Мембранные потенциалы

Мембранные потенциалы

Между различными участками живой клетки и окружающей средой могут существовать разности потенциалов. Некоторые из этих потенциалов схематически даны на рис.1.

Между водными фазами, разделяемыми мембранами, имеются разности потенциалов, называемые трансмембраннымиили же просто мембранными потенциалами. Клеточный мембранный потенциал определяют как разность потенциалов между внутриклеточным содержимым i и окружающей средой o.

Митохондриальный потенциал - это разность потенциалов между матриксом митохондрий x и внутриклеточной средой i. Таким образом,

где m - это клеточный мембранный потенциал, а mx - мембранный потенциал митохондрий.

Рекомендуемые материалы

Кроме трансмембранной разности потенциалов может существовать разность электрических потенциалов между липидной фазой мембраны и омывающим водным раствором - так называемый межфазный потенциал.

Если на поверхности мембраны имеются заряженные химические группы, например, остатки фосфорной кислоты, то возникает разность потенциалов между поверхностью мембраны и окружающей средой, так называемый поверхностный потенциал. Более подробно межфазные и поверхностные потенциалы будут рассмотрены позже, а сейчас мы рассмотрим, как повлияет на перенос ионов наличие на мембране трансмембранного потенциала.

На рис.2 дан схематически профиль электрического потенциала в однородной липидной мембране, окружённой раствором солей. Из-за высокой электропроводности солевых растворов вся разность потенциалов в системе падает на липидном слое мембраны, который представляет собой хороший электрический изолятор.

Внутри мембраны, если она однородна по своим свойствам, электрический потенциал падает линейно, как это изображено на рис.2. Это означает, что величина постоянна внутри мембраны. (Более подробно этот вопрос мы разберём в следующем разделе). По такому же линейному закону изменяется энергия иона, по мере его продвижения поперёк мембраны.

Эти рассуждения основаны, впрочем, на подходе к мембране, как к совершенно однородному телу. Однако липидная часть мембраны состоит всего-то из двух слоёв молекул фосфолипидов, причём размеры подвижных звеньев цепей жирных кислот в этих молекулах соизмеримы с размерами ионов, которые передвигаются внутри мембраны.
Это заставляет при рассмотрении переноса ионов в мембране отказаться от полностью макроскопического подхода к явлениям и рассматривать процессы на микроскопическом,т.е. на молекулярном уровне.

Изменение величины потенциальных барьеров для движения иона при наличии внешнего электрического поля

В отсутствие электрического поля в однородной мембране высота барьеров и глубина ям повсюду одинаковы, именно поэтому вероятность случайного перескока иона слева направо равна вероятности его перескока справа налево (см.разделы 3 и 4). Однако эта картина изменяется, если на мембрану наложено электрическое поле (см. рис.3).

Из электростатики известно, что наличие поля E_x, направленного вдоль оси X, означает изменение потенциала вдоль этой оси:

Это в свою очередь означает изменение энергии иона в зависимости от координаты той ямы или того барьера, где этот ион в данный момент находится. Если потенциал в каком-то месте равен , то это добавляет к энергии иона слагаемое, раное ze, где zе - электрический заряд иона, а е - элементарный заряд, т.е. заряд протона. Величина z - это безразмерный заряд иона.

Дополнительная энергия, сообщаемая иону при наличии внешнего электрического поля, изменяет энергетический профиль мембраны, как это показано на рис.3 и 4. Для положительных ионов (катионов) уровень всех барьеров и ям повышается в направлении роста потенциала.

Обозначим через разность потенциалов между ямой и соседним слева барьером. При одинаковых по всей мембране и симметричных ямах и барьерах разность потенциалов между каждым из барьеров и соседней слева ямой также будет равна .

Пусть энергия иона в потенциальной яме исходно была Е, а потенциал был равен нулю. При наличии потенциала в соседней яме энергия иона в ней будет выше на величину ze, где e - элементарный заряд, т.е. заряд протона, а z - безразмерный заряд иона (для K⁺ или Na⁺ z=1, для Cl^- z=-1, для Ca²⁺ z=2 и т).

Это значит, что если на мембрану наложено электрическое поле, такое что между соседними ямами создаётся разность потенциалов 2, то частота перескоков иона из ямы налево возрастает (для положительного иона) и становится равной:

а частота перескоков (положительного) иона направо уменьшается и становится равной:

(См. рис.5). Если даже количество ионов в ямах повсюду одинаково (т.е. суммарный диффузионный поток частиц будет нулевым), то из-за разной вероятности перескока каждого иона налево и направо в мембране будет заметно преимущественное перемещение катионов (поток ионов) справа налево. Такое движение ионов в электрическом поле называется электрофорезом(см. рис.6 в центре)

В более общем случае движение ионов по законам диффузии (в сторону меньшей концентрации) и вследствие электрофореза накладывается одно на другое и мы говорим об электродиффузии ионов (см. рис.6 внизу).

Рассмотрим ионные потоки при электродиффузии. Для этого, как мы это уже делали, поведём через мембрану плоскость S так, чтобы она прошла посредине между двумя соседними энергетическими ямами. Поток ионов слева направо будет равен числу ионов N₁ в объёме S слева от плоскости S, умноженному на частоту скачков направо (o/2) и умноженному на вероятность "успешного" скачка:

Аналогично, поток ионов справа налево будет равен:

где N₂ - число ионов в объёме S справа от плоскости S.
Число ионов N в каждом случае равно произведению концентрации ионов n частиц/м³ на объём S (т.е. N=nS).

Суммарный поток в направлении оси X очевидно равен:

а плотность потока равна:

Для упрощения этого и многих последующих уравнений стоит ввести величину безразмерного потенциала:

Кроме того вынесем за скобки величину . В целях упрощения записей используем величину безразмерной энергии:

Теперь уравнение 8 приобретает такой вид:

Однобарьерная модель ионного транспорта

Локальные концентрации ионов в микроучастках мембраны (n₁ и n₂) так же как и локальные измененения потенциала невозможно определить экспериментально, поэтому уравнение 11 пока может дать мало пользы.

Его дальнейшие преобразования имеют целью получить в правой части уравнения реальные опытные величины трансмембранного потенциала и концентраций ионов в водной фазе. Такие преобразования в теоретической биофизике проводятся при использовании тех или иных допущений о внутренней структуре мембран. Мы рассмотрим здесь два крайние случая:

1. Имеется один барьер для ионов в центре мембраны (однобарьерная модель ионного транспорта).

2. Число барьеров в мембране очень велико, и в отсутствие поля все они одинаковы по величине (многобарьерная модель). Рассмотрим однобарьерную модель. Ионы в яме слева от мембраны находятся в липидной фазе и распределяются между этой фазой и соседней водной фазой. Мв можем поэтому выразить концентрации ионов в "ямах" C_m1=n₁ и C_m2=n₂ через их концентрации в водной фазе C₁ и C₂, используя величину коэффициента распределения

3.

4. Заменим выражение на коэффициент диффуззии D (сравни уравнение 6 в разделе 4). Получаем:

5. В нашем случае величина (перемещение иона вдоль оси Х при каждом "скачке") равна толщине мембраны l. Это позволяет заменить величину ,DK в уравнении 15 на коэффициент проницаемости P=DK/l. Окончательное уравнение потока при однобарьерной модели переноса иона выглядит теперь таким образом:

6. При однобарьерной модели мембранного транспорта величина трансмембраннного потенциала m равна разности потенциалов между двумя соседними "ямами"; таким образом, в уравнении (15) y = (y_m/2), где y_m - (транс)мембранный потенциал в безразмерной форме.

Электродиффузия иона в однородной среде

Теперь рассмотрим многобарьерную модель ионного транспорта. Вернёмся к уравнению 11

Если исходить из переноса иона внутри мембраны по механизму кинков, то проще всего предположить, что мембрана однородна и ион при движении преодолевает множество одинаковых ям, разделенных барьерами одинаковой высоты. При этом разность потенциалов между соседними ямами невелика; это позволяет заменить величины e^-z и e^+z приближенными значениями 1-z и 1+z.

Уравнение 11 приобретает такой вид:

После небольшой перегруппировки получаем:

При малых величинах можно считать, что

Аналогично, разность потенциалов между соседними барьерами 2 (как и между соседними ямами), расстояние между которыми, как мы помним, равно , связана с градиентом потенциала вдоль оси Х очевидным соотношением:

Кроме того, полезно ввести понятие средней концентрации иона в области данной ямы:

Подставив эти величины в уравнение 18, получаем:

Подставим в полученное уравнение коэффициент диффузии (см. уравнение 6 в разделе 4):

Мы вывели важнейшее уравнение, которое будем называть основным уравнением электродиффузии.

Нужно подчеркнуть, что уравнение электродиффузии, хотя и было выведено для конкретного случая-движения ионов в липидной фазе мембран, но относится к любой сплошной среде, включая и водные растворы. Так что обычно его пишут без индекса при концентрации (т.е. пишут C, а не C_m).

Диффузия и элетрофорез

Очень интересно проанализировать уравнение 22 в двух частных случаях:

Случай 1. Частицы незаряжены (нейтральные молекулы) или в мембране не существует электрического поля (отсутствует трансмембранная разность потенциалов). В этом случае равны нулю либо заряд z, либо градиент потенциала , либо обе эти величины. Во всех вариантах второе слагаемое в скобках равно нулю и мы получаем уже известный нам закон Фика для диффузии молекул в сплошной среде:

Случай 2. Внутри мембраны нет градиента концентрации ионов (это обычно означает, что по сторонам мембраны концентрации ионов в водной фазе равны). В этом случае равно нулю первое слагаемое в скобках в уравнении 25 и поток ионов равен:

где E_x - напряженность электрического поля в направлении X. Произведение поля на заряд равен силе F, действующей на частицу, т.е. F=zeE_x.

Таким образом, между электрическоой силой, действующей на каждую частицу, и плотностью потока частиц, движущихся под действием этой силы, существут прямая пропорциональность:

где коэффициент пропорциональности u=(D/kT) носит название электрофоретической подвижности иона. Нетрудно видеть, что подвижность иона пропорциональна коэффициенту диффузии.

Электродиффузия как сумма диффузии и электрофореза

Введение величины электрофоретической подвижности позволяет несколько упростить выражения в уравнении электрофореза (24):

а вместе с тем изменить форму написания основного электродиффузионного уравнения (22):

Это уравнение известно под названием уравнения Нернста-Планка. Сравнение этого уравнения с уравнением Фика для диффузии (23) и уравнением электрофореза (26) показывает, что суммарный поток в случае электродиффузии складывается алгебраически из диффузионного и электрофоретического потоков; иными словами, диффузионное и электрофоретическое движение ионов происходят независимо друг от друга.

Скорость перемещения ионов в электрическом поле

Между плотностью потока ионов, движущихся под действием элетрического поля, и скоростью движения каждой частицы существует очень простая зависимость. Чтобы её получить, обратимся к рис.7.

Предположим через некую плоскость S ионы движутся в направлении X под действием электрического поля. За одну секунду каждый ион проходит расстояние 1v, м, где v - скорость перемещения иона, м/с. Отложив это расстояние влево от плоскости S, мы получим объём 1vS, в котором содержится 1vSn частиц, или 1vSС киломолей вещества. Это количество вещества и переносится за секунду через плоскость S. Таким образом поток равен:

а плотность потока равна произведению скорости перемещения частиц на их молярную концентрацию:

Cвязь между потоком ионов и элетрическим током в среде

Поскольку каждый ион несёт заряд равный ze, то между плотностью потока J, частицы с^-1 м^-2,и плотностью электрического тока j, А м^-2, существует простая связь:

При равномерной концентрации иона в среде (т.е. при нулевом градиенте концентрации) уравнение для плотности тока может быть получено из уравнений 26 и 30:

Это уравнение полезно сопоставить с известным из физики законом Ома для сплошных сред:

Информация в лекции "3 Технология беспроводных сетей" поможет Вам.

где s, Ом^-1, - удельная электропроводность среды. Таким образом, использованная выше теория случайных блужданий с учётом изменения энергетического профиля в электрическом поле позволяет не только вывести закон Ома, но и раскрывает содержание удельной электропроводности, если она обусловлена переносом одного иона:

Если в среде, будь то липидный слой мембран или водные растворы, имеется несколько ионов, то общая электропроводность будет суммой вкладов всех ионов: