Автореферат (Сравнительная оценка гемостатической активности нового соединения на основе фибрин-мономера и его композиций при системном и локальном применении (экспериментальное исследование))

На правах рукописиЛЕМПЕРТ АСАФ РУДОЛЬФОВИЧСРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЕМОСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВОГОСОЕДИНЕНИЯ НА ОСНОВЕ ФИБРИН-МОНОМЕРА И ЕГО КОМПОЗИЦИЙ ПРИСИСТЕМНОМ И ЛОКАЛЬНОМ ПРИМЕНЕНИИ(ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)14.03.06 – ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ(медицинские науки)АВТОРЕФЕРАТДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЁНОЙ СТЕПЕНИКАНДИДАТА МЕДИЦИНСКИХ НАУКМосква – 2019Работавыполнена«НациональныйвмедицинскийФедеральномгосударственномисследовательскийцентрбюджетномгематологии»учрежденииМинистерстваздравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России).Научный руководитель:Доктор медицинских наук Белозерская Галина ГеннадьевнаНаучный консультант:Доктор медицинских наук, профессор Момот Андрей ПавловичОфициальные оппоненты:Медушева Елена Олеговна — доктор медицинских наук,Общество с ограниченной ответственностью «КОЛЕТЕКС», заместитель Генеральногодиректора по инновациям.Ройтман Евгений Витальевич — доктор биологических наук,Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования«РоссийскийнациональныйисследовательскиймедицинскийуниверситетимениН.

И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, кафедра онкологии,гематологии и лучевой терапии педиатрического факультета, профессор кафедры.Ведущая организация:Федеральноегосударственноебюджетноеучреждение«Национальныймедицинскийисследовательский центр сердечно-сосудистой хирургии имени А. Н. Бакулева» Министерстваздравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ ССХ им. А.Н. Бакулева» МинздраваРоссии).Защита состоится «___» ______________ 2020 года в 10.00 часов на заседании диссертационногосовета Д 208.041.01, созданного на базе ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова МинздраваРоссии по адресу по адресу: 127473, г. Москва, ул.

Делегатская, д. 20 стр. 1.С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. ЕвдокимоваМинздрава России (127206, г. Москва, ул. Вучетича, д. 10а) и на сайте http://dissov.msmsu.ru/Автореферат разослан «___» ______________2020 годаУченый секретарь диссертационного советадоктор медицинских наук, профессорЛобанова Елена Георгиевна2ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследованияЭффективность остановки кровотечения остается одной из важнейших проблем вразличныхобластяхмедикаментозноклиническойобусловленнымимедицины,посколькукоагулопатияминарастетфонечислопациентовдлительногосприёмаантикоагулянтов, нестероидных противовоспалительных и других лекарственных средств. Сособой остротой проблема гемостаза стоит в хирургии паренхиматозных органов, что связано сособенностями их анатомического строения, увеличением частоты повреждений и количестваоперативных вмешательств на этих органах (Маслаков В.

В., 2012). У пострадавших с тяжёлымисочетанными травмами острая массивная кровопотеря обусловливает более половины всехлетальных исходов в первые сутки, даже при оказании медицинской помощи в условияхстационара (Khoshmohabat H. et al., 2016). Вероятность сохранения жизни и благоприятногоисхода лечения при ранениях и травмах напрямую зависит от сроков оказания медицинскойпомощи, в случае продолжающегося кровотечения — как можно более раннего и полноценногогемостаза, пусть даже временного (Жаворонок И. С., 2017).

В связи с этим, разработка ивнедрение новых средств гемостаза является одной из приоритетных задач, стоящих передмедицинской наукой. Целесообразность проведения данного исследования иллюстрируетсябольшим интересом к данной проблеме врачей разного профиля (гематологов, хирургов,акушеров-гинекологов, неврологов и др.), проявляющимся в многочисленных публикациях,посвященных проблеме острой кровопотери, возможностях и различных методик её коррекции.Все это свидетельствует как о крайней актуальности темы, так и об отсутствии единого мненияо путях её решения.

Отметим, что известные в настоящее время гемостатические препаратысистемного действия реализуют свои эффекты через усиление образования тромбина —ключевого фермента свёртывания крови, ответственного, по классическим представлениям, запревращение фибриногена плазмы крови в сгусток фибрина, но избыточное образованиетромбина может стать причиной нежелательных событий в виде тромботических осложнений(Kattula S.

et al., 2017). В связи с этим перспективным видится дальнейший поискгемостатическихсредств,отличительнойособенностьюкоторыхявляетсяотсутствиетромбогенного эффекта вне зоны кровотечения, что и обусловило важность проводимыхисследований.3Цель исследованияПровести экспериментальную оценку гемостатической активности нового отечественногосоединения на основе фибрин-мономера и его композиций при системном и локальномприменении.Задачи исследования1.Провести сравнительную оценку гемостатической активности соединения на основефибрин-мономера в условиях экспериментальной геморрагии на интактных кроликах привнутривенном введении в различных дозах.

Определить оптимальную дозу.2.Изучить гемостатическую активность соединения на основе фибрин-мономера вкомбинации с ε-аминокапроновой кислотой при их совместном внутривенном введении.3.Провести сравнительную оценку гемостатической активности соединения на основефибрин-мономера и препарата эптаког альфа активированный при внутривенном введении.4.Исследовать гемостатическую активность соединения на основе фибрин-мономера вусловиях экспериментальной геморрагии на кроликах с кровопотерей различной степенитяжести при внутривенном введении.5.Провести сравнительную оценку локальной гемостатической активности фибрин-мономера в форме порошка и губки при его аппликации на экспериментальную рану печеникролика.6.Провести исследование по оценке влияния фибрин-мономера в форме порошка на базовыепараметры коагулограммы.Научная новизна1.

Впервые проведена оценка гемостатической активности нового отечественногосоединения на основе фибрин-мономера в различных дозах в эксперименте на кроликах.Установлена однократная терапевтическая доза (250 мкг/кг).2. Одновременное введение соединения на основе фибрин-мономера с ε-аминокапроновойкислотой приводило к снижению гемостатической активности в отличие от применениясоединения на основе фибрин-мономера в виде монотерапии.3. В эксперименте на кроликах определена гемостатическая активность однократныхтерапевтических доз отечественного соединения на основе фибрин-мономера (250 мкг/кг) всравнении с препаратом эптаког альфа активированный (90 мкг/кг).4. Выявлена высокая системная гемостатическая активность соединения на основе фибринмономера в условиях экспериментальной кровопотери 5–7 % от ОЦК.45.

В условиях моделирования экспериментальных ран печени проведена оценка местнойгемостатической активности фибрин-мономера в различных комбинациях и лекарственныхформах.Практическая значимость1. Гемостатический эффект при внутривенном введении соединения на основе фибринмономера сопоставим с гемостатическим эффектом при применении препарата эптаког альфаактивированный, что предполагает дальнейшие доклинические и клинические испытания новогосоединения.2. Порошокфибрин-мономераможетбытьиспользовандляразработкиновыхгемостатических композиций локального применения, предназначенных для остановкипаренхиматозных кровотечений (Патент RU № 2618896, Патент RU № 2627855, Патент RU№ 2660582).Внедрение результатов исследованияРезультаты проведенных исследований внедрены в научно-исследовательскую работулаборатории патологии и фармакологии гемостаза ФГБУ «НМИЦ гематологии» МинздраваРоссии, а также включены в научно-исследовательскую деятельность ООО Фирма «Технологиястандарт».Положения, выносимые на защиту:1.

Внутривенное введение соединения на основе фибрин-мономера в дозе 250 мкг/кгинтактным кроликам усиливает гемостатическую активность по времени остановкикровотечения и объёму кровопотери в условиях экспериментальной геморрагии.2. Комбинированное системное применение соединения на основе фибрин-мономера в дозе250 мкг/кг и ε-аминокапроновой кислоты в дозе 0,75 мл/кг приводило к снижениюгемостатической активности в отличие от применения соединения на основе фибринмономера в виде монотерапии.3. Гемостатическая активность при системном применении соединения на основе фибринмономера в дозе 250 мкг/кг при дозированной травме печени в эксперименте достоверновыше по сравнению с применением препарата эптаког альфа активированный в дозе90 мкг/кг.4.

Внутривенное введение соединения на основе фибрин-мономера в дозе 250 мкг/кг вусловиях экспериментальной кровопотери 5,00–7,00 % от ОЦК приводило к увеличениюгемостатической активности по времени остановки кровотечения и объёму кровопотери вусловиях экспериментальной геморрагии.55. Локальная аппликация порошка фибрин-мономера и его комбинаций в формах порошкаи губки показала их высокую гемостатическую активность в условиях моделированияэкспериментальных ран печени.6.

При аппликации порошка фибрин-мономера на раневую поверхность кролика не быловыявленопатологическогосистемноговоздействиянапоказателисосудисто-тромбоцитарного гемостаза.Степень достоверностиСтепень достоверности проведенного диссертационного исследования подтвержденадостаточнымчисломнаблюдений,рациональнымформированиемгруппсравнения,соблюдением критериев включения/исключения из исследования. Использованные методыстатистической обработки соответствуют современным требованиям.

Научные выводы ипрактические рекомендации основаны на достоверных результатах, представленных в таблицах.Апробация результатов исследованияАпробация диссертации проведена на объединённом заседании проблемных комиссий«Клинические исследования в гематологии (гемобластозы, депрессии кроветворения; ТКМ;миело- и лимфопролиферативные заболевания; опухоли лимфатической системы; патологиякрасной крови; ИТП; порфирий), трансфузиологии, патологии гемостаза, хирургическойгематологии, анестезиологии и интенсивной терапии»; «Фундаментальные исследования вгематологии,биотехнология,трансплантологии,трансфузиологии:иммуногематология;биохимия;Гемопоэз,биофизика»имолекулярнаябиология,«Проблемыдонорства,производства и контроля качества компонентов и препаратов крови, разработки средстввоздействия на систему крови» (протокол № 6 от 28.11.2018).Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: международной научнопрактической конференции «Актуальные проблемы медицины в России и за рубежом»(Новосибирск, 2016); V съезде фармакологов России «Научные основы поиска и создания новыхлекарств» (Ярославль 2018); XXV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство»(Москва, 2018).ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, в том числе 3 статьи в журналах,рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и наукиРоссийской Федерации, получено 3 патента на изобретение.Личный вклад автораАвтор участвовал в разработке дизайна исследования, принимал участие в острыхэкспериментах на животных, выполнял лабораторные исследования, непосредственно проводил6систематизацию и обработку полученных результатов, участвовал в подготовке статей ипатентов к публикации.Объем и структура работыДиссертационная работа изложена на 124 страницах компьютерного текста.