С.В. Мугинова - Методические указания к курсу аналитической химии (1110118), страница 13
Текст из файла (страница 13)
рег.ЛюминесценцияГрадуировка⇒EntС0 = ,0000С1 = ,0000С2 = ,0000С3 = ,0000J0 = ,0000J1 = ,0000J2 = ,0000J3 = ,0000В этом меню осуществляется градуировка анализаторадля каждого конкретного вещества. Введите значенияконцентраций с1 – с5. Далее поместите в кюветное отделениеконтрольный раствор (дистиллированную воду), плотнозакройте крышку кюветного отделения, переведите курсор на J0и для измерения интенсивности контрольного раствора сфоновой концентрацией люминофора с0 нажмите клавишу«Еnt».
Аналогичным образом измеряют интенсивностьфлуоресценции растворов стандартной серии, передвигаякурсор на соответствующие значения Jx. Результаты измеренияфлуоресценции в контрольном растворе и растворахстандартной серии записывают в тетрадь. По полученнымданным строят градуировочный график в координатахинтенсивность флуоресценции (I) — с, концентрациярибофлавина, мкг/мл.7. Стрелками переведите курсор на с1 и вручную обнулитеэту концентрацию: на табло должно высветиться значение0,0000. Далее переведите курсор на J1, установите в кюветноеотделение кювету с анализируемым раствором неизвестнойконцентрации рибофлавина, закройте крышку анализатора,нажмите клавишу «Еnt». Запишите показание прибора (J1) втетрадь. По построенному градуировочному графику найдитеконцентрацию рибофлавина в анализируемом растворе.8.
Поместите в кюветное отделение кювету сдистиллированной водой. Повторите операции, описанные в п.797, для контрольного раствора не менее 10 раз. Используйтеполученные результаты для расчета предела обнаружения.V Вопросы для самоконтроля1. Что такое люминесценция? Почему при комнатнойтемпературе не все вещества люминесцируют?Поясните, исходя из структуры молекулы рибофлавина,почемуонафлуоресцирует.Являетсялилюминесценция равновесным процессом?2.
Какклассифицируютметодымолекулярнойлюминесценции?Какойвидлюминесценциипреимущественно используют в аналитической химии?3. Что представляет собой спектр возбуждения и что онхарактеризует?4. Что такое флуоресценция? Каковы её спектральныйсостав и длительность свечения?5. Какие спектры поглощения и флуоресценции называютнормированными?Зависитливидспектрафлуоресценции от длины волны возбуждающегоизлучения?6. Сформулируйте правило Каши, закон Вавилова иправило Стокса-Ломмеля. Какая из характеристиклюминесценции (спектр люминесценции, квантовый иэнергетический выходы люминесценции, величинастоксовского смещения) зависит от длины волнывозбуждающего света?7. В каком случае спектры поглощения и флуоресценциизеркально симметричны?8. Как меняется интенсивность флуоресценции с а)понижением температуры; б) повышением концентрациилюминофора?9.
Что служит источником излучения при возбуждениилюминесценции?Почему целесообразнее измерятьфлуоресценцию под прямым углом к источникувозбуждения? В каких случаях выгоднее использоватьдругие способы? Почему нельзя долго освещатьфлуоресцирующие растворы по их анализе?10.
Каковыметрологическиехарактеристикифлуориметрического метода анализа? Для решения80каких медицинских задач его используют? Приведитепримеры. [1]; [2]. Кн. 2. Гл. 11. С. 305-328; [5]. Кн. 2. Гл. 5. С. 98110; [6]. Гл. 5. С. 80-86.81.