Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1135282), страница 28
Текст из файла (страница 28)
диомиоциты; 3 — «роясносныс состдьд 4 — рыхлая аолокиистая сосдинитсльяая ~кань: 5 — эпнкард[по В. Г.слиссояд и др., 197О). работает в автоматическом режиме и способно сокращаться прн отсутствии нервных импульсов. Нервная система лишь модулирует (изменяет) частоту н силу сердечных сокращений. Клетки — водители ритма мелкие, многоугольной формы, миофибриллы в них расположены беспорядочно. На периферии синусно-предсердного узла н в предсердно-желудочковом узле присутствуют переходные миоциты, представляющие собой клетки продолговатой формы, поперечный диаметр которых меньше диаметра рабочих сердечных миоцитов. Функция переходных клеток в норме — передача импульса от клеток — водителей ритма к клеткам атриовентрикулярного пучка.
Если синусно- 126 предсердный узел не функционирует, они могут сами задавать ритм, но значительно более медленный, чем нормальный ритм сердца. Клетки предсердно-желудачкаваго пучка, его ножек и нх разветвлений в стенке желудочков сердца (волокон Пуркинье) представляют собой третий тип проводящих сердечных миоцитов. Их диаметр больше диаметра рабочих миоцитов, окраска значительно бледнее. Ядра обычно располагаются эксцентрично. Миофибриллы немногочисленны и идут неупорядоченно, не образуя общей поперечной исчерченности миоцита.
Функцией этих миоцитов является проведение импульса к сокращению и передача его сократительным сердечным миоцнтам. Кроме описанных кардиомиоцнтов, в стенке предсердия встречаются секреторные миоциты, которые вырабатывают предсердный натрнйуретический фактор, стимулирующий реабсорбцию натрия. Эпнкард представляет собой серозную оболочку и, следовательно, состоит из лгезопзелил ?однослойного плоского эпителия) и соединительнотканной основы. В отличие от эндокарда в эпнкарде часто встречаются жировые клетки н довольно крупные кровеносные сосуды.
Контропьньш вопросы 1. Из каких источников развиваются кровеносные сосуды и сердце? 2. Чем определяются особенности строения сосудов из различных участков кровеносного русла? 3. Каков общий план строения стенки сосуда? Назовите основные компоненты кюкдой оболочки на примере артерии мышечного типа. 4. По какому признаку классифицируются артерии? Какие типы артерий сущесш ?тот? 5. Расскажите о строении артерий эластического и смешанного типа. Приведите примеры.
б. На какие типы подразделяются вены? С чем связано количество мышечных элементов в стенке вены? Расскажите о строении вен различных типов. 7. Какие признаки позволяют отличить вену мышечного типа от артерии мышечного типа? 8. Что собой представляют капилляры? Какова их функция? Изложите общий план строения капилляра. 9.
Какие типы кровеносных капилляров вы знаете? Расскажите о строении капилляров разлячных типов. Приведите примеры органов, в которых можно встретить капилляры кюкдого типа. 10. Какие сосуды относятся к микроциркуляторному руслу? 11. Опишите строение лимфатических сосудов различных типов.
12. Из каких компонентов состоит эидокард? 13. Каково строение сердечных сократительных миоцитов? 14. Из каких частей состоит проводящая система сердца? 15. Какие морфологические и функциональные особенности характерны для проводящих сердечных миоцитов различных частей проводящей системы? 16. Что представляет собой эпикард? Каково его строение? МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КРОВЕНОСНЫХ СОСУДОВ И СЕРДЦА Комбинированный метод окраски, Рекомендованный Ромейсом.
Приготовление растворов. 1. Распюррезорцин- фуксина. Раствор А: 0,5 г основного фуксина и 1 г резорцнна распю- 127 ряют в 50 мл дистиллированной воды. Раствор Б: 2 г кристаллического хлорида железа растворяют в 10 мл дистиллированной воды. Раствор А нагревают до кипения в колбе объемом 200 мл, прибавляют раствор Б и на малом пламени кипятят еще 5 мин при помешивании. После охлаждения до комнатной температуры осадок собирают на маленький фильтр, затем вместе с фильтром помещают в колбу, заливают 70 — 100 мл 96% спирта и доводят до кипения. При этом осадок переходит в раствор. Остудив, прибавляют 0,7 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и фильтруют.
Раствор годен в течение нескольких месяцев. 2. Железный гематоксилин Вейгерта. Раствор А: 1 г гематоксилина растворяют в 100 мл 96% спирта. Раствор Б: Офнцинальный раствор полуторахлорисгого железа (50% раствор водного хлорного железа)„1 мл крепкой хлористоводородной кислоты и 95 мл воды. Растворы А и Б хранятся месяцами. Непосредственно перед употреблением соединяют равные количества растворов А и Б. Смесь может храниться 8 дней.
3. Раствор азофлоксина: азофлоксина 0,5 г, дистиллированной воды 100 мл, ледяной уксусной кислоты 0,2 мл. (Вместо азофлоксина: ксилидинового пунцового 0,2 г, кислого фуксина 0,1 г, дистиллированной воды 300 мл, ледяной уксусной кислоты 0,6 мл.) 4. Фосфорно-молибденовая кислота — оранжевый: фосфорно- молибденовой (или фосфорно-вольфрамовой) кислоты 3 — 5 г, дистиллированной воды 100 мл, оранжевого О 2 г.
5. 1% раствор уксусной кислоты. 6. 1% водный раствор светлого зеленого. М е т о д и к а о к р а ш и в а н и я: 1) препараты из 80/О спирта помещают на 15 мин в резорцин-фуксин; 2) ополаскивают водопроводной и дистиллированной водой; 3) окрашивают ядра железным гематоксилином Вейгерта 2 — 3 мин; 4) ополаскивают дистиллированной водой, затем промывают в проточной воде 10 мин; 5) окрашивают азофлоксином (или пунцовым кислым фуксином) 5 мин; 6) ополаскивают в 1% уксусной кислоте; 7) дифференцируют в фосФорно-молибденовой кислоте — оранжевом до обесцвечивания коллагеновых волокон; 8) быстро ополаскивают в 1% уксусной кислоте; 9) подкрашивают светлым зеленым 5 мин; 10) промывают в 1% уксусной кислоте 5 мин; 11) переносят в абсолютный спирт (3 порции), ксилол, бальзам.
Р е з у л ь т а т: ядра черные, цитоплазма красная, коллагеновые волокна зеленые, эластические — черные, миоциты красные. Окрашиванне артерий эластического типа орсеииом. П р и г от о в л е н и е р а с т в о р а: 1 г орсеина растворяют в 100 мл 70% спирта и добавляют 1 мл концентрированной хлористоводородной кислоты.
М е т о д и к а о к р а ш и в а н и я: 1) парафиновые срезы без наклейки и депарафинирования пускают плавать на поверхности красителя в течение 30 — 60 мин, после чего по1псватывают на пред- 128 метное стекло; 2) быстро ополаскивают в дистиллированной воде и 96'/» спирте; 3) дифференцируюг в 100% спирте до почти полного исчезновения фона; 4) просветляют в ксилоле, заключают в бальзам.
Р е з у л ь т а т: эластические волокна и мембраны окрашены в красно-коричневьш цвет. Все остальное почти бесцветно. После фиксации в жидкости Буэна ядра остаются окрашенными в красивый фиолетовый цвет. Выявление серебреиием границ эидотелиоцитов сосудов и эндокарда.
М е т о д и к а 1. Отмытые от крови разрезанные сосуды переносят в 0,550 водный раствор нитрата серебра и оставляют в нем до тех пор, пока кусочки не начнут становиться мутно-белыми и непрозрачными (приблизительно на 5 мин). Далее материал промывают в большом количестве дистиллированной воды и оставляют на солнечном свету до появления коричневой окраски. После этого несколько раз промывают дистиллированной водой, растягивают (например, натягивая на пробку и закрепляя шипами колючих кустарников), обезвоживают, просветляют в ксилоле и заключают в бальзам. М е т о д и к а 2. Сосуды наркотизированного и обескровленного путем отрезания верхушки сердца животного промывают 3,3% раствором сульфата натрия до полного удаления крови.
Затем иньецируют 1 — 5% раствор нитрата серебра до заполнения всей сосудистой системы. После этого берут кусочки брыжейки, мочевого пузыря и т. д.„распластывают, ополаскивают дистиллированной водой, фиксируют спиртом и заключают в бальзам. Р е з у л ь т а т: границы эндотелиоцитов импрегнируются в черный цвет, а цитоплазма и ядра бледно окрашены или не окрашены. Выявление волокон Пуркины окраской гликогена кармином по методу Беста.
Проводящие миоциты сердца богаты гликогеном, поэтому хорошо выявляются кармином по методу Веста. Приготовление растворов. 1. Основнойраствор кармина Беста: 2 г кармина, 1 г карбоната калия и 5 г хлорида калия растворяют 60 мл дистиллированной воды н кипятят на малом пламени в течение нескольких минут (осторожно, сильно пенится!). После охлаждения прибавляют 20 мл аммиака. Раствор сразу годен к употреблению. В темноте и в хорошо закупоренном сосуде хранится 1 — 2 мес.
Перед употреблением раствор следует профильтровать. 2. Перед употреблением готовят рабочий раствор: основного раствора кармина Беста 20 мл, аммиака 30 мл, метнлового спирта 30 мл. 3. Смесь для дифференцировки: метилового спирта 40 мл, абсолютного спирта 80 мл, дистиллированной воды 100 мл. Методика окрашивания.
Материал фиксируют в жидкости Карнуа, спирт-формалине (1 часть формалина, 3 части 129 80% спирта) или другом фиксаторе, не содержащем воды, в которой гликоген растворяется. Заливка более пригодна целлоидиновая, так как целлоидин делает гликоген нерастворимым. После этого: 1) интенсивно окрашивают ядра гематоксилином Эрлиха; 2) основательно промывают; 3) окрашивают в рабочем растворе кармина Беста 5 — 20 мин; 4) переносят в дифференцируюшую смесь метнлового и абсолютного спирта с дистиллированной водой (срок дифференцировки от нескольких секунд до нескольких минут, пока не перестанут отходить облачка краски — 2 порции жидкости); 5) ополаскивают 80% спиртом, обезвожнвают, просветляют в ксилоле, заключают в бальзам. Р е з у л ь т а т: гликоген интенсивно-красный, ядра синие.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
