Автореферат (1140007), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Работа представлена введением, 4 главами,среди которых 3 посвящены описанию собственных результатов исследований,заключением, выводами, практическими рекомендациями и списком литературы.Последний содержит 117 отечественных и 70 зарубежных работ. Диссертационнаяработа выполнена на кафедре пародонтологии Тверского ГМУ Минздрава России.Исследование одобрено Этическим комитетом Тверского ГМУ Минздрава России.ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериал и методы исследованияМасштабноеклинико-лабораторноемультицентровоеисследованиебылореализовано в ООО «МедЛайф» (Москва) на протяжении 2013–2018 гг.
Клиническиеисследования, в основном, были проведены в стоматологических кабинетах ООО«МедЛайф», а лабораторные – на кафедре пародонтологии и в клинико-диагностическойлаборатории Тверского ГМУ.Для решения поставленных перед исследованием задач и его научногопланирования было проведено предварительное исследование, направленное на оценкураспространенности полиморфизма генов интерлейкинов IL-1α и IL-1β в популяциибольных, которым требовалось ортодонтическое лечение в возрастном диапазоне от 25до 40 лет. Первоначально было обследовано 300 человек.
Но, исходя из результатовэтого исследования, пришли к выводу, что для полноценного формирования подгрупп, вкоторых возможно статистическое сравнение полученных результатов, необходимо квыявленным больным с полиморфизмом генов добавить еще не менее 35 человек с этойпатологией. Поэтому нам пришлось дополнительно провести молекулярно-генетическоеобследование еще 350 пациентов. Таким образом, на первом этапе был проведенскрининг650человек,имеющихортодонтическуюпатологию.Врезультатепредварительного исследования была сформирована когорта пациентов, имеющих ВЗП(пародонтит легкой и средней тяжести) на фоне ортодонтической патологии (200человек). В том числе 89 больных, имеющих полиморфизм генов интерлейкинов.9Критерии включения пациентов основной группы и группы сравнения висследование. В основную и группу сравнения были включены добровольцы в возрастеот 25 до 40 лет обоего пола русской национальности (европеоидная группа), которымтребовалось ортодонтическое лечение с помощью брекет-систем, фиксированныхвестибулярно, в связи со скученностью зубов по первому классу во фронтальном отделе,со смешанным биотипом.
Как показывает опыт, именно в этом возрастном диапазонепреобладают взрослые пациенты, которым требуется проведение ортодонтическоголечения. Все обследованные имели хронический генерализованный пародонтит легкойили средней степени тяжести. Диагноз ставили на основании пародонтологическогоисследования.Критерии не включения пациентов в исследование.
Генетически обусловленныесистемные заболевания, в том числе системные заболевания соединительной ткани;острые и хронические соматические заболевания в стадии декомпенсации (сахарныйдиабет и другие заболевания эндокринной системы, анемия, хронические болезнидыхательной и сердечно-сосудистой систем); острые и хронические инфекционные ивирусные заболевания, в том числе ВИЧ-инфекция, гепатит всех видов, сифилис;эндокринная патология; онкологические заболевания в любой фазе; беременность илактация; психические расстройства; оперативные вмешательства в полости рта илииное хирургическое лечение; агрессивные формы ВЗП; гингивит, пародонтит тяжелойстепени, отсутствие добровольного информированного согласия на проведениеисследования.
Критерии исключения пациентов из исследования. Добровольный отказот участия в исследовании на любом этапе; несоблюдение пациентом регламентаисследования; приобретение пациентом хронических соматических, специфическихинфекционных заболеваний в период исследования; установление факта беременности.Всем без исключения пациентам была предоставлена для ознакомления полнаяинформация о проводимом исследовании в устной и письменной форме, после чего имиподписывалась форма информированного согласия на участие в исследовании.Всего в составе выделенных подгрупп, таким образом, за период проведениядиссертационного исследования было обследовано 200 пациентов, проходящихортодонтическое лечение, в том числе 144 пациента с пародонтитом легкой степени и 56– с пародонтитом средней степени тяжести.В таблице 1 приведена логико-дидактическая схема проведенного исследования.10Таблица 1 – Логико-дидактическая схема проведенного исследования (цифры послеобозначений подгрупп означают число обследованных пациентов)Этап I.
Скрининг пациентов, нуждающихся в ортодонтическом лечении. 650 пациентов- Выявление генетической предрасположенности к ВЗП у пациентов, нуждающихся вортодонтическом лечении (молекулярно-генетическое исследование)- Комплексная оценка состояния тканей пародонтаЭтап II. Оценка эффективности предложенного комплекса лечебных мероприятий упациентов с хроническим пародонтитом, проходящих ортодонтическое лечение. 200пациентовразделение на основную группу и группу сравненияГруппа «О» – 142 пациентаГруппа «С» – 58 пациентов- разделение на подгруппы по наличию генетической предрасположенности«ОХ» – 80 пациентов«ОY» – 62 пациента«СХ» – 31«СY» – 27 пациентовпациент- разделение на подгруппы в зависимости от лечебных мероприятийОХН-28 ОХМ-25ОYH-20 OYM-21ОХК-27OYK-21Через 7 дней после фиксации ортодонтической аппаратуры:- Оценка пародонтологического статуса, в т.ч.
с использованием системы «Florida Probe».- Молекулярно-генетическое исследование микрофлоры. Биохимические ииммунологические исследования.- Гистоморфологическое исследование- проведение комплекса лечебно-профилактических мероприятий через 1, 3 и 5 месяцевпосле фиксации ортодонтической аппаратурыОХН-28ОYH-20профессиональнаягигиена- НанАргол – 3 курсапо 15 днейОХМ-25OYM-21- профессиональнаягигиена- аутосеротерапия– 3 курса по 3инъекцииОХК-27OYK-21- профессиональнаягигиена- НанАргол – 3 курсапо 15 дней- аутосеротерапия –3 курса по 3инъекцииСХ-31СY-27профессиональнаягигиена- ротовыеванночки срастворомхлоргексидинабиглюконата 0,2%Оценка результатов лечения через 6 месяцев после фиксации ортодонтической аппаратуры:- Оценка пародонтологического статуса, в т.ч. с использованием системы «Florida probe»- Молекулярно-генетическое исследование микрофлоры- Биохимические и иммунологические исследования- Гистоморфологическое исследование11Клиническиеметодыисследования.Пародонтологическоеобследованиепроводили с целью максимальной объективизации с помощью компьютернойдиагностической системы «Florida probe», позволяющей при стандартизированнойоценке глубины пародонтальных карманов в 6 точках в области каждого зуба получатьтакже данные о наличии зубного налета, степени кровоточивости десны, наличиирецессии десны, поражении фуркаций корней зубов, гноетечении из пародонтальныхкарманов и подвижности зубов.Молекулярно-биологическое и генетическое исследованияОпределение полиморфизма генов провоспалительных интерлейкинов IL1α иIL1β проводили с помощью ПЦР-методики в «реальном времени».
Выбор именно этихинтерлейкинов для исследования обусловлен тем, что по данным литературныхисточников, особенно, последних лет, именно полиморфизм генов интерлейкинов IL1αи IL1β характерен для больных пародонтитом. Для исследований использовали наборыпраймеров и зондов «TaqMan» для детекции однонуклеотидного полиморфизма генаIL1α генома человека (Applied Biosystems, кат. № 4351379) на 300 определений и наборпраймеров и зондов «TaqMan» для детекции однонуклеотидного гена IL1β геномачеловека (Applied Biosystems). В качестве биологического материала для исследованияиспользовали венозную кровь, взятую в пробирки с 0,5% раствором калиевой солиэтилендиаминтетрауксуснойкислоты(ЭДТА).ВыделениеДНКпроводилисиспользованием реагентов PROTRANS DNA Box 500.Изучение ДНК основных пародонтопатогенов в пробах из пародонтальныхкарманов осуществляли с помощью специального набора для выявления условнопатогенных микроорганизмов полости рта методом ПЦР в режиме «реального времени»«Пародонтоскрин» (ДНК-Технология, Россия).
Состав этого набора позволяет выявлятьи проводить количественный анализ основных пародонтопатогенов, участвующих вразвитииВЗП:Actinobacillusactinomycetemcomitans,Porphyromoransgingivalis,Prevotella intermedia, Tannerella forsythia, Treponema denticola и Candida albicans.Биохимические и иммунологические исследованияКонцентрацию эластазы нейтрофилов в ротовой жидкости определяли методомиммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-системы «Human PMNElastase Platinum ELISA», производства Bender MedSystems GmbH, Австрия.12Тиоловыйстатуссывороткикровииротовойжидкостиопределялифотометрическим методом с использованием тест-системы «Thiol status / Sulfhydrylstatus assay», производства «Immundiagnostik AG», Германия.НСТ-тест заключается в цитохимическом выявлении темно-синих гранулдиформазана,которыеобразуютсявцитоплазменейтрофиловврезультатевосстановления нитросинего тетразолия (НСТ, желтого цвета) вследствие активациикислородзависимой биоцидности фагоцитов.Концентрацию лизоцима в ротовой жидкости определяли по изменению мутностисуспензии бактерий вида Micrococcus lysodeikticus, основанной на способностифермента расщеплять полисахариды клеточной стенки бактерий.Показатели активности уреазы в ротовой жидкости оценивали с помощьюпортативного переносного анализатора «AMA RUT Reader» производства ООО «АМА».Гистоморфологическое исследованиеИссекали биоптаты многослойного плоского неороговевающего эпителия десны сподлежащимитканями.Микроскопическоеисследование,фоторегистрациюиморфометрические исследования проводили с применением: исследовательскоготринокулярного микроскопа «Nikon Eclipse 50i», специализированной цифровойфотокамеры «Nikon DS-Fi2», персонального компьютера с операционной системойWindows 7, специализированных морфометрических программ NIS-Elements и BioVision Professional.Ортодонтическое лечение пациентовНаблюдение за пациентами и ортодонтическое лечение начинали спустя не менее7 суток после проведения профессиональной гигиены полости рта.
Активный периодортодонтического лечения проводили в пять этапов с помощью брекет-систем.Длительность ортодонтического лечения у наших пациентов составляла от 6 месяцев(несколько больных) до 2,5 лет. В среднем лечение длилось 1,5 – 2 года. В связи с тем,что период лечения не был короче 6 месяцев, именно этот срок мы выбрали дляпроведения активного наблюдения за пациентами.Методы профилактики и лечения воспалительных заболеваний пародонтаОртодонтическое лечение всех пациентов было начато в фазе ремиссии ВЗП. Вподгруппах пациентов группы сравнения после установки брекетов проводилиподдерживающую пародонтальную терапию (supportive periodontal therapy – SPT) в13сроки: 1 посещение – через месяц после начала ортодонтического лечения, второе –через 3 месяца, третье – через 5 месяцев, четвертое через 10 месяцев и т.д.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
