Автореферат (Сравнительная оценка гемостатической активности нового соединения на основе фибрин-мономера и его композиций при системном и локальном применении (экспериментальное исследование)), страница 4

Животным второй группы было введено соединение наоснове фибрин-мономера в дозе 250 мкг/кг массы тела, а через 30 минут внутривенно болюсновводили 0,9 % раствор хлорида натрия в объёме равном объёму 7,00 % кровопотери от ОЦК.15Таблица №5Изменение гемостатической активности по времени остановки кровотечения и по объёмукровопотери после внутривенного введения соединения на основе фибрин-мономера у кроликов вусловиях кровопотери 7,00–20,00 % от ОЦК при болюсном введении физиологическогораствора, (Х±m)Время, минутКонтрольЧерез 30 минутЧерез 60 минутЧерез 120минутКролик 1019,4459,72ГАt, %Кролик 2022,5843,55Кролик 3021,5750,98Кролик 1022,4086,11—24,1945,10—ГАv, %Кролик 20-2,78-5,7066,39Кролик 3045,1878,8879,98При внутривенном введении соединения на основе фибрин-мономера и болюсномвведении 0,9 % раствора хлорида натрия была снижена летальность кроликов от кровопотери вэксперименте.Сравнительная оценка местной гемостатической активности порошков фибринмономера и тромбина при их аппликации на экспериментальную рану печениДля сравнительной оценки местной гемостатической активности порошков фибринмономера и тромбина была определена гемостатическая активность по времени остановкикровотечения и по объёму кровопотери в остром эксперименте на интактных кроликах.

Былисследован: порошок фибрин-мономера в дозах 25 мг, 50 мг, 100 мг. Проведена сравнительнаяоценка порошка фибрин-мономера в дозе 25 мг и порошка тромбина в дозе 25 мг (375 ед. NIH).На основании результатов исследования можно отметить, что порошок фибрин-мономераи порошок тромбина во всех исследуемых дозах смывался потоком крови и не успевал оказатькровоостанавливающего действия.

В то же время, прижатие порошков марлевым тампономприводило к выраженному снижению времени остановки кровотечения и объёма кровопотери.Гемостатические свойства порошка фибрин-мономера в дозе 25 мг и 100 мг были ярко выражены.Показатели гемостатической активности по времени остановки кровотечения составляли72,25±3,03 и 73,87±1,61 % соответственно, а показатели гемостатической активности по объёмукровопотери — 88,98±0,29 и 83,28±8,35 % соответственно. Гемостатическая активность повремени остановки кровотечения и объёму кровопотери порошка тромбина с прижатиеммарлевым тампоном составляла 72,92±3,61 и 88,37±6,58 % соответственно.

Приведённыерезультаты достоверно показывают, что порошок фибрин-мономера не уступает по своейгемостатической активности порошку тромбина.16Сравнительная оценка местной гемостатической активности комбинации порошкафибрин-мономера с альгинатом натрия и комбинации порошка тромбина с альгинатомнатрия при их аппликации на экспериментальную рану печениДля сравнительной оценки местной гемостатической активностипорошка фибрин-мономера в комбинации с альгинатом натрия в соотношениях 25:75; 50:50; 75:25 (суммарнаямасса образца была равна 100 мг) и порошка тромбина в комбинации с альгинатом натрия ваналогичных соотношениях (суммарная масса образца была равна 100 мг) была определенагемостатическая активность по времени остановки кровотечения и объёму кровопотери в остромэксперименте на интактных кроликах.Таблица №6Сравнительная оценка местной гемостатической активности комбинации порошка фибринмономера с альгинатом натрия и комбинации порошка тромбина с альгинатом натрия при ихаппликации на экспериментальную рану печени, (X+m)Описание образцаКонтроль (марлевыйтампон)n=5Порошок фибринмономер+альгинатнатрия с прижатиеммарлевым тампономn=5Порошок фибринмономер+альгинатнатрия с прижатиеммарлевым тампономn=5Порошок фибринмономер+альгинатнатрия с прижатиеммарлевым тампономn=5Порошоктромбин+альгинатнатрия с прижатиеммарлевым тампономn=5Порошоктромбин+альгинатнатрия с прижатиеммарлевым тампономn=5Соотношение, мгГАV, %ГАt, %—0025:7540,81±12,37*51,71±17,65*50:5074,07±7,07*76,17±3,09*75:2548,52±9,91*40,69±5,11*25:7583,38±7,54*65,12±12,62*50:5062,19±22,51*64,80±13,90*17Описание образцаСоотношение, мгГАV, %ГАt, %Порошоктромбин+альгинатнатрия с прижатием75:2561,16±33,74*67,46±8,33*марлевым тампономn=5* — статистически достоверное различие между данными по отношению к контролюпри р < 0,05.Сравнительная оценка гемостатической активности показала, что порошок фибринмономера в комбинации с альгинатом натрия и порошок тромбина с альгинатом натрия имеютвысокие показатели гемостатической активности во всех соотношениях.

Лучший результатпоказал порошок фибрин-мономера в комбинации с альгинатом натрия в соотношении 50:50.Сравнительная оценка местной гемостатической активности образцов губок сфибрин-мономером при их аппликации на экспериментальную рану печениСложность нанесения веществ в форме порошка на раневую поверхность большихразмеров,смываемостьнаносимогопорошкакровотечениемизэпицентрараны,неравномерность нанесения веществ на рану привели нас к поиску лекарственной формы,которая будет более эффективной и удобной.Совместно с опытно-производственным отделом глубокой переработки плазмы ФГБУ«НМИЦ гематологии» Минздрава России (зав. отделением Голубев Е.

М.) была созданагемостатическая губка, содержащая в качестве основы альгинат натрия, а в качестве активноговещества — порошок фибрин-мономера (патент RU № 2627855).Для сравнительной оценки гемостатической эффективности образцов губок сдобавлением порошка фибрин-мономера и образцов без его добавления были исследованы губкина основе альгината натрия с концентрацией 1 % с добавлением в неё порошка фибрин-мономерав дозах 25, 50 и 100 мг. Контролем служила губка на основе 1 % альгината натрия.Таблица №7Зависимость гемостатической активности образцов губок от дозы порошка фибринмономера в сравнении с контрольным образцом, не содержащим порошок фибрин-мономера,(X+m)Доза фибрин-мономерав образце, мгКонтрольn=525n=550n=5ГАV, %ГАt, %21,56±3,90*17,78±1,96*75,87±8,46*58,94±4,20*70,97±7,05*46,06±2,41*18Доза фибрин-мономераГАV, %ГАt, %в образце, мг10077,11±8,31*25,28±3,56*n=5* — статистически достоверное различие между данными по отношению к контролюпри р < 0,05.Анализируя полученные результаты, можно заключить, что лучшим гемостатическимэффектом обладала композиция альгинатной губки с добавлением в неё порошка фибринмономера в дозе 25 мг.

При местной аппликации этого образца на раневую поверхность печениобъём кровопотери снижался почти в 3,6 раза, а время остановки кровотечения уменьшилось в3,3 раз по отношению к контрольному образцу подобного состава, но без добавления порошкафибрин-мономера.Сравнительная оценка местной гемостатической активности губок на основеальгината натрия с добавлением порошка фибрин-мономера и губок на основе альгинатанатрия с добавлением порошка тромбина при аппликации их на экспериментальную ранупечениДля сравнительной оценки местной гемостатической активности были взяты губки наоснове 1 % раствора альгината натрия с добавлением порошка фибрин-мономера в дозе 25 мг игубки на основе 1 % раствора альгината натрия с добавлением порошка тромбина в дозе 25 мг(375 ед.

NIH).Таблица №8Сравнительная оценка местной гемостатической активности губок на основе альгинатанатрия с добавлением порошка фибрин-мономера и губок на основе альгината натрия сдобавлением порошка тромбина при их аппликации на экспериментальную рану печени,(X+m)ОбразецГАV, %ГАt, %Фибрин-мономер,25 мг78,58±10,8558,94±4,19n=5Тромбин, 25 мг(375 ед. NIH)90,81±6,0167,58±5,66n=5* — статистически достоверное различие между данными при р < 0,05.Сравнительная оценка результатов данного этапа исследования показала, что губки наоснове альгината натрия с добавлением порошка фибрин-мономера не уступают по своимгемостатическим свойствам губкам на основе альгината натрия с добавлением порошкатромбина.

Различия между этими образцами статистически незначимы.19Измерение показателей сосудисто-тромбоцитарного гемостаза при аппликациипорошка фибрин-мономера в эксперименте на интактных кроликахСледующим направлением работы было проведение экспериментов на кроликах пооценке влияния порошка фибрин-мономера на сосудисто-тромбоцитарный гемостаз. Показателисосудисто-тромбоцитарного гемостаза изучались у интактного кролика до нанесения порошкафибрин-мономера и через 60 минут после нанесения на кровоточащую рану образца в дозе 25 мг.Таблица №9Измерение показателей свёртывающей системы крови при аппликации порошкафибрин-мономера в эксперименте на интактных кроликах, (X+m)ПоказателиКонтрольЧерез 60 мин после нанесениясвертываемости кровиАПТВ, с11,581,6211,801,42n=5Тромбиновое время, с14,961,1115,181,54n=5Протромбиновое время,с6,250,596,130,46n=5Фибриноген, мг/л3,440,243,520,43n=5Агрегация тромбоцитов,%41,334,93*33,500,71*n=5* — статистически достоверное различие между данными при р < 0,05.Результаты исследования показали, что АПТВ, тромбиновое время, протромбиновоевремя и концентрация фибриногена до разреза и через 60 минут после нанесения образца неподвергались достоверным изменениям.

Было выявлено достоверное снижение агрегационнойспособности тромбоцитов на 7,83 % по отношению к контролю через 60 минут после нанесенияобразца.20ВЫВОДЫ1. В результате сравнительного анализа гемостатической активности соединения наоснове фибрин-мономера при его внутривенном введении в дозах 100, 250, 500, 1000, 2500 и 5000мкг/кг, а также с учетом показателей концентрации D-димеров в плазме крови установлена егооднократная терапевтическая доза — 250 мкг/кг. Применение в качестве системного гемостатикасоединения на основе фибрин-мономера в дозе 250 мкг/кг позволило усилить гемостатическуюактивность по времени остановки кровотечения через 30, 60 и 120 минут наблюдения в 4,0; 2,9 и3,6 раз, гемостатическую активность по объёму кровопотери в 6,4; 1,9 и 1,5 раз по отношению кконтролю соответственно.2.