Автореферат (1141106), страница 4
Текст из файла (страница 4)
После введения дозыдоксициклина, превышающей терапевтическую в 5 раз, масса первого GSH к 16 днюувеличилась на 3,3 %, а к 21– на 4,4%, а второго – на 3% и 5%. Практически аналогичныеданные получены при увеличении дозы доксициклина в 10 раз. Спустя 16 дней масса двух GSHувеличилась на 2,5% (№5) и на 4,5% (№4), а одного (№3) – не изменилась. Через 3 нед. приростмассы тела зарегистрирован у всех GSH на 1% (№5) – 8,1% (№4).
Погибших GSH не было.Отмечено лишь небольшое снижение активности поведения. Токсичностидоксициклинаотсутствовала при повышении терапевтической дозы препарата в 5 и даже – в 10 раз.Оценка токсичности цефотаксима in vivo на GSH. В соответствии с инструкциеймаксимальная дозировка цефотаксима составляла 0,0133 г на 100 г животного. Его вводили в/мтрем животным в дозировке в 5 раз, превышающей max, а двум – в 10 раз. Вес GSH до началаисследования был в пределах от 93 до 132 г.
После введения дозы цефотаксима, превышающейтерапевтическую в 5 раз, масса GSH к 16 дню уменьшился на 23,7% (№3) – 37,4% (№1). Приувеличении дозы в 10 раз оба GSH (№4 и №5) погибли на 16 день. Их посмертная масса телабыла на 43,2% (№4) и 35,1% (№5) меньше исходной. Спустя 3 нед. после введения дозы,превышающей в терапевтическую в 5 раз, погибли остальные три GSH. Посмертная массаживотных была ниже исходной на 26,9% (№2) – 35,1% (№1).
У всех GSH потеря массы теласопровождалось диареей, снижением аппетита и активности животных. Это свидетельствует овысокой токсичности цефотаксима.Оценка токсичности цефтриаксона in vivo на GSH. В соответствии с инструкциеймаксимальная дозировка цефтриаксона составляла 0,0067 г на 100 г животного. Его вводиливнутримышечно однократно трем животным в дозировке в 5 раз, превышающей max, а двум – в10 раз.
Вес GSH до начала исследования был в пределах от 89 до 113 г. На 16 день былазарегистрирована потеря массы тела у всех животных от 14,6% (№3) до 20,6% (№5). В отличиеот цефотаксима в этой группе, все GSH погибли несколько позже – к концу 21 дня. Ихпосмертная масса тела к 21 дню уменьшилась вдвое 40,5% (№3) – 53,3% (№1).
Во всех случаяхпотеря массы тела сопровождалось выраженной диареей, снижением аппетита и активностиживотных. Это свидетельствует о токсичность цефтриаксона.Оценка токсичности МА in vivo на GSH. В соответствии с инструкцией максимальнаядозировка МА составила 0,01 г на 100 г массы животного. Препарат вводили в/м однократно вдозировках, превышающих max в 3 раза (№1 и №2), а также – в 5 раз (№3-5). Увеличение дозыв 10 раз не проводилось, что связано с особенностями лекарственной формы выпуска препарата13(раствор). Если дозу увеличить в 10 раз, то животному следовало вводить 3,3 мл МА, чтонесоизмеримо с размером животного.
С дугой стороны, МА применяется для лечения ЗКЛмного десятилетий и считается «золотым стандартом» терапии. Вес GSH до началаисследования был в пределах от 85 до 122 г.При увеличении дозы МА в 3 раза на 16 день масса тела GSH №1 и №2 практически неизменилась. Через 21 день у GSH №1 она была стабильной, а у №2 – возросла на 7,2%. Приувеличении терапевтической дозы в 5 раз на 16 день у двух GSH масса тела увеличилась на 1%(№4) и на 5,9% (№5). У GSH №3 снизилась на 3,7%.
На 21 день масса GSH увеличилась и3,5%(№5) и на 6,1% (№4). У животного №3 она снизилась на 8,7% по сравнению с исходноймассой (р>0,05). При увеличении терапевтической дозы в 5 раз на 16 день у двух GSH массатела увеличилась на 1% (№4) и на 5,9% (№5). У GSH №3 снизилась на 3,7%. На 21 день массаGSH увеличилась и 3,5%(№5) и на 6,1% (№4). У животного №3 она снизилась на 8,7% посравнению с исходной массой (р>0,05). Таким образом, очередной раз доказано отсутствиетоксического действия МА на экспериментальных животных.Оценка токсичности ИФ in vivo на GSH (табл.
3). В соответствии с инструкциеймаксимальная дозировка ИФ составляла 10000 МЕ на 100 г животного. GSH №1 и №2 вводилидозу, в 10 раз превышающую терапевтическую дозу, а трем животным – в 20 раз. Такой подходбыл связан с желанием экспериментально оценить наличие антилейшманиальной активности упрепарата из группы иммуномодуляторов с противовирусным эффектом. ИФ вводилиоднократно в/м. ИФ не оказывал токсического действия на организм GSH. Даже при 10-20кратном увеличении терапевтической дозы препарата отмечено стабильное увеличение массытела GSH, как на 16 день на 2,7% (№5) – 12,2% (№1), так на 21 день 1,8% (№4) – 25,2% (№3) посравнению с исходным.Таблица 3 – Оценка токсичности ИФ in vivo на GSH№ GSH иКоличествоКоличестворазведениепрепарата на 100вещества,ИФг массы GSH (г)* введенного в/м (г)№1 в 10 раз10100091000№2 в 10 раз10100093000№3 в 20 раз188000194000№4 в 20 раз195000219000№5 в 20 раз1970002210001 день9092103112112Масса GSH (г)16 день21 день101 (+12,2%)101 (+9,8%)114 (+10,7%)112 (0%)115 (+2,7%)107 (+18,9%)120 (+30,4%)129 (+25,2%)114 (+1,8%)118 (+5,4%)*рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100 г веса лабораторной модели,увеличенные в 10 и 20 раз.Исследование эффективности препаратов для терапии ЗКЛ in vivo.
Первая серияопытов посвящена изучению эффективности антибиотиков доксициклина, цефотаксима ицефтриаксона, а также МА и ИФ в виде монотерапии; вторая – сравнению монотерапии МА и14комбинированной терапии, включающей МА + ИФ; третья – изучению эффективностикомбинированной терапии доксициклином в сочетании с ИФ.Заражение животных в эксперименте in vivo выполняли на животных 2-х месячноговозраста, масса которых была около 30 г.
Клинические проявления заболевания возникализначительно позже, когда масса животных увеличивалась до 100 г. и более. Эти животныеучаствовали в эксперименте по оценке эффективности выбранных нами антилейшманиальныхпрепаратов. В каждой группе при монотерапии было по 30 животных. Во второй и третьейсериях опытов, проведенных дважды, использовали лабораторные модели по 12 разнополыхGSH в каждой группе (всего по 24 животных). Формирование опытных групп проводили сучетом массы тела животного, однозначности клинических проявлений и длительностисуществования язвы, что свидетельствует о репрезентативности групп. Для стандартизацииопытов использовали руководство по проведению доклинических исследований лекарственныхсредств [Миронов А.Н.и соавт., 2012].
В качестве возбудителя заболевания использовалипромастиготы L. major. Заражение животных промастиготами более близко к естественному,так как оно подобно укусу переносчика.Методика оценки эффективности испытуемых лекарственных препаратов. Их введениеосуществляли на разных стадиях развития инфекции (лечебное исследование).
Лечение GSHначинали после завершения инкубационного периода и трансформации большинства бугорковв язву, обычно спустя месяц и более с момента заражения. Эффективность терапии оцениваласьс использованием следующих критериев: 1) динамика кожного процесса; 2) размерлейшманиомы; 3) наличие лейшманий в язве; 4) срок клинического выздоровления. Основнымкритерием отбора животных для начала терапии была клиническая картина лейшманиоза с ярковыраженным кожным процессом, подтвержденным микроскопически– обнаружениемамастигот в мазке из очагов поражения.Клиническая характеристика особенностей течения ЗКЛ при использовании GSH вкачестве лабораторной модели в эксперименте in vivo. Инкубационный период приэкспериментальном ЗКЛ у GSH колебался от 1 до 8 мес., в среднем 76,8±21,8 дня. Более чем уполовины животных (58,1%) клинические проявления ЗКЛ возникали в течение 2 мес.
смомента заражения, у остальных (41,9%) – спустя 2 мес., из них у 1/3 (30,8%) – через 3 мес.Первоначально на месте введения биомассы L. major появлялся блестящий бугорок плотнойконсистенции. В центре его через 5–7 дней возникала язва диаметром 1–2 мм. В дальнейшемона увеличивалась в размере. Сначала язвы в подавляющем большинстве случаев былиразмером до 4 мм, округлой формы. Имели валикообразно приподнятый край и обширную зонуинфильтрата в основании. Со временем размер язв увеличивался до 1 см в диаметре (61,3%),иногда до 2 см (38,7%). По мере некротизации язвы ее дно обильно покрывалось гнойным15налетом, и отделялся гнойный экссудат. У трети (52 или 34,7%) GSH от язв исходилнеприятный запах.
Нередко экссудат ссыхался в корки, плотно прилегающие к краям язвы. Принадавливании на корку по краям язвы выступала серозная жидкость, содержащая большоеколичество лейшманий. При локализации язв в области паха у животных возникал лимфостазполовых органов (7,6%), что приводило к нарушению передвижения животного.
Прилокализации язвы на ушных раковинах всегда наблюдалось частичное или полное расплавлениехрящевой ткани. Для верификации диагноза скарификаты делали с валикообразного края язвы.Лейшмании в большом числе обнаруживались и в серозной жидкости, получаемой принадавливании на корку. Большое число расположенных в макрофагах и свободно лежащихлейшманий свидетельствовало о наличии специфического процесса.
При микроскопическомобнаружении лейшманий в очагах поражения животные включались с экспериментальныйраздел работы для изучения противолейшманиальной активности препаратов.Срокинаблюдения за животными после введения препаратов составляли 60 дней.РезультатыоценкиэффективностилеченияМА(контрольнаягруппа)экспериментального ЗКЛ у GSH.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
