловлено также снижением токсичности МА.Сравнение средних степеней местного поражения на коже через 30 дней после началатерапии свидетельствовало, что только при лечении МА рубцевание язв наступило всего у 20%животных.
При этом у остальных GSH средний размер язв уменьшился в 10 раз.Средняя степень местного поражения свидетельствует о значительном преимуществеобоих видов комбинированной терапии. Наименьшая была при сочетании доксициклина с ИФ(0,04±0,02). При использовании терапии МА + ИФ этот показатель был в 10 раз больше(0,46±0,5 против 0,04±0,02). При всех видах монотерапии он мало отличался между собой.Элиминация возбудителя из очага поражения через 30 дней после начала терапии наступаладостоверно интенсивнее при использовании комбинированной терапии доксициклином + ИФ(0,9±0,3) (р<0,05). При остальных видах терапии достоверные отличия отсутствовали.Спустя 60 дней после начала терапии лейшмании в очагах поражения отсутствовали прииспользовании обоих методов комбинированной терапии (0,09±0,03 и 0,04±0,01).
При леченииИФ в виде монотерапии возбудитель в очагах поражения сохранялся в большем числе(1,17±0,38). Это является прямым доказательством о его незначительном специфическомдействии.ВЫВОДЫ1.Инкубационный период экспериментального ЗКЛ у GSH колеблется от 1 до 8 мес.,составляя в среднем 76,8±21,8 дня. У 58,1% животных клинические проявления ЗКЛ возникаютв течение 2 мес., у 41,9% – спустя 2 мес., в том числе у 30,8% – через 3 мес.
Размер язв до 1 см вдиаметре зарегистрирован в 61,3% случаев, до 1,5 см – в 38,7%. Лимфостаз в области половыхорганов (7,6%) наблюдается редко. При локализации язв на ушных раковинах наблюдаетсячастичное или полное расплавление хрящевой ткани.2.Сравнительная оценка in vitro трех антибиотиков (доксициклина, цефотаксима,цефтриаксона) на промастиготы лейшманий с учетом их min доз, количества протистов в поле22зрения и показателя инактивации их подвижности свидетельствуетолидированиидоксициклина и цефтриаксона.
Min дозы обоих препаратов приводят к абсолютномуподавлению подвижности возбудителя. Хотя специфическая активность доксициклина приколичественном измерении числа промастигот в 2,6 раза ниже, чем у цефтриаксона (2,250 и5,083, соответственно), но min терапевтическая доза доксициклина в 15 раз меньше, чем уцефтриаксона (0,0006 г против 0,009 г, соответственно). Повышение терапевтической дозыпрепаратов не обосновано. Сравнение этих препаратов с меглумина антимонатом показало ихпревосходство по всем показателям.3.Доксициклин,меглуминаантимонатаиинтерферональфа-2bчеловеческийрекомбинантный при экспериментальном изучении их токсичности in vivo на GSH не обладаюттаковой при увеличении терапевтической дозы препарата в несколько раз.
Выраженнойтоксичностью обладают оба препарата из группы цефалоспоринов III поколения – цефотаксими цефтриаксон.4.In vivo цефтриаксон и цефотаксим в терапевтической дозе вызывают гибельлабораторныхживотных.Монотерапиямеглуминаантимонатом,доксициклиномиинтерфероном альфа-2b человеческим рекомбинантным достаточно эффективна и неразличается к 30 дню их применения по таким показателям как средняя степень местногопоражения (1,20±0,70; 1,07±0,70 и 1,07±0,74, соответственно) и среднему числу лейшманий вочаге поражения (1,50±0,50; 1,27±0,45 и 1,27±0,45, соответственно). Отличия зарегистрированыв показателях средней прибавки массы тела (максимальная при лечении интерфероном –15,3%),среднихсрокахклиническоговыздоровления(минимальныйприлечениидоксициклином – 20,1±2,3 дня). Лейшмании в очаге поражения на 60 день полностьюотсутствовали при лечении доксициклином.5.Комплексная терапия экспериментального ЗКЛ у GSH по данным in vivo позволилаповысить эффективность меглумина антимоната и доксициклина за счет интерферона альфа-2bчеловеческого рекомбинантного по всем показателем в сравнении с монотерапией.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИОценка специфической активности доксициклина в эксперименте in vitro и in vivoобосновывает целесообразность расширения показаний для данного препарата, в частности, дляиспользования при кожном лейшманиозе.В официальных инструкциях препаратов, рекомендованных Национальным руководствомдля использования в РФ, отсутствуют показания для их применения при кожном лейшманиозе.Исследования по изучению специфической антилейшманиальной активности доксициклина,повышении терапевтической эффективности данного препарата и меглумина антимоната могут23быть использованы для решения вопроса о расширении клинических показаний для ихиспользования.СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1.
Кузнецова, Ю.К. Новое топическое средство для лечения кожного лейшманиоза /Коваленко Ф.П., Понировский Е.Н. // Российская научно-практическая конференция смеждународным участием «Междисциплинарные аспекты дерматовенерологии, косметологиии эстетической гинекологии». – Москва.
– 2013. – С.116-118.2. Кузнецова, Ю.К. Кожный лейшманиоз / Коваленко Ф.П., Понировский Е.Н., КузнецоваК.Ю. // Юбилейный сборник статей к 30-летию поликлиники. Част 2. Под редакциейЕ.Б.Александровой. – Москва. – 2014 г. – С.36-38.3. Кузнецова, Ю.К. Клинический случай кожного лейшманиоза / Сирмайс Н.С. // VIIIРоссийская научно-практическая конференция «Санкт-Петербургские дерматологическиечтения 2014». С.-Пб. – 2014.
– С.15-16.4. Кузнецова, Ю.К. Проблема лечения лейшманиозов в РФ/ Стрелкова М.В. // Научнопрактическая конференция «Нерешенные вопросы этиотропной терапии актуальныхинфекций». – С.-П. – 2014. – С.58-59.5. Кузнецова, Ю.К. Руководство по клинике и диагностике лейшманиозов / ПонировскийЕ.Н., Стрелкова М.В., Завойкин В.Д., Жиренкина Е.Н. Москва – 2015 г.6.
Кузнецова, Ю.К. Исторические аспекты лечения кожного лейшманиоза / Джаншун Янг// Медицинская паразитология и паразитарные болезни. – 2017. – №1. – С. 33-35.7. Кузнецова, Ю.К. Сравнительные данные противолейшманиальной активностиантибактериальныхпрепаратовотечественногопроизводства,полученныевэкспериментальных исследованиях in vitro // Здоровье населения и среда обитания. – 2017. –№1.
– С. 50-528. Кузнецова, Ю.К. Сравнительная оценка специфической активности препаратов длялечения зоонозного кожного лейшманиоза in vitro. // Дерматология в России. – 2017. –№ S1. –С.117-118.9. Kuznetsova, Yu.K. Treatment for cutaneous leishmaniasis: Historical aspects/ Sergiev V.P.,Kuznetsova K.Yu. // Antibiotics and chemotherapy. – 2017. – № 3-4. – P.
53-57.10. Кузнецова, Ю.К. Оценка токсичности препаратов с противолейшманиальным эффектом,доказанным in vitro. // Сборник тезисов XXXV научно-практической конференции смеждународным участием «Рахмановские чтения: Перспективные направления диагностики итерапии в дерматовенерологии и косметологии». – М. –2018. – С. 54-55.11. Кузнецова, Ю.К. Кожный лейшманиоз: причины резистентности терапии. // Проблемымедицинской микологии. – 2018. –Том 20. – № 2.
– С. 84.12. Кузнецова, Ю.К. Исследование эффективности препаратов для терапии зоонозногокожного лейшманиоза in vivo на лабораторной модели. // Антибиотики и химиотерапия. –2018. – Т. 63. – № 7-8. – С. 7-13.Список сокращенийВисцеральный лейшманиозВЛИФ Интерферон альфа-2b человеческийрекомбинантныйДоксициклинКожный лейшманиозДЦКЛЗоонозный кожный лейшманиоз МА Меглумина антимонатЗКЛЗолотистые хомяки –GSHLRV Лейшманиальный РНК-вирусGolden Syrian hamster (GSH)ГРЛС Государственный реестр лекарственных средств24.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
