К. Хаусман - Протозоология (1107653), страница 44
Текст из файла (страница 44)
18 -455 Сбор и культивирование протистов Самое яркое впечатление от многообразия форм простейших можно получить, просматривая нолевые пробы. Наряду с мелкими Мегахоа (например, коловратками и нематодами) в них первыми бросаются в глаза инфузории, большей частью очень полвижные. Фотосиитезирующие жгутиконосцы часто легко узнаются по своей окраске. Чтобы обнаружить бесцветных жгутикоиосцев, а также саркодовых, требуются некоторое терпение и хорошая установка для микроскопирования. Для проведения опытов, описанных в конце кажлой главы, нужны различные виды протистов.
Иногда их улается получить в других институтах или купить у одной из фирм, торгующих по почте биологическим материалом. Однако их можно выделить и самому -из природных проб или соответственно из организмов-хозяев. Ниже приводятся некоторые указания по сбору и культивированию одноклеточных. Затем помещен ключ для определения ряда широко распространенных пресноводных протистов до родового уровня (с.
277). Места сбора одноклеточных Почти все влажные и водные биотопы населены одноклеточными. Зеленая или коричневая окраска воды указывает на обилие жгутиконосцев. В случаях такого водорослевого кцвещния» число особей одного вида (или немногих видов) всегда бывает очень высоким, а число видов . очень небольшим. Лучшие места для взятия проб в водоемах -это пологие бере~а с гниющим растительным материалом. Здесь происходит обильный рост бактерий, ко~орые служаз.
основной пищей для многих протистов. Пробы следует брать с глубины не более нескольких сантиметров от поверхности воды, так как только здесь, как правило, преобладают условия, оптимальные для жизни одноклеточных. Сосудами для проб могут служить чистые стеклянные банки, а также пластиковые мешочки. В сосуды следует поместить кроме воды донный осадок из того же места водоема. В случае влажных субстратов (например, болотной почвы или подушек мха) рекомендуется залить их на короткое время водой, а затем сильно отжать и собрать выжатую жидкость.
Если нужно выяснить состав одноклеточных в проточной воде или в далеких от берега частях водоема, целесообразно использовать планктонную сетку. Сбор и культивирование прот«агав 275 Симбиотических и паразитических протистов можно найти почти в любых Мегагоа. Грегарины обнаружены у многих беспозвоночных, цапример в семенном пузырьке дождевых червей и кишечнике мучных червей.
Жгутиконосцы обитают в прямой кишке термитов и питающихся древесиной тараканов. В рубце жвачных отмечено огромное количество инфузорий. Наконегь следует вспомнить и о том, что многие протисты, особенно сидячие инфузории (Реп!по)за, СЬопо1псЬа, Вцсгопа), живут на теле других животных, например рыб и членистоногих.
Культивирование одноклеточных Если полевые пробы хотят сохранить в течение некоторого времени в лаборатории, их лучше всего перелить в большие чашки Петри и добавить туда же несколько зерен риса или прокипяченной пшеницы, Эта добавка стимулирует рост бактерий. Если часть проб поставить в умеренно светлое место, в них будут преимущественно размножаться фото- синтезирующие формы.
Для другой части проб желательно выбрать затемненное место, чтобы в ннх предпочтительно развивались гетеротрофные виды. Пробы не следует ставить в очень теплое место (достаточно комнатной температуры). Подобные культуры, как правило, относятся к смешанным и содержат большое число разных видов. В таких условиях организмы выживают в лучшем случае несколько недель, а потом погибают. Если хотят получить чистые культуры определенных видов, надо выводить их из одной особи (так называемые клональные культуры). Обычно это не так просто, потому что в большинстве случаев оптимальные условия жизни для соответствующего организма неизвестны. Некоторые виды, впрочем, довольно легко поддаются культивированию.
К ним относится Рагатес!ит. Культуральной средой здесь может служить сенной отвар: 15 г измельченного сена кипятят !5 мин в бидистиллированной воде, затем фильтруют. Среду наливают в чашки Коха (высотой 6 см, диаметром !О см) или в стеклянные банки. В каждый культуральный сосуд кладут также несколько прокипяченных стебельков сена. Сосуды слелует оставить на ночь открьпыми с тем, чтобы бактерии могли попасть в среду. Заюм их закрывают неплотно прилегающей крышкой.
Через 1 — 2 дня туда вносят парамеций, которые в таких культурах сохраняются несколько недель. Вместо бидистнллированной воды можно использовать продажную негазированную, т.е. не содержащую угольной кислоты минеральную воду. Уже множно лет для этого используются вода «Вольвик» (Франция) и «Спа» (Бельгия)". Этой же водой можно время от времени разбавлять полевые культуры. Хищных протистов, питающихся другими одноклеточными, напри- " В большинстве городов можно применить прокипяченную водопроводпую воду.- Прим, пегжв.
и* 27б Протозоологня мер амеб, можно содержать в среде Чокли: 80 мг ХаС1, 4 мг УНСО„ 4 мг КС!, 4 мг СаС1, и 1,б мг СаН,(РО4), 2Н,О в 1 л бидистиллированной воды. Вместо этой среды, впрочем, тоже вполне можно употреблять упомянутые виды минеральной воды. Примерно два раза в неде'лю к культурам надо добавлять кормовые организмы — как правило, таких инфузорий, как Ригатес(пт и Со1р!йит. для того, чтобы хищники не ~олько оставались живыми, но и размножались. Через несколько недель, когда создается впечатление, что число особей начинает снижаться, необходим пересев в свежую среду. Автотрофные одноклеточнь)с, такие, как Еий!ела, нуждаются, как правило, только в определенных солях и хорошо развиваются при соответствующем освещении.
Проще всего использовать продажное жидкое удобрение для цветов (например, «Субстраль») в кондентрации 1 мл на 100 мл бидистиллированной воды. Такие культуры необычайно долгоживущи (несколько месяцев), ио, впрочем, относительно медленно размножаются. Для физиологических и биохимических исследований иногда необходимо выращивать одноклеточных в массовом количестве и в отсутствие любых других организмов (аксенически). Уже в течение нескольких десятилетий аксеническн успешно культивируют инфузорию Теггаяупыпп, а в последнее время также и Рагатес!ит.
Культуральная среда, которую после приготовления необходимо проавтоклавировать, состоит нз 10 г протеозопептона, 5 г МаС1, 2 г декстрозы и 8 г дрожжевого экстракта на ! л бидистиллированной воды. Инокуляпия среды культивнруемыми организмами требует строго стерильных условий работы, чтобы избежать ее бактериальпого загрязнения. Здесь можно было дать лишь самые общие указания по культивированию протистов. За более полробной информацией следует обратиться к списку литературы по данной главе. Определитель некоторых широко распространенных пресноводных протистов Этот определитель далеко не всеобъемлющ. Он включает лишь наиболее распространенные формы. Идентификация здесь идет только до рода.
Для определения на видовом уровне нужна специальная лите- ратура. Размеры протистов варьируют от нескольких микрометров до нескольких миллиметров. В приведенном ключе организмы оцени- ваются словами «мелкие», «среднего размера» и «крупные». При этом имеются в виду следующие довольно широкие пределы: «мелкие» вЂ” меньше ! 5 мкм, «среднего размера»- 15 — 50 мкм, «крупные» более 50 мкм.
1, Одноклеточные организмы с подвижными ресничками, жгутиками или псевдоподиями. Эти органеллы в норме используются для движения или для создания ~оков воды (например, при захвате пиши). Клетки одиночные или входя~ в сос~ав колоний, сидячие или свободно передвигающиеся. Формы с хлоропластамн или без них............. 2 — Существуют многочисленные организмы, которые благодаря своим очень малым размерам и (часто) свободной подвижности могут быть легко спутаны с простейшими. К ним относятся, например, днатомовые и сине-зеленые волоросли, бактерии, а также такие низшие Мегахоа, как коловратки, гастротрихи, турбсллярии .
. . . . См. специальную литературу об этих организмах. 2. Клетки со жгутиками. Жгутики относительно длинные по сравнению с величиной клетки; их число обычно невелико (1, 2 или 4). Кле~ки мелкие или среднего размера, могут образовывать агрегаты или крупные колонии......... 3 — Клетки без жгутиков; снабжены относительно короткими многочисленными ресничками или способны образовыват1 псевдоподии......,............. 21 З. Клетки прикреплены к субстрату, одиночные или в виде колоний. Виды с хлоропластами редки..........
4 278 Протозоологня — Клетки не прикреплены, а плавают или скользят..... 7 4. ' Клетки без хлоропластов.............. 5 — Клетки с хлоропластами. Организмы образуют средние по величине или крупные колонии, причем каждая клетка живет в органическом домике. Домики вставлены друг в друга, благодаря чему возникают древовидные колонии. Клетки мелкие. Ипобгуоп (рис. 1). Клетки с единственным апикальным жгутиком, который окружен тонким цитоплазматическим воротничком. Одиночные или колониальные формы, Клетки прикреплены к субстрату либо непосредственно, либо с помощью тонкой органической или состоящей из кремнеземлых игл оболочки. Часто встречаются стебельки. Клетки мелкие: СЬоапойайеИЫа (воротничковые жгутиконосцы). Ба(р)пйоеса (рис. 2а); Мопоща (рис.
2б). — Жгутико|юсды без воротничка, обычно с двумя жгутиками .. б Одиночные жгутикопосцы, живущие в тонких бокаловидных домиках из органического материала. Один из двух жгутиков торчит из домика и используется для подгоняния пищи. Другой жгутик направляется назад внутри домика и прикрепляет к нему клетку, Клетки способны внезапно сокращаться. Мелкие формы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
