Диссертация (1139576), страница 4

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 4)

Выявлены морфологические различияформированиябиопленкиграмположительнымииграмотрицательнымибактериями, в том числе биопленки смешанного типа.Создана авторская модель для изучения микробной биопленки in vitro итехнология оценки ее чувствительности к антибактериальным препаратам.Изучена морфология смешанной биопленки с участием пародонтопатогенныхвидов.Предложена экспериментальная модель пародонтита на крысах дляизучения антагонистического действия пробиотических штаммов микрофлорыполости рта. Проведен анализ колонизации пародонта в условиях экспериментаin vivo у крыс смесью кандидатных пробиотических штаммов Veillonella parvulaи Streptococcus salivarius К 12.Получены доказательства роли отдельных представителей анаэробнойфлоры в составе биопленки (A. actinomicetemcomitans, B. forsithus, P.

intermedia,14P. gingivalis, T. denticola) в возникновении и развитии обострений заболеванийпародонта, на основе анализа частоты выделения у больных, особенностейпаразитизма, симбиоза и устойчивости к антибиотикам.Изучена частота антибиотикорезистентных штаммов пародонтопатогенныхбактерийивыявленымеханизмырезистентности(плазмидныеилихромосомные) с помощью молекулярно-генетического метода исследования(ПЦР).Обосновано и рекомендовано применение антибактериальных препаратов,активных в отношении внутриклеточных форм возбудителей. Сформулированыпоказания по применению антибактериальных препаратов разных классов вкомплексном лечении больных воспалительными заболеваниями пародонта, атакже предложены кандидатные пробиотические штаммы для стабилизациимикробиоценоза полости рта.Особый интерес представляло проведение лабораторных исследований исопоставление результатов обнаружения молекулярных факторов врожденногоиммунитета — цитокинов, антимикробных пептидов — дефензинов и Toll-likeрецепторов иммунных клеток в десневой жидкости, омывающей биопленку, илив парадонтальном кармане при развитии патологии пародонта.

Подобныеисследования в сравнительном аспекте при разной патологии пародонта ранее непроводились.На основании оценки факторов врожденного иммунитета уточненыпоказания для назначения иммуномодулирующей терапии (препаратов,содержащихпровоспалительныецитокины)прилечениизаболеванийпародонта.Практическая значимостьПредложен алгоритм для этиологической диагностики воспалительныхзаболеванийпародонта,основанныйнаприменениимолекулярно-биологических методов исследования, включая оценку генома резистентности кантибактериальным препаратам.15Усовершенствована методика оценки адгезии микробов и созданаэкспериментальная модель для изучения биопленки in vitro. Полученная модельиспользована для разработки новой методики оценки чувствительностимикробов непосредственно в биопленке к антибактериальным препаратам.Полученыисистематизированыпародонтопатогенныххимиопрепаратам,бактерийакопротивоанаэробнымтакжеантибиотикорезистентныхданныеизученаштаммовчувствительностиантибиотикамчастотаивстречаемостипародонтопатогенныхбактерий,выделенных при воспалительных заболеваниях пародонта.Установлены механизмы резистентности — плазмидные или хромосомные— к антибактериальным препаратам с помощью молекулярно-генетическогометодаисследования(ПЦР),инаоснованииполученныхданныхусовершенствованы показания для проведения антибактериальной терапии.Предложено использовать генетические маркеры Мес, VanA, VanB, Clx-m, Erm,Tet, QnrB для выявления антибиотикорезистентных штаммов у пациентов своспалительными заболеваниями пародонта.Изучены кандидатные пробиотические штаммы S.

Salivarius и V. parvula ипредложеноиспользоватьассоциациюдлязамещенияпатогеноввэкспериментальной модели пародонтита на крысиной модели.Рекомендованоприменениеантибактериальныхпрепаратоввнутриклеточного действия на патогены в составе биопленок в комплексномлечении воспалительных заболеваний пародонта у пациентов. Обоснованоприменение цитокинотерапии с учетом профиля цитокинов пациентов.Основные положения, выносимые на защиту1. Возникновение и прогрессирование воспалительных заболеванийпародонта ассоциировано с формированием микробных биопленок на слизистойоболочке полости рта и пародонта смешанного характера, причем микробныебиопленки при основных видах воспалительных заболеваний пародонта —гингивите, пародонтите и кандидозе — существенно отличаются по видовому16составу ассоциаций возбудителей.2. Микробные биопленки анаэробных пародонтопатогенных видов могутбыть смоделированы в эксперименте in vitro и использованы для изученияособенностей роста грамположительных и грамотрицательных бактерий иоценки их чувствительности к антибактериальным препаратам.3.

Использование кандидатных пробиотических штаммов резидентноймикрофлоры может быть использовано для замещения патогенов в биопленкепародонта на экспериментальной крысиной модели лигатурного пародонтита.4.Выборантибактериальныхпрепаратовпривоспалительныхзаболеваниях пародонта следует проводить с учетом данных о внутриклеточномпаразитизме пародонтопатогенных видов бактерий и их резистентности кпрепаратам в биопленке пародонта у больных воспалительными заболеваниямипародонта.

Бактерии, выделенные из пародонтального кармана у больныхзаболеваниями пародонта, могут содержать хромосомные и плазмидныефакторы резистентности к антибактериальным препаратам — Мес, VanA, VanB,Clx-m, Erm, Tet, QnrB.5. При воспалительных заболеваниях пародонта отмечаются существенныеколичественныеизмененияфакторовврожденногоиммунитета—интерлейкинов, дефензинов, нейтрофилов десневой жидкости, экспрессии Tolllike-рецепторов, которые взаимосвязаны со степенью тяжести пародонтита.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиМониторинг формирования микробной биопленки и оптимизациядиагностики воспалительных заболеваний пародонта соответствует формуленаучных специальностей: 03.02.03 – «Микробиология» со следующимиобластями исследований указанной специальности по пунктам: 2 – выделение,культивирование,идентификациямикроорганизмов;3–морфология,физиология, биохимия и генетика микроорганизмов; 6 – сапрофитизм,паразитизм, симбиоз микроорганизмов; 8 – использование сапрофитныхбактерий антагонистов, продуцентов биологически активных веществ для17оптимизации микробиоценозов; и 14.03.09 – «Клиническая иммунология,аллергология» со следующими областями исследований этой специальности:изучение патогенеза иммунозависимых заболеваний (иммунодефицитныхсостояний,аллергическойусовершенствованиеиметодоваутоиммуннойпатологии);разработкадиагностики,леченияпрофилактикиииаллергических и иммунопатологических процессов.Личный вклад автораАвторомличнопроводилисьанкетированиепациентов,которыесоответствовали критериям включения в исследование, взятие материалов длямикробиологического и иммунологического исследований, а также все видылабораторных исследований, использованных в диссертационной работе.

Такжеавтор формировал базу данных, проводил систематизацию, математическую истатистическую обработку клинико-лабораторных данных, полученных врезультате исследования, готовил научные публикации по теме исследования,документы по внедрению в практику, необходимый патентно-информационныйпоиск и оформление заявок на изобретения.Внедрение результатов исследованияВнедрение полученных нами результатов осуществлено в учебнообразовательный процесс в виде разделов учебника «Микробиология,вирусология и иммунология полости рта» / под ред.

профессора В.Н. Царёва (М.:Практическая медицина, 2013. – Гл. 15–17, 22–27), разделов руководства дляврачей по медицинской микробиологии «Оппортунитические инфекции» / подред. А.С. Лабинской и соавт. (М.: Бином – 2013. – кН. 3. – Т.1. – С.126 –138; М.:Бином – 2014. – кН. 3. – Т.2. – С.224 –233), 3-х учебных пособий для студентов сгрифом УМО Минздрава РФ («Учебное пособие по иммунологии», М., 2012. –81с.; «Биоплёнки и микрофлора при патологии рта», М., 2014.

– 71с.; «Частнаямикробиология», М., 2015. – 83с.) и демонстрационных материалов для занятийстудентов в ГБОУ ВПО МГМСУ им. А. И. Евдокимова (кафедра микробиологии,18вирусологии, иммунологии; кафедра пропедевтической стоматологии, кафедрапародонтологии и гериатрической стоматологии), ГБОУ ВПО Первого МГМУим. И.М. Сеченова (кафедра микробиологии с вирусологией и иммунологией),слушателей системы последипломного образования ГБОУ ДПО РМАПО(кафедрастоматологии),внаучно-исследовательскийилечебно-диагностический процесс в виде 4-х патентов РФ, 3-х принятых заявок наизобретения РФ, диагностических алгоритмов, используемых Клиникодиагностическом центре ГБОУ ВПО МГМСУ им.

А. И. Евдокимова и ГБОУВПО Тверской ГМУ Минздрава РФ.Апробация работыОсновные положения работы доложены и апробированы на следующихнаучных форумах: IXнаучно-практическаяконференция«Инфекционныеболезнииантимикробные средства», 6–7 октября 2011 г., Москва; XXXIV Итоговая научная конференция молодых ученых МГМСУ, апрель2012 г., Москва; «Образование, наука и практика в стоматологии». IХ Всероссийская научнопрактическая конференция по объединенной тематике «Пути повышениякачества стоматологической помощи», 20–22 февраля, 2012 г., Москва; «Образование, наука и практика в стоматологии» Х Всероссийская научнопрактическая конференция по объединенной тематике «Стоматология исоциально значимые заболевания», 11–13 февраля, 2013 г., Москва; Всероссийскаямедициненаучно-практическая«Микробиология—конференцияпрактическомупотрансляционнойздравоохранению»,посвященная 70-летию кафедры микробиологии, вирусологии, иммунологииМГМСУ им.

А. И. Евдокимова, 21 мая 2013 г., Москва; Межрегиональная научно-практическая конференция с международнымучастием, посвященная 75-летию медико-профилактического факультета19Омской государственной медицинской академии, 7–8 ноября 2013 г., Омск; Infectious Diseases. Russia-Japan Forum. The 4th ISTC TI “Probiotics and Health”Workshop 26–31 Оctober 2013. Tokyo — Kyoto; I Междисциплинарный конгресс по заболеваниям органов головы и шеи«Медицина XXI века: междисциплинарный подход в патологии органовголовы и шеи», 27–29 мая 2013 г., Москва; Международный форум университетской науки — 2014 совместно с IIмеждународным конгрессом по биоревматологии (BRIC — GARN 2014EURASIA) 5–7 июня 2014 г., Москва; Всероссийская научно-практическая конференция специалистов по контролюинфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, с международнымучастием Форум, 19–21 ноября 2014 г., Москва;университетскойнауки—2015«Научноемедицинскоепрогнозирование: молекулярно-генетические аспекты, триггеры патогенеза,ятрогенные влияния», 9–11 февраля 2015 г., Москва; «1st Sino-Russian Young Scholars International Academic Conference on CriticalDisease (Cardiovascular Disease) Prevention and Treatment, the 7th Sino-RussianInternational Academic Conference on Medicine, the 5th Symposium of the ColdZone Cardiology Disease» October 12–14, 2015 Harbin, China; XIIIВсероссийскийстоматологическийфорум«Стоматологическоеобразование.

Характеристики

Список файлов диссертации