А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 175
Текст из файла (страница 175)
Доводят объем до ! 00 мл и оставляют стоять на неделю. Затем раствор фильтруют и добавляют равный объем 0,2%-го раствора К1. Раствор соляной нислоглы. НС! конце~ ~трированная — ! 6 мл) вода дистиллированнаяв 84 мл. 586 ПРИ!7 ОЖЕНИЕ 6 РЕЦЕПТЫ РАСТВОРОВ 1. Реактивы для выявления оксидазы ° Свежеприготовленный 1%-й водный раствор солянокислого тетраметил-п-фенилендиамина. е ЗΠ— 40 мг и-нафтола растворяют в 2,5 лщ этилового спирта-ректификата, добавляют 7,5 мл дистиллированной воды и растворяют 40 — 60 мг диметил-и-фенилендиамина. 2. Фиксирующие жидкости ° Этиловый спирт 96; время фиксации — 10 — 15 мин.
° Мстиловый спирт безводный; время фиксации — 3 — 5 лгин. ° Смесь Никифорова: этиловый спирт и серный эфир в равных объемах; время Фиксации — 5 — 10 мин. ° Спиртформол: 40%-й формалин — 5 мл; этиловый спирт 96' — 95 мл; время фиксации — 5 — 15 мин.
° 1 — 2%-й водный раствор осиновой кислоты; фиксация, в парах 3 — 5 мин. Раствор осмиевой кислоты сохраняют в темном флаконе с притертой пробкой. При работе следует свблюдагпь вствражность, так как пары асмия могут повредить глаза! 40%-й формалин; фиксация в парах несколько секунд. ° Фиксатор Карнуа: этиловый спирт 96' — 60 мл; хлорофорл~ — ЗО мл; ледяная уксусная кислота — 10 мл; время фиксации — 15 мин.
Жидкость Руге: 40%-й формалин — 20 мл; ледяная уксусная кислота — 1 мл; вола дистиллированная — 100 мл! время фиксации — 5 мин. Рекомендуется для фиксации клеток, выращенных в жидких средах неопределенного состава. ° Фосфорномолибденовая кислота, 5%-й водный раствор; время фиксации— 5 мин. ° Смесь Шаудина: насыщенный раствор сулемы — 2 части; этиловый спирт 96 или абсолютный — 1 часть; на мазок наносят каплю фиксатора и медленно подсушивают на воздухе.
3. Чернила по стеклу Раствор 1: 1,0 г фуксина основного растирают в ступке с 15 мл этилового спирта. Ративор 2; к 2,0 г таннина добавляют 15 мл воды и нагревают до кипения. Растворы 1 и 2 смепзивают в равных объемах. 4. Перегоика фенола Фенол перегоняют из колбы Вюрца, закрытой корковой пробкой. Колбу помещают непосрелственно на сетку. В качестве приемника используют заранее взвешенную сухую Фарфоровую чашку. В нее отгоняют некоторое количество фенола и, когда он застынет, определяют его массу, исходя из которой„ готовят соответствующий объем раствора или необходимого реактива. Перегонку фенола осуществляют в вытлжнам шкафу.
При работе с феналвм следует соблюдать большую остврвжнотпь, так как оп вызывает сильные вжаги1 5. Физиологический раствор Готовят 0,85%-й раствор !4аС! в дистиллированной воле. При необходимости стерилизуют 30 мин при ! ати. 6. Подготовка предметных и покровиых стекол для приготовления препаратов. Предметные и покровные стекла считаются чистыми, когда капля воды растекается по их поверхности. Новые стекла обычно кипятят в 1%-ном растворе соды, затем промывают дистиллированной водой, слабым раствором соляной кислоты и затем опять дистиллированной водой.
Стекла, бывшие в употреблении, кипятят в мыльной воде и 587 Внимание! Хромовая смесь сильно разрутает ткани животного и растительного происхождения, поэтому работать с ней следует остороэкно, Если она попала оа руки или одежду, то пораженное место следует нел~едленно обмыть балыиим количеством воды, затем разбавленным раствором аммиака или соды, а затем снова водой. 9. Спиртовой раствор КОН дяя мьпъя посуды. 40 — 50 г КОН растворяют в 500 мл воды. После остывания раствора к нему добавляют спирт-сырец в таком количестве, чтобы общий объем составил 1 л. 10. Свойства важнейших кислотно-основных индикаторов (по Лурье; 1967). Концентрация, % Окраска индикатора Интервал перехода РИ Индикатор Растворитель Желтая — зе- ! леная Метиловый фиолетовый (метилвнолет, 1-й переход) 0,13 — 0,5 0,10 и 0,05 Метиловый зеленый 0,1 — 2,0 0,05 Вода Желтая — зе- лено-голубая Метиловый фиолетовый (2-й переход) 0,10 Вода 1„0 — 1,5 Зеленая— синяя м-Крезоловый пурпур- ный (! -й переход) 0,04 Спирт 20' 1,2 — 2,8 Красная— желтая Тимоловый синий (тимолблау, 1-й переход) а) Спирт20.
б) Вода с добавлением 4,3 мл 0,05 н. г(аОН на 100 мг индикатора 1,2 — 2,8 Красная— желтая О,!О затем не менее суюк выдерживают в растворе хромовой смеси. От бихромата стекла отмывают дистиллированной водой. Чистые стекла хранят в 96-градусном этаноле. 7. Обработка предметных стекол по Цеттнову Стекла кипятят 10 мин в следующем растворе: бихромата калия — 20,0 г; дистиллированная вода — 200 мл; концентрированная серная кислота — 20 мл.
Промывают в течение 5 мин слабым раствором едкого патра. ° Тщательно промывают водой (10 раз). ° Промывают спиртом (3 раза). ° Бысгрый способ обезжиривания предметных стекол ° При отсутствии заранее приготовленных обезжиренных стекол можно быстро приготовить стекла, натирая их в сухом виде хозяйственным мылом и очищая затем чистой хлопчатобумажной тканью. 8. Хромовые смеси для мытья посулы. ° В концентрированную серную кислоту добавляют около 5% (от объема серной кислоты) размельченного в порошок кристаллического К,СгзО, и осторожно нагревают в фарфоровой чашке на водяной бане до его растворения.
° Двухромовокислый калий растворяют в воде, затем в раствор осторожно добавляют серную кислоту. Смесь гоювят из расчета: вода — 100 мл; двухромовокнслый калий — 6,0 г; сериал кислота (плотность 1,84) — 100 мл. После многократного употребления темно-оранжевьгй ~!яет хромовой смеси меняется на темно-зеленый.
Такая смесь уже не обладает моющими свойствами. Хромовой смесью нс следует мыть посуду, загрязненную парафином, керосином, минеральными маслал~и н другими продуктами перегонки нефти. Интервал перехода РН Концентрация, % Окраска индикатора Растворителе Индикатор Вода 2,0 — 3,0 0,10 Синяя— фиолетовая 3,1 — 4„4 0,10 0,10 0,10 и 1,00 Вода 3,0 — 5,2 3,8 — 5,4 0,10 Желтая— синяя Спирт 60' Красная— желтая О,!О Желтая— красная 5,2 — 6,8 0,10 Желтая— пурпурная 6,0 — 7,6 0,05 и 0,10 Желтая— синяя Спирт 60 6,8 — 8,4 0,10 6,8 — 8,4 0,10 и 0,05 Желтая— красная Метнловый фиолетовый (3-й переход) Метиловый оранжевый (метилоран>к, оранж.
Ш, гелл анти н) Бромфеноловый синий (бромфенолблау) Конго-красный (конгорот) Бромкрезоловый синий (бромкрезолгрюн, бром- крезслблау, бромкрезо- ловый зеленый) Метиловый красный (метилрот) Бромфеноловый крас- ный (бромфснолрот, дибромфенолсульфоф- талеин) Бромкрезоловый пур- пурный (бромкрезол- пурпур, дибром -о-кре- золсульфофталеин) Бролпнмоловый синий (бромтимолблау, дибром-тимолсульфофт- алеин) Нейтральный красный (нейтральрот) греноловый красный (фенолрот, Феполсульфофталеин) и 0,02 0,10 и 0,04 а) Спирт 20. б) Вода с добавле- нием 3 мл 0,05 н. !заОН на 100 мг индикатора а) Спирт 20'.
б) Вода с добавле- нием 2,9 мл 0,05н. !л)аОН на 100 мг и иди катора а) Спирт 20'. б) Вода с добавле- нием 3,9 мл 0,05 н. гзаОН на 100 мг индикатора а) Спирт 20'. б) Вода с добавле- нием 3,7 мл 0,05 н. !л!аОН на 100 л~г индикатора а) Спирт, 20'. б) Вода с добавле- нием 3,2 мл 0,05н. !л(аОН на 100 мг индикатора а) Спирт 20'. б) Вода с добавле- нием 5,7 мл 0,05 н. ХаОН на 100 мг индикатора 4,2 — 6,4 5,0 — 6,8 Поодолжепие Красная— оранжево- желтая Сине-фиоле- товая— крас-ная Красная— ян-терно-же- лтая Окончание Концент'- рация, Зе Интервал перехода рН Окраска индикатора Индикатор Растворителе 7,2 — 8,8 и-Крезоловый пурпур- ный (2-й переход) 0,04 Спирт 20" Жел пи— пурпурная 7,4 — 9,0 Тимоловый синий (2-й переход) 8„0 — 9,б 0,10 Желтая — си- 0,10 и Спирт 60 1,00 Фенолфталеин 8,2 — ! 0,0 Бесцветная— пурпурная Тимслфгалеин Спирт 90 9,3 — 10,5 Бесцветная— 0,10 и 0,04 синяя Оранжевый 11,5 — !4,0 Желтая— красная 0,10 Вода Примечание.
Водаднстиллированная. 11. Буферные растворы для приготовления и разведения суспензий микроорганизмов. Схема лргывтввленил буферньгх растворов Крезолоаый красный (крезолрот, о-крезол- сульфофталеин) а) Спирт 50. б) Вода с добавле- нием 5,3 мл 0,05 н. (х(аОН на 100 мг индикатора а) Спирт 20. б) Вода с добавле- нием 4,3 мл 0,05 н. гчаОН на 100 мг индикатора Янтарно-жел- тая — пурпур- но-красная л ллем л л ° $ ! Окончание Физические'свойства некоторых буферных растаоров Молярная мас- Мслярноста насыщснса (основание) испо раствора при О С рК„(20 'С) рк„/'С Наименование 6,15 195,23 0,65 -0,01! 6,60 212,! 5 АОА — 0,01! В18 — ТВ)8 РВОРА)л(Е 6,80 282,35 -0,016 2,30 342,26 6,80 Р1РЕ8 1,40 182,20 АСЕВ -0,020 0,22 7,50 229,25 2„60 ТЕВ -0,200 238,3! 7,55 2,30 252,33 2,50 179,18 ТК1С1ХЕ 0,80 — 0,021 8,35 163,17 В!С!ХЕ Глицил — глициноаый 1,10 8,40 132,13 СНЕ8 9,50 207,30 -0,009 0,85 САРЕ 221,32 10,40 0,85 ПРИЛОЖЕНИЕ 7 НЕАНГЛИЙСКИЕ ВЫРАЖЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ, ВСТРЕЧАЮЩИЕСЯ В НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЕ а.
ш. (апта шег)б!еш) ад Ьос аЬ ш1!1о аЬ ого а. с. (апп! спггсп!!а) А )Х (Аппо ))опл(п1) аб 1пбпЫшп НЕРЕЯ НЕРРБ -0,014 — 0,007 — 0,013 -0,028 с начала с самого начала текущего года нашей эры до полудня для данной цели, к этому случаю до бесконечности ай |п1епи|п ай ИЬ|1шп аййепйшп а роШег!оп сГ. (сопГег) согпйепйа сшп Г.
г. (ГоПо тегяо) |Ь., Ний. (|Ъ!йеш) й. (Ыеш) о) 1ос (!и !ос сй 1ос (|п 1осо сйаго) в цитируемом ме- |п |п а рг|оп' В,С. (ЬеГоге СЬпя1) с. (с!гса) с. р. (Сегег!5 рапЬпя) е. И. (ехе|прИ сгайа) е. г. (еп гоШе) егга1шп (р!. егга1а) С1 а1. его. (е1 се1ега) е1 всг!. (е1 вс|!Сспйа) ех СИС !. е. (!й ев1) |п ех. (!и ехгеиво) !п рагто |и ге !п вйп |и 1о1о !и тйго !и т!то ш1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
