Автореферат (1139589), страница 3
Текст из файла (страница 3)
По материалам диссертации опубликовано 24 работы (в том числе13 – в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования инауки РФ для публикации основных научных трудов), в которых содержится полныйобъѐм информации, касающейся темы диссертации.Объѐм и структура диссертации. Диссертация изложена на 248 страницахмашинописного текста и включает в себя введение, обзор литературы, материалы иметоды исследования, главы собственных исследований, заключение, выводы,практические рекомендации, список литературы, состоящий из 282 источниковотечественных и зарубежных авторов.
Работа иллюстрирована 37 таблицами и 63рисунками.Материалы и методы исследованияЭкспериментальные исследования.Экспериментальная часть исследований проведена на 220 морских свинкахмассой 180–200 г. В опытах использовали животных, прошедших карантинный режимвивария Курского государственного медицинского университета и не имевших внешнихпризнаков каких-либо заболеваний. Все животные содержались в одинаковых условияхна обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатовгруппы формировали из 15–17 животных. В контрольные и опытные группы входилиживотные одного возраста, полученные из питомника одновременно.
Разброс в группахпо исходной массе не превышал 10%. Все исследования проводили в одно и то жевремя суток во второй половине дня с соблюдением принципов, изложенных вКонвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных идругих целей (г. Страсбург, Франция, 1986).10Модель экспериментального кератоконъюнктивита.Экспериментальныйкератоконъюнктивитвызывалиуживотныхпутѐминфицирования конъюнктивы и роговицы глаза взвесью суточной агаровой культурыStaphylococcus aureus в концентрации 2х109 микробных тел/мл после их травмированияс последующей оценкой показателей фагоцитарного звена антиинфекционной защиты,активности оксидантных и антиоксидантных ферментных систем и обсеменѐнностислизистой.Физические факторы воздействия.Дляизучениявлиянияаномальногомагнитногополяиспользоваласьэкспериментальная установка, состоящая из высокостабилизированного источникапостоянного тока и 2 колец Гельмгольца диаметром 1,5 м (расстояние между кольцами1 м) (Калуцкий П.В., 1997).
Вектор напряжѐнности поля находился в суперпозиции свектором вертикальной составляющей ГМП на территории г. Курска (фоновое значениевертикальной составляющей ГМП 4,5х10-5 Тл). Экспериментальные животные иживотные групп сравнения помещались в искусственное магнитное поле за 2 недели доначала эксперимента с целью адаптации к условиям среды обитания. Морские свинкиконтрольной группы находились при фоновых значениях естественного ГМП на широтег.
Курска (напряжѐнность поля 0,45 эрстеда). Исследование клинических проявленийинфекционного процесса, иммунологических показателей периферической крови,оксидантной и антиоксидантной систем, обсеменѐнности слизистой глаза животныхпроводилось на 3, 7 и 14 день после инфицирования.У животных экспериментальных групп и групп сравнения для определенияисследуемых показателей производился внутрисердечный забор крови в объѐме 5 мл на3, 7 и 14 сутки моделирования экспериментального кератоконъюнктивита.
У животныхконтрольной группы аналогичный забор крови проводился однократно.Способы введения и дозировки препаратов, использованных у животных сэкспериментальным кератоконъюнктивитом.Применение лекарственных препаратов в эксперименте начиналось с третьего дняпосле инфицирования, когда у морских свинок формировался инфекционный процесс, ипродолжалось в течение 10 дней. В эксперименте использовали следующие препараты:азоксимерабромид(полиоксидоний),глюкозаминилмурамилдипептид11(ликопид),полиадениловаякислота+полиуридиловаякислота(полудан)ипентагидроксиэтилнафтохинон (гистохром), обладающие иммуномодулирующим и/илиантиоксидантным действием. Азоксимера бромид вводился внутримышечно, аглюкозаминилмурамилдипептид – внутрижелудочно через зонд 1 раз в день в первойполовине дня в дозах, рассчитанных согласно инструкциям по применению препаратовв пересчѐте на массу тела животных.
Пентагидроксиэтилнафтохинон вводили путѐмвнутримышечных инъекций препарата концентрацией 0,02% в дозировке 0,007 мл/кг.Полиадениловую кислоту+полиуридиловую кислоту инстиллировали ежедневным 15минутным форсажем с концентрацией 1 ЕД в инфицированный глаз.Характеристика клинических наблюдений.В клиническом исследовании, на основании информированного согласия,приняло участие 160 человек, страдающих заболеваниями переднего отрезка глаза, ввозрасте 25–50 лет, из них 80 человек – жители г.
Курска (регион с фоновым значениемнапряжѐнности ГМП – 0,45 эрстеда), проживающие в регионе не менее 2 лет, и 80 –жители центра КМА – г. Железногорска (напряжѐнность ГМП 3 эрстеда). Группаконтроля состояла из 20 здоровых добровольцев в г. Курске и из 20 человек вг. Железногорске. Исследования проводились на базах городской поликлиникиг.
Железногорска и областной офтальмологической поликлиники г. Курска. В основныегруппы входили жители г. Курска и г. Железногорска, обратившиеся в Курскую иЖелезногорскую поликлиники с характерными жалобами.Диагноз кератоконъюнктивит устанавливался на основании характерных жалобпациентов, данных инструментального исследования. Для интегральной оценки тяжестивоспалительного процесса была разработана шкала оценки для исследуемых групппациентов.У всех обследуемых основных и контрольных групп для исследованияиммунологических параметров производился отбор крови и слѐзной жидкости. Кровьзабирали из локтевой вены в объѐме 5 мл утром натощак. Чистую слѐзную жидкость,представляющую собой в основном секрет слѐзных желѐз, получали без микротравм спомощью микрокапилляра с наружной поверхности нижнего века.12Способы введения и дозировки препаратов, использованных у больных скератоконъюнктивитами.С целью исследования влияния ПГЭН и ПАдК+ПУрК на иммунологическиефакторы крови и слѐзной жидкости данные препараты применялись у больных с началазаболевания.
Две группы сравнения в городах Курск и Железногорск по 20 человек вкаждойполучалилечениепообщепринятойметодикеведенияпациентовсзаболеваниями переднего отрезка глаза. Пациенты исследовательских групп в городахКурск и Железногорск по 20 человек в каждой получали дополнительно курс ПГЭНвнутримышечно объѐме 0,5 мл раствора 0,2 мг/мл в течение 10 дней. В двух другихисследовательских группах в городах Курск и Железногорск по 20 человек в каждойбольные получали дополнительно курс инстилляций ПАдК+ПУрК по 1 капле 6 раз вдень в течение 10 дней или дополнительно сочетание внутримышечного введения ПГЭНи инстилляций ПАдК+ПУрК на протяжении 10 дней.Лабораторные методы исследования.Для оценки функционально-метаболической активности нейтрофилов кровиизучены фагоцитарный показатель (ФП) – процент активных фагоцитов из числасосчитанных нейтрофилов; фагоцитарное число (ФЧ) – среднее число частиц латекса,поглощѐнных одним фагоцитом из числа сосчитанных полиморфноядерных лейкоцитов.Полноценность фагоцитарного процесса оценивалась по завершѐнности фагоцитоза(ЗФ) и индексу активности фагоцитов (ИАФ) (Теплова С.Н., 1978).
Кислородзависимуюактивность бактерицидных систем нейтрофилов изучали в тесте восстановлениянитросинего тетразолия (НСТ-тест) с расчѐтом индекса стимуляции нейтрофилов (ИСН)и функционального резерва нейтрофилов (ФРН) (Бажора Ю.И. и др., 1981; ВиксманМ.Е.,МаянскийА.Н.,1979).Уровеньмиелопероксидазы(МП)определялсяцитохимически по методу Грехема-Кнолля с расчѐтом среднего цитохимическогокоэффициента (СЦК) (Нарциссов Р.П., 1964; Шафран М.Г. и др., 1979).
Состояниекислороднезависимыхбактерицидныхсистемоценивалосьпосреднемугистохимическому коэффициенту (СГК) при постановке лизосомально-катионного теста(ЛКТ) (Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А., 1981; Шубич М.Г., 1974).Количественная оценка уровней IgG, IgM, IgA, ФНО-α, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6,ИЛ-10, ИНФ-α, ИНФ-γ проводилась с помощью набора реагентов ВЕКТОР-БЕСТ (ООО«ВЕКТОР-БЕСТ», г. Новосибирск) методом твѐрдофазного иммуноферментногоанализа.13Оценку уровня лактатдегидрогеназы (ЛДГ) производили по В.В. Меньшикову(1987), каталазы – по методике М.А.
Королюк и соавт. (1988), супероксиддисмутазы(СОД) – по H.P. Mirsa, Y. Fredovich (1972), церулоплазмина – по методике, описаннойВ.С. Камышниковым (2003), малонового диальдегида (МДА) – по В.Г. Гаврилову исоавт. (1987), лактоферрина – методом твѐрдофазного иммуноферментного анализа.Методы статистической обработки результатов.Степень иммунных расстройств (СИР) для иммунологических показателейрассчитывали по формуле А.М. Земскова В.М. Земсков (1994). Рейтинговый алгоритмустанавливали по величине СИР, для чего исследованные иммунологические показателивыстраивались в порядке снижающейся значимости отличий от заданных значений(Земсков А.М., Земсков В.М., 1994). С помощью коэффициента диагностическойценности определяли формулу расстройств иммунной системы (ФРИС) путѐм выбора извсех изученных лабораторных параметров трѐх ведущих, наиболее отличающихся отуровня нормы (Земсков В.М. и др., 1993).Статистическаяобработкаданныхпроводиласьсиспользованиеманалитического пакета приложения Excel Office 2010 с использованием библиотекистатистическихфункций.Проверкураспределенияданныхнасоответствиенормальному закону распределения осуществляли с помощью критерия согласияраспределенияКолмогорова-Смирнова.Присоответствииэмпирическогораспределения нормальному теоретическому распределению критический уровеньстатистической значимости принимали равным 0,05.
Для оценки значимости различийдвух групп независимых наблюдений использовали параметрический критерий – tкритерий Стьюдента после дополнительной проверки равенства дисперсий двухсравниваемых групп посредством F-критерия Фишера-Снедекора, а также критерийВилкоксона-Манна и Уитни. Для сравнения средних значений нескольких выборокиспользовалинепараметрическийкритерийКраскела-Уоллиса.Определениедостоверности разницы двух наблюдаемых частот с вероятностью 95% производилосьпо формуле, описанной А.И. Венчиковым, В.А.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
