И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова - Руководство к практическим занятия по физиологии человека и животных (1128356), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Запрещается оставлять животных в ожидании эксперимента больше, чем это необходимо для проведения премедикации. 4. Запрещается переносить мелких животных по холоду в неутепленных клетках. 11. Премедикация. Фиксации животного 1. Премедикация проводится ответственным за работу с животным лицом или под его наблюдением. 2. Если животное испугано или состояние наркоза наступает не сразу, экспериментатор должен ждать, пока животное не успокоится или не заснет. 3. Животное можно фиксировать только после того, как подействует наркоз. 4.
При проведении процедур, которые требуют иммобилизации бодрствующих животных, разрешается привязывать животное к лабораторной доске только на непродолжительное время. Для иммобилизации животного на продолжительное время следует применять ящики-домики и щитки-ошейники. 5.
После фиксации собак с них снимаются повязки-намордники, ' 6. Повязки на конечностях животного должны быть мягкими, не препятствовать кровообращению; животному не должна быть придана неудобная поза с вывернутыми конечностями. Приложения 7. При помещении бодрствующих животных в стереотаксический аппарат необходимо провести местное обезболивание участков головы, подвергающихся сдавливанию. Ш. Обезболивание 1. После дачи животному наркоза, необходим постоянный контроль со стороны экспериментатора (или анестезиолога) за уровнем наркоза. При использовании миорелаксантов рекомендуется систематическое выведение животного из состояния обездвижения для проверки уровня наркоза.
При первых признаках ослабления наркоза он должен быть углублен. Запрещается применение средств, препятствующих контролю за уровнем наркоза: афонин, завязывания морды и т. д. 2. Все эксперименты с нанесением животному болезненных ощущений„ включая эксперименты по изучению шока, должны проводиться с отключением сознания у животного. Допускается нанесение пороговой боли при изучении механизма боли и влияния на организм анальгетиков и анестетиков, Порог боли определяется индивидуально для каждого животного; критерием возникновения порогового болевого ощущения следует считать реакцию избегания-: отдергивание конечности, перемену места, прыжок. Нанесение болевых раздражений, вызывающих голосовую и активную двигательную (оборонительную) реакцию, запрещается.
Пороговые болевые раздражения наносятся в условиях свободного поведения животного. Наносимая пороговая боль должна быть непродолжительной. Развитие стрессовых состояний у животных в результате болевых раздражений и других мучительных состояний недопустимо. 3. При биологическом тестировании и производстве медико-биологических препаратов все процедуры проводятся в условиях шажения животного; болезненные процедуры при маркировке животных (отрезание ноггевых фаланг и др.), при взятии крови, при воздействии на слизистую глаза и т.
д. должны проводиться под местной анестезией или другого рода обезболиванием, 4. Дозы и время введения препаратов должны фиксироваться в соответствующих документах (протокол эксперимента). 17. Уход за животными в послеоперационном периоде !. При доставке животного в клетку после операции должны использоваться удобные носилки, исключающие нанесение животному травм, сдвигания повязок. В случае применения миорелаксантов и искусственного дыхания животное должно оставаться в лаборатории до полного восстановления дыхания. Грызуны, получившие травмы, например, при взятии крови из хвоста, отсаживаются в отдельную клетку во избежание покусов. 2.
Животное в хроническом опыте должно быть помещено в удобную клетку, облегчающую также условия наблюдения и ухода за животным. С момента появления у животного болей оно должно, получать седативные и обезболивающие препараты. Животное должно получать квалифицированный уход под контролем экспериментатора. 3. После особо сложных и ответственных операций рекомендуется первые сутки устанавливать круглосуточное дежурство около животного. 4. Состояние животного, и назначения препаратов должны отмечаться в протоколе эксперимента. Приложения 20 ПРИЛОЖЕНИЕ 3 к Правилам проведения работ с использбванием экспериментальных животных ПОРЯДОК ПРОВЕДЕНИЯ ЭВТАНАЗИИ (УМЕРЩВЛЕНИЯ ЖИВОТНОГО) 1. Гуманным умерщвлением животного — эвтаназией — называется быстрое и безболезненное умерщвление животного, не сопровождающееся у него чувством тревоги и страха. 2.
Животное должно получать адекватный уход (анестетики, питание, поение и т. д.) вплоть до самого момента его умерщвления. 3. Умерщвление животных не должно производиться в помещении, где содержатся животные, запрещается умерщвлять одних животных на глазах у других. 4. В острых опытах животное должно умерщвляться до прекращения действия наркоза.
Во всех случаях животное должно умерщвляться своевременно — до наступления у него болезненных состояний. 5. Оптимальным н универсальным методом умерщвления животных является передозировка наркоза — введение анестетика в летальной дозе (дозировка для наркоза ~ 3). б. При соблюдении этих условий допустимо умерщвление животного другими методами: а) мелких животных; мышей, крыс, лягушек, птиц и т.д. путем декапитации; б) кроликов — путем воздушной эмболии; в) крупных животных: взрослых собак, свиней и пр.
— с помощью пропускания электрического тока, при этом электроды вводятся в область продолговатого мозга и в область крестца. 7. При необходимости изучения ультраструктуры мозга применяются мгновенные методы эвтаназии (например, мгновенное замораживание при погружении животного в жидкий азот). Использование в этом случае электротока недопустимо. Если предусматривается морфологический анализ тканей мозга с использованием светового микроскопа, то для эвтаназии должны применяться анестетнки. 8. Допускается умерщвление животных, используемых в производственных целях, путем обескровливания. При этом может быть подобран метод обезболивания, отличный от фармакологических воздействий. 9.
При проведении эксперимента с применением миорелаксантов допускается умерщвление животного путем отключения искусственного дыхания, но лишь в условиях сохранения адекватного наркоза. 10. Допускается умерщвление мелких животных с помощью наркоза (ингаляционного) без предварительного введения других видов анестетиков. Наиболее пригодным для этой цели является хлороформ. Но при этом эвтаназия должна производиться в специальной камере, в теплом помещении; подача хлороформа, должна вестись очень небольшими дозами — по капле.
Введение Рекомендуемая литература: 1. Лукьянов А.С., Лукьянова Л.Л., Чернавская Н.М., Гилязов С.Ф. Биоэтика. М., 1996. 2, Матюншн А.И., Осняч В.С., Павлов ТН, Деонтология медико-биологического экспериментаоМетодические указания для профессорско-преподавательского состава. М., 1987. С.75. МАЛЫИ ПРАКТИКУМ ПО ФИЗИОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ Тема 1. БИОЭЛЕКТРИЧЕСКИЕ ПОТЕНЦИАЛЫ: ПОТЕНЦИАЛ ДЕЙСТВИЯ НЕРВА ВВЕДЕНИЕ Седалищный нерв содержит большое число нервных волокон (аксонов), каждое из них может проводить потенциалы действия (ПД). Одни волокна в норме проводят возбуждение от спинного мозга к периферии (эфферентные нервы), другие — от периферии к спинному мозгу (афферентные нервы).
Если на нервный ствол в области, прилегающей к спинному мозгу, нанести электрический стимул достаточной интенсивности, то возбудятся все волокна и ПД будут распространяться к периферии. Если препарат седалищ- ного нерва поместить на регистрирующие электроды, то с помощью катодного осциллографа можно зарегистрировать суммарный иотенциал действия нерва. Этот внеклеточный потенциал отличается от ПД, измеренного с помощью внутриклеточных микро- электродов. При внеклеточном отведении суммарного ПД от нервного ствола регистрируют не изменение потенциала на мембране волокна, а падение напряжения на внеклеточном межэлектродном сопротивлении, вызванное протеканием локальных токов вдоль наружной поверхности волокон от покоящихся участков к возбужденному.
Нервные волокна, входящие в состав нерва, имеют разный диаметр, могут быть миелинизированными и немиелинизированным, в связи с этим они будут иметь и различные пороги раздражения. Поэтому, чем больше будет возбуждено волокон, тем больше будет сила локального тока, меньше шунт, а следовательно, больше разность потенциалов, которую регистрируют внеклеточные электроды. Увеличение амплитуды ПД, регистрируемого от целого нерва, -наблюдают только до того момента, Раздел 1. Физиология нервов и мышц пока сила раздражения не станет пороговой для всех волокон (максимальная сила раздражения). Перед выполнением задачи студенты должны повторить по материалам лекций и рекомендуемым учебникам основные свойства ПД, динамику изменения ионных токов при генерации ПД и применить полученные знания к объяснению результатов, наблюдаемых при проведении практической работы.
Задача. Регистрация потенциала действия седалищного нерва лягушки Цель работы: е зарегистрировать двухфазный и монофазный потенциалы действия; е исследовать зависимость амплитуды потенциала действия от силы раздражающего стимула; е определить зависимость порога раздражения нерва от длительности стимула; ° измерить продолжительность периодов абсолютной и относительной рефрактерности для нерва. МЕТОДИКА В работе проводится внеклеточная регистраци ПД с общего ствола седалищного нерва травяной лягушки при его электрическом раздражении. Материалы и оборудование. Для выполнения работы потребуются стандартный препаровальный набор инструментов (см. с.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
