Диссертация (1139576), страница 2
Текст из файла (страница 2)
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯКОЛОНИЗАЦИИ ПАРОДОНТА НА КРЫСИНОЙ МОДЕЛИ ВОСПАЛЕНИЯ ПАРОДОНТА IN VIVO ............149ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИКО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ:ОЦЕНКА АССОЦИАЦИЙ ПАРОДОНТОПАТОГЕННЫХ ВИДОВ И ИХ ВЗАИМОСВЯЗИС КЛИНИЧЕСКИМИ ПАРАМЕТРАМИ .....................................................................................1624.1. РЕЗУЛЬТАТЫ ОБЪЕКТИВНОГО КЛИНИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ИНДЕКСНОЙОЦЕНКОЙ СОСТОЯНИЯ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА .................................................................................1624.2. СРАВНИТЕЛЬНАЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАЦИЕНТОВ ПОНОЗОЛОГИЧЕСКИМ ФОРМАМ (ХРОНИЧЕСКИЙ ГИНГИВИТ, ХРОНИЧЕСКИЙ ПАРОДОНТИТ, КАНДИДААССОЦИИРОВАННЫЙ ПАРОДОНТИТ) .............................................................................................17044.2.1.
Микроскопическая характеристика смешанной микробной биопленки пародонта внорме .........................................................................................................................................1714.2.2. Микроскопическая характеристика смешанной микробной биопленки пародонтапри хроническом гингивите ....................................................................................................1734.2.3 Микроскопическая характеристика смешанной микробной биопленки пародонтапри хроническом пародонтите ..............................................................................................1744.2.4 Микроскопическая характеристика смешанной микробной биопленки пародонтапри кандида-ассоциированном пародонтите .......................................................................1754.3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ БИОПЛЕНКИ НА НАЛИЧИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВПАРОДОНТОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ ............................................................................................1774.4.
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СОСТАВА ПАРОДОНТОПАТОГЕНОВ В БИОПЛЕНКЕ ИДЕСНЕВОЙ ЖИДКОСТИ ...................................................................................................................1824.5. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ ПРЕПАРАТАМШТАММОВ БИОПЛЕНКОПРОДУЦИРУЮЩИХ И КУЛЬТИВИРУЕМЫХ ПАРОДОНТОПАТОГЕННЫХБАКТЕРИЙ ......................................................................................................................................194ГЛАВА 5. РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ:ОСОБЕННОСТИ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМПАРОДОНТИТОМ ........................................................................................................................2035.1.
КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ СОСТАВ ПОПУЛЯЦИЙ ЛЕЙКОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ...........2035.2. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ИПОЛОСТИ РТА..................................................................................................................................2075.
3. ЭКСПРЕССИЯ ЛЕЙКОЦИТАРНЫХ ЭНДОГЕННЫХ АНТИМИКРОБНЫХ ПЕПТИДОВ .....................2095.4. ЭКСПРЕССИЯ НА ЛЕЙКОЦИТАХ ДЕСНЕВОЙ ЖИДКОСТИ РЕЦЕПТОРОВ ВРОЖДЕННОГОИММУНИТЕТА TLR-2 И TLR-4 .....................................................................................................2175.5. ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ ДЕСНЕВОЙ ЖИДКОСТИ, БИОПЛЕНКИ ПАРОДОНТА И ПЛАЗМЫПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ..............................................................................................................227ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .................................................................................................237ЗАКЛЮЧЕНИЕ ..............................................................................................................................268ВЫВОДЫ ........................................................................................................................................272ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШИХРАЗРАБОТОК.................................................................................................................................276ПРИЛОЖЕНИЯ ..............................................................................................................................278СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ..............................................................................................................2825Перечень условных обозначенийАФКВПМДНКЛПСИГ (OHI-S)МАКС.МИН.МПК90——————ПИ (PI)ПКПМА (РМА)ПЦРХГХПХПЛХПСХПТКАПhBDHNP 1 — 3TLRIL (ИЛ)A.
a.P. g.P. i.T. dT. f.VS————————————————————Pcor—РM. — U.—СD——активные формы кислородавнеклеточный полимерный матриксдезоксирибонуклеиновая кислоталипополисахаридупрощенный индекс гигиенымаксимальныйминимальныйминимальная подавляющая концентрация для 90%штаммовпародонтальный индекспародонтальный карманпапиллярно-маргинально-альвеолярный индексполимеразная цепная реакцияхронический гингивитхронический пародонтитлегкойсреднейтяжелой степени тяжестикандида-ассоциированный пародонтитβ -дефензиныα-дефензины человекаToll-like-рецепторыинтерлейкинAggregatibacter actinomycetemcomitansPorphyromonas gingivalisPrevotella intermediaTreponema denticolaTannerella forsythiaV.
parvula + S. salivarius (взвесь кандидатныхпробиотических штаммов)значение р с коррекцией на число сравнений поБонферонизначение р, определяемое с помощьюкритерия Манна — Уитнимаркеры кластера дифференцировки6ВВЕДЕНИЕЗа последние десятилетия наблюдается значительный рост заболеваемостипародонтитом и гингивитом (особенно среди детей и подростков) как вРоссийской Федерации, так и за рубежом, что является важным факторомснижения качества жизни пациентов с патологией пародонта [111, 208, 210].Пародонтит—этораспространенноевоспалительное заболевание,затрагивающее структуры, служащие опорой зубам.
Он инициируется ростомбиомассы бактерий с образованием биопленки в области десневого края, котораяраспространяется по эмали зуба (наддесневая) и уходит вглубь по пришеечнойчасти до цемента корня зуба (поддесневая). Бактериальный состав биопленок, сприсутствиемкоторыхдокументирован,исвязаноразвитиеисследованиявпародонтита,данномуженаправлениихорошопостояннопродолжаются [57, 81, 242].В последние годы благодаря применению новых научных методов(сканирующаяэлектроннаямикроскопия,различныемолекулярныеисследования) существенно изменился взгляд на зубной налет, который внастоящее время рассматривается как смешанная (мультивидовая) биопленка.Межклеточные коммуникации, образующиеся в биопленках, отличаются уздоровых людей и у пациентов с пародонтитом [54, 96, 281, 410,453].Тем не менее роль некоторых ответных реакций организма, изменяющихсяв результате воспаления, а также влияние на этот процесс таких факторовмикроэколологии полости рта, как уровень pH, температура, окислительныйстресс,продукцияцитокиновигормонов,степеньболезнетворностипародонтопатогенных бактерий, равно как и взаимосвязь процессов образованиябиопленки и деструкции тканей пародонта остаются недостаточно изученными[90, 323, 281, 410].Первостепенное значение в этиологии болезней пародонта и ихпрогрессировании, развитии рецидивов хронического пародонтита несомненноиграют специфические возбудители из группы облигатно-анаэробных бактерий7(так называемые пародонтопатогенные виды, по номенклатуре ВОЗ).
Аучитывая, что в полости рта человека находится от 530 до 800 видов микробов,значительная часть которых не культивируется, это существенно осложняетдиагностику заболеваний пародонта и требует применения молекулярныхметодов исследования для точной идентификации возбудителей [31, 32, 55, 188,447, 449].В перечисленных работах показано, что микроорганизмы способны кдифференцированнойассоциаций,организацииимеющихбиологическойпленки,специализированнаясообществмедицинскоекотораяэкосистема,значение.сизменениемРазработанапозиционируетсясвойствконцепцияавторамиобеспечивающаякакподдержкужизнеспособности всей микробной ассоциации и сохранение ее компонентов, атакже существенное увеличение биомассы этой популяции [94, 100, 216, 348].Важнейшими направлениями исследований являются: изучение свойствмикробных биопленок, оценка их влияния на развитие стоматологическихзаболеваний,ихпротиводействиеантибактериальнымпрепаратам,используемым для лечения, которые изучены слабо, а данные о влиянии набиопленки эндогенных и экзогенных энзимов и факторов врожденногоиммунитета крайне противоречивы.
Кроме того, полимерный матрикс,продуцируемый бактериями и окружающий микроколонии, служит защитнымбарьером.У исследователей отмечается значительный интерес к воздействиютрадиционных препаратов антибактериального действия на микроорганизмы,составляющие микробное сообщество, то есть в условиях сформировавшихсябиопленок [22, 32, 315, 450]. Продолжаются исследования по поиску новыхэффективных средств, с помощью которых возможно было бы снизитьагрессивный потенциал микробных биопленок в полости рта и в результатедобиться существенного снижения распространенности и интенсивностиосновных стоматологических заболеваний — воспалительных заболеванийпародонта и кариеса зубов [110, 311, 356].8Изучение биопленок, формирующихся в условиях текучих сред вестественной среде обитания, выявило существенные различия междупланктонными и биопленочными формами существования микробиоты,включая различия в поведении бактерий, биохимических процессах, биосинтезеразличных продуктов, обмене информацией, в том числе генетической.Очевидно, что биопленки могут способствовать передаче генов резистентностик антибиотикам и к различным химическим биоцидам [31, 220, 221].