Автореферат (Нарушение гипоталамической регуляции репродуктивных циклов при воздействии неблагоприятных экологических факторов), страница 9

Н-тест Крускала-Уоллиса подтвердилзависимость содержания нитритов от временного показателя (p<0,05). Пероральное введение33L-метионина приводило к достоверному (p<0,05) снижению содержания нитритов в вечернеевремя с нарушением их нормальной суточной динамики.1610*14мкмоль/лмкмоль/л*8121086462402контроль0контрольL-метионин5 ч ЦВL-метионин9:30 ч ЦВ11 ч ЦВ* – различие с показателем в контрольнойгруппе достоверно (p<0,01; U-тест)* – различие с показателями в 5 ч и 9:30 ч циркадианноговремени в той же группе достоверно (p<0,05; U-тест)Рисунок 18 – Влияние хроническоговоздействия L-метионинана содержание малоновогодиальдегида в сыворотке кровисамок крыс на стадии проэструса(M±m, n=36-46)Рисунок 19 – Влияние хроническоговоздействия L-метионина на cодержание нитритовв сыворотке крови самок крыс на стадиипроэструса(M±m, n=10-13)Снижение уровня нитритов может быть обусловлено усилением взаимодействияс супероксидным радикалом и косвенно свидетельствовать об интенсификации процессаобразования пероксинитрита в этих условиях.Коррекция с помощью мелатонина и пептидных биорегуляторов нарушениякатехоламинергической регуляции эстральных циклов, вызванного нейротоксическимвоздействием (1,2-диметилгидразин, метиониновая нагрузка)Последующие эксперименты показали, что при введении 1,2-диметилгидразина на фонеинъекций мелатонина, эпиталамина и эпиталона наблюдается реакция гипоталамическихструктур, ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина, проявляющаяся в изменениисодержания в них катехоламинов (таблица.

5). Так, среднесуточное содержание норадреналинав МПО гипоталамуса в группе животных, получавших 1,2-диметилгидразин на фоне введениямелатонина, достоверно не отличалось от соответствующего контрольного значения, то естьот среднесуточного содержания нейромедиатора в группе животных, получавших толькомелатонин. У животных же, получивших инъекцию 1,2-диметилгидразина на фоне введенияэпиталамина, отмечалось достоверное (р<0,01) увеличение на 17,9% уровня норадреналинапо сравнению с группой животных, получавших только эпиталамин.

При введении1,2-диметилгидразина на фоне инъекций эпиталона была отмечена лишь тенденцияк повышению среднесуточного содержания этого нейромедиатора.Анализ полученных данных по среднесуточному содержанию дофамина в МПОТаблица 5 – Среднесуточное содержание норадреналина и дофамина в медиальной преоптической области и срединном возвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса самок крыс на стадии проэструса после однократного введения 1,2-диметилгидразинана фоне введения физиологического раствора, мелатонина, эпиталамина и эпиталона (M±m, нг/мг белка; n=28-40)Показательфиз. р-рмелатонинэпиталаминэпиталонфиз.

р-рмелатонинэпиталаминэпиталон+ ДМГ+ ДМГ+ ДМГ+ ДМГНА в МПО21,8±0,819,1±0,9*21,6±1,221,5±1,217,8±0,821,0±0,7*17,7±0,919,1±1,1ДА в МПО5,1±0,53,9±0,35,0±0,68,2±1,1*3,4±0,47,9±0,8**4,2±0,67,5±1,1*НА в СВ-Арк24,3±1,424,6±1,222,8±1,324,2±1,725,2±1,524,9±1,121,0±1,530,7±1,7**ДА в СВ-Арк7,3±0,613,7±0,8**10,8±0,68,6±0,4*12,0±0,912,8±1,39,2±0,515,8±0,9**Примечание: *, ** – различия между показателями в группе животных, получивших инъекцию 1,2-диметилгидразина на фоне введения физиологическогораствора или дополнительного соединения (мелатонин, эпиталамин, эпиталон), и в соответствующей контрольной группе достоверны (*p<0,01; **p<0,001;U-тест).гипоталамуса позволил установить, что однократное введение 1,2-диметилгидразинапри фоновом введении всех трех исследованных соединений достоверно (р<0,01; р<0,001)повышает уровень дофамина на 64,7% (мелатонин), 131,9% (эпиталамин) и 76,7% (эпиталон).В СВ-Арк гипоталамуса достоверное (р<0,001) увеличение среднесуточного содержаниянорадреналина (на 46,4%) наблюдалось только при введении 1,2-диметилгидразина на фонечетырехдневного курса введения эпиталона.

Анализ данных о среднесуточном содержаниидофамина в СВ-Арк гипоталамуса показал, что его уровень значительно (на 71,3%) возрасталпри введении ксенобиотика на фоне введения эпиталона, тогда как при сочетанном введении1,2-диметилгидразина и эпиталамина изменения были недостоверными, а на фоне введениямелатонина наблюдалось даже достоверное (р<0,01) снижение среднесуточного содержаниянейромедиатора на 19,8%.В группе животных, которые получали курс введения гормона пинеальной железымелатонина, наблюдалась нормальная суточная динамика содержания норадреналина в МПОгипоталамуса, характерная для контрольных животных (таблица 6). Установлено,что при введении 1,2-диметилгидразина на фоне инъекций мелатонина нормальные суточныеизменения содержания норадреналина в МПО гипоталамуса сохранялись, при этомнаблюдалось достоверное (р<0,05) снижение уровня данного нейромедиатора во временноминтервале с 9:30 ч до 11 ч ЦВ; подобный же положительный эффект отмечалсяи при сочетанном введении 1,2-диметилгидразина и эпиталамина, который в МПО гипоталамусаоказался более эффективным по сравнению с эпиталоном.Таблица 6 – Суточная динамика содержания норадреналина в медиальной преоптическойобласти гипоталамуса самок крыс на стадии проэструса после однократного введения1,2-диметилгидразина на фоне введения физиологического раствора, мелатонина,эпиталамина и эпиталона (M±m, нг/мг белка; n=6-16)Циркадианноевремя, чфиз.

р-рфиз. р-р+ ДМГмелатонинмелатонин эпиталамин эпиталон+ ДМГ+ ДМГ+ ДМГ520,3±1,418,7±1,219,1±1,8**19,1±1,9*20,3±1,221,1±2,49:3024,3±1,518,4±2,125,8±1,724,6±2,023,4±1,017,2±1,11120,9±0,9*20,3±1,620,0±1,4*18,7±1,9*19,5±1,1*19,2±1,8Примечание: *, ** – различия с показателем в 9:30 ч циркадианного времени в той же группе достоверны(*p<0,05; ** p<0,01; U-тест).При сочетанном введении 1,2-диметилгидразина и мелатонина была обнаружена суточнаядинамика содержания дофамина в СВ-Арк гипоталамуса, сходная с ритмом уровнянейромедиатора, наблюдаемым в контрольной группе, а также в группе животных, получавшихтолько инъекции мелатонина (достоверное повышение уровня нейромедиатора в дневныеи вечерние часы по сравнению с его уровнем в утренней временной точке) (таблица 7).Кроме того, в СВ-Арк гипоталамуса достаточно эффективным оказался эпиталон, которыйпредотвращал нарушение суточной динамики содержания дофамина, вызываемое воздействием36ксенобиотика, сохраняя при этом низкий уровень катехоламина в 5 ч ЦВ с достоверным (р<0,05)повышением его содержания к 9:30 ч и 11 ч ЦВ.Таблица 7 – Суточная динамика содержания дофамина в срединном возвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса самок крыс на стадии проэструса после однократноговведения 1,2-диметилгидразина на фоне введения физиологического раствора,мелатонина, эпиталамина и эпиталона (M±m, нг/мг белка; n=8-13)Циркадианноевремя, чфиз.

р-рфиз. р-р+ ДМГмелатонинмелатонин эпиталамин эпиталон+ ДМГ+ ДМГ+ ДМГ55,2±0,413,8±1,17,7±0,59:308,4±0,8**13,2±1,512,3±0,8** 9,5±0,4***118,2±1,1*14,0±1,66,5±0,416,4±2,312,4±0,613,0±2,516,5±1,3*11,5±1,0* 10,0±0,2*** 8,2±0,9**17,7±2,0*Примечание: *, **, *** – различия с показателем в 5 ч циркадианного времени в той же группедостоверны (*p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; U-тест).То, что суточные ритмы содержания норадреналина в МПО и дофамина в СВ-Аркгипоталамуса претерпевают изменения под действием 1,2-диметилгидразина, указываетна нарушение связи между циркадианной системой организма и гипоталамическим звеномрегуляции эстральных циклов, так как установлено, что суточная динамика содержаниянорадреналина в МПО и дофамина в СВ-Арк связана с работой центрального осцилляторациркадианных ритмов, СХЯ гипоталамуса [Sellix M.T. et al., 2004], и, вероятнее всего, участвуетв реализации «циркадианного сигнала» запуска пика секреции гонадолиберина на стадиипроэструса.

Также велика вероятность того, что суточный ритм содержания дофамина в СВ-Аркгипоталамуса зависит от изменений в течение суток уровня мелатонина в крови, однойиз мишеней прямого действия которого является собственно СВ гипоталамуса [Коркушко О.В.,Хавинсон В.Х., Шатило В.Б., 2006]. Таким образом, можно предположить,что восстанавливающий нарушенные под воздействием ксенобиотика суточные изменениясодержания нейромедиаторов эффект мелатонина и пептидных препаратов реализуется черезспособность этих соединений предотвращать нарушение процессов передачи информациио суточном периодизме от СХЯ гипоталамуса к нейромедиаторным системам МПО и СВгипоталамуса, участвующим в регуляции эстральных циклов.

Однако достаточно сложно судитьо механизмах, вызывающих этот эффект, поскольку сначала необходимо проанализироватьвозможные механизмы, посредством которых однократное введение экспериментальнымживотным 1,2-диметилгидразина приводит к нарушению суточных ритмов содержаниянорадреналина в МПО и дофамина в СВ-Арк гипоталамуса.Последующие эксперименты показали, что введение пинеалона, но не мелатонина на фонеметиониновой нагрузки восстанавливает нарушенный суточный ритм содержаниянорадреналина в МПО гипоталамуса. Так, уровень нейромедиатора в опытной группедостоверно (p<0,05) повышался и затем резко снижался во второй половине дня проэструса(рисунок 20).