Диссертация (1139722), страница 28
Текст из файла (страница 28)
Таблетки листьев толокнянки Фрагмент эпидермисаКристаллы МКЦ (р-ция с хлор-цинк-иодом). Ув. Х90Видовая дифференциация ЛР и ЛРС.Результаты гистохимических реакций могут помочь выявить различия анатомическогостроения в близкородственных видах лекарственных растений.3.4.9. Лаконос американский и лаконос ягодный (Phytolacca americana L. и Phytolaccaacinosa (esculenta) Roxb.)При проведении гистохимической реакции с реактивом Люголя на поперечных срезахстеблей двух видов лаконоса было обнаружено отсутствие крахмала в эндодерме лаконосаамериканского (рис.
61Б), в то время как в клетках эндодермы лаконоса ягодного крахмальныезерна присутствовали (рис. 61А).АБРисунок 61. А - Лаконос ягодный. Поперечный срез стебля. Зерна крахмала в эндодерме.Б - Лаконос американский. Поперечный срез стебля. Эндодерма.(раствором Люголя). Ув.х400137Реакция с раствором флороглюцина показала различия в степени одревесненияпроводящих и механических тканей двух видов лаконоса. Было выявлено значительноеодревеснение сосудов и механических элементов ксилемы у лаконоса американского посравнению с лаконосом ягодным (рис. 62). Данные отличия имели место как в стеблях, так икорнях исследованных видов лаконоса.АБРисунок 62.
Поперечный срез стебля видов лаконоса (р-ция с флороглюцином). Ув.х400А - Лаконос американский. Сосуды ксилемы.Б - Лаконос ягодный. Сосуды ксилемы.3.4.10.МеханическиеэлементыкорневищасытикруглойикорняпионауклоняющегосяСхожие по строению механические элементы разных видов сырья могут различаться постепениодревесненияклеточныхоболочек.Приихсовместномприсутствииввысокодисперсных многокомпонентных смесях микрохимическая реакция с растворомфлороглюцина поможет дифференцировать такие диагностические признаки, как каменистыеклетки, механические волокна, а иногда и клетки паренхимы.Так, например, каменистые клетки гиподермы корневища сыти круглой и коровой частикорня пиона уклоняющегося имеют толстые стенки, слоистую структуру, но совершенно поразному одревесневают.
При проведении соответствующей реакции эта разница становитсяочевидной: каменистые клетки корней пиона становятся малиново-красными, каменистыеклетки корневища сыти круглой остаются желтоватого цвета (рис 63).138АБРисунок 63. А - корневище сыти круглой (Cyperus rotundus L.) Поперечный срез.Зона гиподермы. Каменистые клетки (р-ция с флороглюцином).
Ув.х400.Б - Корни пиона уклоняющегося. Поперечный срез.Каменистые клетки (р-ция с флороглюцином) Ув.х1000.Выводы1. Разработанагистохимическаяреакцияс1%растворомванилинаиконцентрированной соляной кислотой (на дубильные вещества - производныекатехина) для порошка листьев толокнянки.2. На основании обобщенных литературных и собственных экспериментальных данныхпоказано значение и сформулированы функции гистохимических и микрохимическихреакций при проведении микроскопического анализа лекарственного растительногосырья и лекарственных препаратов на его основе.Гистохимическиеимикрохимическиереакциирасширяютвозможностимикроскопического анализа за счет функций: доказательства наличия и определениялокализации БАВ, визуализации диагностических признаков и возможностидифференциации видов лекарственных растений и лекарственного растительногосырья.139Глава 4. Изучение влияния технологических факторов на вариабельность анатомодиагностических признаков ЛРС при микроскопическом анализе4.1.Влияние измельченностиЗакономерности вариабельности анатомо-диагностических признаков в цельном,измельченном и порошкованном сырье разных морфологических групп были изложены в главе3.Вместе с тем, в последние годы расширяется ассортимент фитопрепаратов, в составкоторых входит ЛРС в виде порошка с размером частиц менее 1 мм.
В отечественноймедицинской практике находят свое применение такие из них, как таблетки, капсулы, а такжекомплексные лекарственные средства.Контроль качества такой продукции должен соответствовать самым высокимтребованиям с учетом современных достижений фармацевтической науки и опыта практики.Однако, сведений о влиянии измельченности сырья на проявляемость диагностическихпризнаков в современной литературе очень мало. Тогда как диагностичность - одно из важныхтребований, предъявляемых к лекарственному растительному сырью, включаемому в состав какмонокомпонентных, так и комплексных лекарственнных средств.В качестве объектов исследования были выбраны 20 видов ЛРС 6-ти морфологическихгрупп с учетом их различного анатомического строения и химического состава. В первуюочередь принималось во внимание использование данных видов в настоящее время или вперспективе для получения лекарственных форм на основе измельченного или порошкованногосырья.
Отечественной промышленностью выпускаются препараты, в состав которых входятпорошки листа крапивы (“Аллохол”), листа сенны (“Кафиол”), травы термопсиса (“Таблетки откашля”, “Коделак”), коры крушины (“Викаир”, “Викалин”), корневищ аира (“Викаир”,“Викалин”), корня солодки (“Коделак”), корня ревеня (“Таблетки ревеня”). Разрабатываютсяновые лекарственные средства (таблетки, капсулы, рассыпки) из порошков листьев толокнянки,брусники, подорожника, плодов аронии, рябины, шиповника, цветков липы, бессмертника,луковиц чеснока.4.1.1. Листья4.1.1.1.
Листья крапивыМикроскопическое исследование показало, что порошок листьев крапивы фракций 0,5 1,0 мм, 0,31 - 0,5 мм и 0,25 - 0,31 мм состоит в основном из фрагментов листовой пластинки с140поверхности(сверхнейстороныслабоизвилистыебоковыестенки,клеткисэпидермисанижнейимеютмногоугольныестороны - сильноизвилистые,илиустьичныйкомплекс - аномоцитного типа) с многочисленными цистолитами в виде округлых илиовальных образований зернистой структуры, с цельными или обломанными ретортовидными,жгучими, реже головчатыми волосками; а также - фрагментов черешков и крупных жилок сцепочками друз оксалата кальция вдоль сосудов со спиральным вторичным утолщением стенок.Реже в данных фракциях встречаются фрагменты листовой пластинки в поперечном сечении,которые обычно присутствуют в порошке с размером частиц менее 0,16 мм (иногда кусочкилиста в поперечном сечении имеют цельные или обломанные ретортовидные волоски илицистолиты).
Во фракции сырья 0,16 - 0,25 мм помимо вышеназванных фрагментов частовстречаются обломки жгучих волосков (особенно их многоклеточные основания) (рис. 63А).Диагностика порошка листа крапивы с размером частиц 0,1 - 0,16 мм и менее 0,1 мм возможназасчетвысокойспецифичноститакихдиагностическихэлементовкакцистолиты,ретортовидные, жгучие волоски и их обломки, но затруднена, в связи с тем, что повышаетсядоля частиц, не несущих диагностических отличий (фрагменты листовой пластинки впоперечном сечении, небольшие участки мезофилла, эпидермиса, проводящих пучков) (рис.64Б).АБРисунок 64. Порошок листьев крапивы (0,16-0,25 мм). Ув. х200А - обломок жгучего волоскаБ - фрагмент листа в поперечном сечении4.1.1.2.
Листья толокнянкиПроведенные исследования показали, что фракции с размером частиц 0,5-1,0 мм, 0,310,5 мм, 0,25-0,31 мм состоят из фрагментов листовой пластинки, расщепленной как вдоль, так ипоперек поверхности листа. В частичках, расщепленных поперек может быть представлен иверхний, и нижний эпидермисы, а также вся толща мезофилла с жилкой (рис.63Б). Начастичках, расщепленных вдоль, виден либо верхний эпидермис, лишенный устьиц, состоящий141из полигональных изодиаметричных клеток счетковидноутолщенными клеточнымиоболочками, либо нижний, на котором группами расположены устьица, окруженные 7-8 (6-9)мелкими околоустьичными клетками (аномоцитный тип) (рис. 65А).На фрагментах верхнего эпидермиса листа толокнянки иногда можно видеть темныетрещины кутикулярного слоя, образовавшиеся, по всей вероятности, в результате процессаизмельчения.
Эпидермис наджилочной или черешковой части листа состоит из более мелкихчетырехугольных клеток. В мезофилле, клетки которого имеют коричневатое содержимое, вбольшом количестве находятся кристаллы оксалата кальция различной формы (ромбические,призматические, кубические, в виде плохо оформленных друз), часто образуя вдоль жилокскопления в виде цепочек.Фракция порошка 0,16-0,25 мм помимо вышеописанных фрагментов листовой пластинкисодержит достаточно много элементов, не несущих диагностических отличий (обрывкимезофилла с жилками или без них, небольшие участки эпидермиса), что несколько затрудняетдиагностику порошка.Во фракции 0,1 - 0,16 мм и менее 0,1 мм идентификация чрезвычайно затруднена из-заналичия в порошке практически не диагностируемых элементов - клеток мезофилла,расположенных одиночно или группами (в основном цепочками), небольших фрагментовэпидермиса, обрывков проводящих пучков, сосуды в которых имеют спиральное, лестничное исетчатое вторичное утолщение клеточных стенок.
Практически единственным достовернымдиагностическим признаком при данной дисперсности остается наличие кристаллов оксалатакальция. 2 - 3-х клеточные изогнутые волоски, расположенные у основания листа не имеютдиагностического значения при определении подлинности порошка листа толокнянки, так какпрактически не встречаются.Таким образом, было установлено, что для идентификации порошкованного листатолокнянкиприпроведениимикроскопическогоанализацелесообразноотсеиватьииспользовать фракцию 0,25 - 0,31 мм.
При данной измельченности обеспечивается наилучшеепросветление кусочков листа за счет легкого проникновения экстрагента (при предварительномудалении фенольных соединений) и просветляющей жидкости в ткани, а достаточный размерчастиц позволяет обнаружить все основные диагностические признаки, присущие листутолокнянки.142АБРисунок 65. Порошок листьев толокнянки.А - фрагмент нижнего эпидермиса листа.
Ув. х200. 1 - аномоцитный тип устьичного комплексаБ - фрагмент листа в поперечном сечении, 1 – эпидермис, 2- жилка,3 - кристаллы оксалата кальция. Ув. х90.4.1.1.3. Листья брусникиПорошок листа брусники фракций 0,5-1,0 мм, 0,31-0,5 мм, 0,25-0,31 мм, 0,16-0,25 ммсостоит главным образом из фрагментов листовой пластинки, расщепленной вдоль.
Такимобразом, в поле зрения микроскопа наблюдаются: верхний эпидермис, состоящий изслабоизвилистых клеток, с подстилающей его палисадной паренхимой (рис. 65А); нижнийэпидермис,имеющийпарацитныйтипустьичногокомплексаихорошозаметнуюподстилающую его губчатую паренхиму с крупными межклетниками; реже наджилочный иличерешковый эпидермис, состоящий из небольших четырехугольных клеток. На нижнемэпидермисе, клетки которого имеют четковидную утолщенность стенок и складчатостькутикулы, встречаются характерные булавовидные железки или их обломки.