Диссертация (Молекулярно-генетические аспекты развития гестоза у женщин северо-западного региона Hоссии), страница 7

Продуктом гена является фактор свертывания крови V (F5) гликопротеин, который циркулирует в плазме крови в неактивной форме. Активация F5происходит за счет его расщепления тромбином с образованием F5а, который в свою очередьявляется кофактором в реакции превращения протромбина в тромбин с помощью фактора F10а.F5а инактивируется в присутствии активированного протеина С (АПС) [Зайнуллин и др., 2007].В гене F5 обнаружено несколько функционально значимых изменений в нуклеотиднойпоследовательности [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]. Хорошо изученной является мутация Лейден(F5 1691G>A, rs6025) (рисунок 2).

Замена G на A приводит к аминокислотной замене аргининана глутамин в положении 506 (Arg506Gln) в сайте связывания белка F5a с протеином С, в связис чем F5a приобретает устойчивость к инактивации (АПС-резистентность), что ведет кповышенному образованию тромбина и усилению прокоагуляционных свойств крови [Баранови др., 2009]. В разных популяциях частота аллели A составляет 0-3% [http://www.ensembl.org/].Для европейцев мутация Лейден - один из доказанных генетических факторов риска тромбозов[Демьяненко и др., 2013].Рисунок 2 - Механизм формирования резистентности к активированному протеину С (АПС)при мутации Лейден (F5 rs6025 (1691G>A)) [Jadaon, 2011]Во многих исследованиях показана ассоциация мутации Лейден (генотипа GA и/или AA)с гестозом.

Частота этой мутации составила 10,4-26,5% у беременных с гестозом и до 6% уженщин контрольной группы (ОШ=2-6) [Grandone et al., 1997; von Tempelhoff et al., 2000;Kupferminc et al., 1999; Rigo et al., 2000; Mello et al., 2005]. Результаты большинства метаанализов подтвердили, что мутация Лейден является фактором риска развития гестоза [Kosmaset al., 2003; Lin and August, 2005; Dudding et al., 2008; Staines-Urias et al., 2012; Buurma et al.,2013]. Однако в ряде исследований [Faisel et al., 2004; Dizon-Townson et al., 2005; Robertson etal., 2006; Clark et al., 2008; Said et al., 2010; Kahn et al., 2009; Kjellberg et al., 2010], включая один25мета-анализ [Rodger et al., 2010], показано отсутствие ассоциаций мутации Лейден с рискомразвития этого осложнения беременности.Анализ данных литературы показывает, что такое противоречие отчасти может бытьобусловлено этническими факторами.

Так в исследовании Tempelhoff von G. F. et al. (2000)показана положительная ассоциация мутации Лейден с гестозом у женщин из Германии(p<0,05, ОШ=4,7; 95%ДИ: 1,4–15,8), а в работе O’Shaughnessy K. M.et al. (1999) для женщин,проживающих в Англии, таких ассоциаций не найдено (ОШ=0,96; 95%ДИ: 0,43–2,14).Повышенная частота носительства генотипа GA у больных с гестозом (18,3%) по сравнению создоровыми женщинами (3,0%) отмечена также и в венгерской популяции (p<0,001, ОР=6,2;95%ДИ: 1,9–20,0) [Rigo et al., 2000].Наблюдаемые противоречия могут быть связаны и с особенностями клиническихпроявлений гестоза в исследуемых группах больных. Mello G.

et al. (2005) установили, чтомутация Лейден является фактором риска тяжелого гестоза (p<0,0001, ОШ=5,2; 95%ДИ: 2,9–9,8), в то время как для пациенток с гестозом средней степени ассоциаций не найдено (p=0,84,ОШ=1,0; 95%ДИ: 0,4–2,3). В мета-анализе Dudding T. et al. (2008) также показано, что мутацияЛейден является фактором риска развития тяжелого гестоза (ОШ=1,49, 95%ДИ: 1,13-1,96). Врезультате мета-анализа 47 статей установлена более выраженная ассоциация мутации Лейден стяжелым гестозом (p=0,009, ОШ=2,2; 95%ДИ: 1,3–3,9), тогда как для всех других форм гестозауровень значимости оказался меньшим (p=0,04, ОШ=1,8; 95%ДИ: 1,1–2,9) [Lin and August,2005].Ген F2 локализован в локусе 11p11.2, охватывает около 20 т.п.н., состоит из 14 экзонов[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/].

Белковым продуктом гена является протромбин или факторсвертывания крови II (F2) - витамин K-зависимый гликопротеин, который синтезируется впечени в виде неактивного предшественника. Переход протромбина в тромбин (F2а)осуществляется под действием факторов Ха и Va в присутствии ионов кальция. Тромбинпреобразует фибриноген в фибрин с дальнейшим образованием кровяного сгустка, стимулируетагрегацию тромбоцитов и активирует факторы свертывания V, VII, VIII, XI и XIII. В то жевремя тромбин ингибирует коагуляцию в результате активации протеина С [Демьяненко и др.,2013].В гене F2 идентифицированы 516 полиморфных сайтов [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/].Функционально наиболее значимой является мутация 20210G>A (rs1799963), расположенная в3'-нетранслируемом участке [Демьяненко и др., 2013].

Популяционная частота мутацииварьирует в пределах 0-4% [http://www.ensembl.org/]. Замена 20210G>A (rs1799963) приводит кнакоплению протромбина в плазме крови [Демьяненко и др., 2013]. Следовательно, врезультате мутации может происходить смещение равновесия в сторону усиления свертывания26крови и развитие тромботических осложнений. Замена 20210G>А (rs1799963) относится кзначимым генетическим фактором риска венозных тромбозов [Демьяненко и др., 2013].Эта мутация в гетерозиготном состоянии встречается у 4-11% пациенток с гестозом, итолько у 1-4% женщин без осложнений беременности (ОШ=2-7) [Kujovich, 2004; Gerhardt et al.,2005a; Mello et al., 2005; Зайнуллин и др., 2007]. Проведенные недавно мета-анализы StainesUrias E.

et al. (2012) и Buurma A. J. et al. (2013) свидетельствуют в пользу ассоциации мутации20210G>A (rs1799963) с риском развития гестоза (ОШ=1,72; 99%ДИ: 1,31–2,26 и ОШ=1,95;95%ДИ: 1,43–2,66 для аллели A).Вклад мутации 20210G>A (rs1799963) в этиологию и патогенез гестоза в разныхэтнических группах варьирует. Она является фактором риска тяжелого гестоза и гестозасредней тяжести у женщин Италии (ОШ=6,0; 95% ДИ: 2,7–14,1 и ОШ=3,3; 95%ДИ: 1,1–10,3 длягенотипа GA) [Mello et al., 2005], в то время как для жителей Англии, Германии и Турцииположительной ассоциации этой мутации с риском развития гестоза не установлено[O’Shaughnessy et al., 2001; Gerhardt et al., 2005a; Yalinkaya et al., 2006].Ген FGB расположен в локусе 4q31.3 и кодирует β-субъединицу фибриногена[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/]. Фибриноген - растворимый гликопротеин плазмы крови,синтезируется в печени и является одним из основных участников коагуляционного каскада.

Изфибриногена под действием тромбина образуется фибрин – основной компонент тромбов.Повышенный уровень фибриногена в крови способствует возникновению венозных иартериальных тромбозов [Camilleri et al., 2004]. Известно, что при гестозе концентрацияфибриногена в крови повышена [Williams et al., 2007].ВбазеNCBIзарегистрированоболее300полиморфныхсайтовгенаFGB[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]. Особый интерес представляет замена −455G>A (rs1800790),которая находится в 5’-промоторной области гена FGB и ассоциирована с повышениемэкспрессии гена и увеличением уровня фибриногена в крови, что может способствоватьразвитию тромботических осложнений [Демьяненко и др., 2013].

Частота аллели A в разныхпопуляциях составляет: европейцы - 18-25%, азиаты - 11-23%, африканцы - 1-5%, американцы 14-25% [http://www.ensembl.org/]. Исследователи из Англии и Финляндии не нашли ассоциациизамены −455G>A (rs1800790) с риском развития гестоза [Laasanen et al., 2002; Camilleri et al.,2004]. Между тем, в работе Ticconi C. et al. (2011) генотип АА чаще выявлялся у пациенток спривычным невынашиванием беременности.Ген ITGB3 картирован на 17-й хромосоме (17q21.32), состоит из 15 экзонов[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/]. Продуктом гена является интегрин β3 тромбоцитов - мембранныйгликопротеин GPIIIa (platelet glycoprotein IIIa), который в составе рецептора GPIIb/IIIaобеспечивает взаимодействие тромбоцитов с фибриногеном [Воронина и др., 2006].27В базе NCBI зарегистрировано более 1300 полиморфных участков гена ITGB3[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/], из которых наиболее детально изучен rs5918 (1565T>C).

Частотаминорной аллели C в разных популяциях составляет: европейцы - 11-16%, азиаты - 1%,африканцы - 10-13%, американцы - 8-12% [http://www.ensembl.org/]. Замена тимина на цитозинво 2-ом экзоне гена ITGB3 в положении 1565 приводит к замене лейцина на пролин в интегринебета-3 в позиции 33 (Leu33Pro), что вызывает конформационные изменения молекулы GPIIIa ив итоге сказывается на агрегационных свойствах тромбоцитов [Honda et al., 1995]. При наличииаллели С повышена скорость агрегации тромбоцитов и увеличена вероятность возникновениятромботических осложнений [Honda et al., 1995].К настоящему времени проведены единичные исследования ассоциации аллелей игенотипов rs5918 гена ITGB3 с гестозом.