Автореферат (Сравнительная характеристика васкуляризации гепатоцеллюлярного рака и очаговой узловой гиперплазии печени - компьютерно-томографические и морфологические сопоставления), страница 4

В результате морфометрического анализапрепаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, установлено, что количество ветвей питающей артерии в ткани ОУГ средних размеров лишь на 5,6%превышало их число в ОУГ малых узлах (p>0,05). В то же время суммарнаяплощадь их просвета имела на 19,0% бóльшие значения в наблюдениях ОУГдиаметром менее 5 см (p>0,05). Вместе с тем, рассчитанная нами удельная долясосудистого русла, представляющая собой сеть ветвей приносящей артерии и16синусоидов и характеризующая степень васкуляризации ткани ОУГ, составляла6,1% в малых и 4,5% в средних новообразованиях.При анализе иммуногистохимических препаратов ОУГ положительнаяэкспрессия CD34 и СD105 отмечалась преимущественно в синусоидах периферических отделов узелков вблизи центрального рубца и отходящих от негофиброзных лучей.

При этом положительная реакция СD105 наблюдалась вменьшем числе синусоидов и характеризовалась более низкой интенсивностьюреакции по сравнению с CD34. В результате морфометрического анализа синусоидных сосудов, выявленных иммуногистохимическими методами, бóльшиезначения их количества и суммарной площади сечения установлены в опухоляхдиаметром 5-10 см.При сравнительном иммуногистохимическом изучении препаратов узловГЦР установлен различный уровень экспрессии CD34 и CD105, что нашло своеотражения и в полученных морфометрических характеристиках кровеносныхсосудов.

Наибольшее количество CD34 положительных сосудов выявлено вгруппе ГЦР диаметром не более 5 см. Максимальные значения суммарнойплощади сосудов и рассчитанные на их основании показатели васкуляризацииуменьшались по мере увеличения размеров новообразований: в группе малыхузлов ГЦР показатели васкуляризации на 1,3% и 15,2% больше соответствующих значений средних и больших образований.При морфометрии иммуногистохимических препаратов с антителамиCD105 наибольшие значения почти всех изученных показателей отмечались вузлах ГЦР среднего размера. Так, количество сосудов превышало соответствующие значения в малых и больших образованиях на 8,2% и 31,4%, средние исуммарные значения периметров сечения сосудов – на 3,9% и 12,4% в малых ина 21,5% и 59,7% в больших узлах.

Показатели васкуляризации, характеризующие удельную площадь сечения сосудов, имели максимальные значения такжев средних узлах, а минимальные – в больших образованиях ГЦР.Анализируя новообразования в зависимости от степени их гистологической дифференцировки, наибольшее количество кровеносных сосудов, имеющих положительную реакцию с CD34, в поле зрения установлено нами в тканиВД ГЦР, превышающее соответствующие значения УД и НД ГЦР на 65,9% и119,1% (p<0,05). Наряду с этим максимальные средние показатели площади ипериметра сечения сосудов установлены в группе наблюдений НД ГЦР, а минимальные – в ткани ВД ГЦР. Рассчитанные нами значения показателя васкуляризации, отражающие удельную площадь сечения сосудов, имели макси17мальные цифры в группе ВД ГЦР, а минимальные – в ткани НД ГЦР.

При иммуногистохимической реакции с антителами CD105 в опухолевой ткани независимо от степени ее гистологической дифференцировки выявлялось меньшееколичество сосудов. Наибольшие значения рассчитанного показателя васкуляризации отмечались в ткани ВД ГЦР: на 6,5% (p>0,05) и 120,0% (p<0,05) больше соответствующих показателей УД и НД рака.В результате корреляционного анализа между КТ характеристиками узлов и морфометрическими параметрами сосудов в ткани ГЦР установленоналичие сильных положительных взаимосвязей КТ показателей артериальногопритока и морфологических показателей васкуляризации по CD34- и CD105положительным сосудам в группах ВД рака и узлов малого размера ГЦР, подтверждая факт увеличения степени васкуляризации узлов примущественно засчет артериальных, в том числе и новообразованных, сосудов. Разнонаправленные корреляции между уровнем морфологической васкуляризации и КТ показателями артериального и венозного приростов в группе УД ГЦР свидетельствуют, видимо, о том, что денситометрические характеристики опухолевогоузла зависят не только от размеров сосудов, но и гемодинамических параметров.Таким образом, можно заключить, что МСКТ является эффективным методом неинвазивной диагностики ГЦР в отсутствие цирроза печени.

Ангиоархитектоника ткани ГЦР в определенной мере зависит от степени гистологической дифференцировки и размеров опухолевого узла. Выявленные нами изменения васкуляризации ткани ГЦР подтверждают факт развития процессов опухолевого неоангиогенеза, обусловливающих быстрый рост и увеличение размеров новообразования.Повышение степени злокачественности ГЦР характеризуется уменьшением степени васкуляризации, рассчитанной нами в результате морфометрического анализа иммуногистохимических препаратов, окрашенных CD34. Подобные изменения соответствуют полученным нами данным о КТ характеристикахваскуляризации узлов ГЦР и позволяют рекомендовать использованную методику КТ исследования для предоперационной оценки степени и характера васкуляризации. Нами также показано, что повышение степени злокачественностиГЦР сопровождается не только изменениями степени его васкуляризации, но исочетается с прогрессирующим увеличением доли крови, поступающей по печеночной артерии.

Уменьшение количества и удельной площади сечения сину18соидов по мере снижения степени гистологической дифференцировки опухолибыло характерно и для СD105 положительных сосудов.Следовательно, установленные нами морфометрические данные свидетельствуют о затухании неоангиогенеза в процессе опухолевой прогрессии ироста ГЦР: уменьшение количества сосудов в поле зрения ткани опухоли приувеличении ее в размерах и по мере снижения степени гистологической дифференцировки (или соответственно повышения степени злокачественности). Результаты исследования согласуются с данными литературы о меньших значениях внутриопухолевой плотности сосудов в новообразованиях большего размера и на более поздних стадиях развития [El-Assal O.N. et al., 1998]. Подобныеособенности роста кровеносных сосудов, на наш взгляд, следует учитывать придифференциальной диагностике очаговых образований печени.Выявленные КТ характеристики узлов ГЦР в отсутствие цирроза, а такжепредложенный нами способ оценки степени васкуляризации новообразованийпечени существенно дополняют общепринятые критерии LI-RADS для дифференциальной диагностики очаговых образований печени.

Данные характеристики необходимо использовать при разработке и назначении антиангиогенныхпрепаратов больным, страдающим ГЦР, а также наряду с критериями mRECISTдля оценки эффективности проведенного лечения.ВЫВОДЫ1. Критерии дифференциальной диагностики гепатоцеллюлярного рака (ГЦР)и очаговой узловой гиперплазии (ОУГ) печени строятся на особенностях ихконтрастирования в сочетании с денситометрическими показателями и приростами КТ плотности относительно паренхимы печени в каждую фазу исследования.2.

При анализе дифференциально-диагностической значимости КТ признаковГЦР и ОУГ наиболее высокочувствительными являются четкость контуровв артериальную фазу (70,6%) при сравнении малых узлов и гетерогенностьстроения (95,8%) при анализе образований диаметром 5-10 см. Наиболеевысокоспецифичным (94,4%) признаком является выявление участков обызвествления в узлах ГЦР средних размеров.3.

ОУГ независимо от их размеров являются изоденсными образованиямив нативную фазу и гиперденсными - в артериальную фазу КТ исследования. Посредним значениям КТ плотности в нативную фазу малые узлы ГЦР имеют19характеристики изоденсного образования, а диаметром более 5 см - гиподенсного. В артериальную фазу исследования узлы ГЦР независимо от размера являются гиперденсными. В венозную фазу КТ малые и средние узлыГЦР - изоденсные, а диаметром более 10 см – гиподенсные.4. Объективной характеристикой очагового образования печени является КТпоказатель его васкуляризации, рассчитываемый на основании денситометрических значений с учетом разницы притоков артериальной и венознойкрови. Рассчитанные КТ-показатели васкуляризации в малых ОУГ на 27,5%больше соответствующих значений в узлах размером более 5 см.

При этомво всех наблюдениях кровоснабжение осуществлялось только по системепеченочной артерии. В наблюдениях ГЦР наибольшие значения КТ показателя васкуляризации установлены в узлах диаметром 5-10 см и при ВД варианте строения. Минимальные значения КТ показателя васкуляризациивыявлены в больших узлах (размером более 10 см) и при НД ГЦР. Уменьшение степени гистологической дифференцировки (увеличение степенизлокачественности) ГЦР сопровождается повышением (с 45% до 78,5%) доли крови, поступающей по печеночной артерии, и снижением (с 55% до21,5%) доли крови, поступающей по системе воротной вены.5. Морфометрические показатели степени васкуляризации ОУГ печени зависят от способа окраски сосудов. Наибольшие значения количества и суммарной площади синусоидов, а также наибольшие значения площади поперечного сечения ветвей артерий и общей площади сосудов, характеризующие степень васкуляризации ткани, установлены на гистологических препаратах малых ОУГ.

Увеличение размеров узлов сопровождается снижениемпоказателя васкуляризации.6. Морфологические показатели васкуляризации ткани ГЦР зависят от размераузлов и степени гистологической дифференцировки. Максимальные значения количества и суммарной площади сечения CD34 положительных сосудов установлены в новообразованиях диаметром не более 5 см, а наименьшие – в опухолях размером более 10 см. Наибольшие значения показателяваскуляризации выявлены в ткани ВД ГЦР, а наименьшие – в группе НДГЦР. При этом уменьшение количества и удельной площади сечения синусоидов по мере снижения степени гистологической дифференцировки опухоли характерно и для СD105 положительных сосудов.201.2.3.4.5.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИДля эффективной дифференциальной диагностики ГЦР и ОУГ печени в отсутствии цирроза печени необходимо проведение КТ исследования с болюсным введением контрастного препарата и последующим анализом четырех фаз исследования (нативной, артериальной, венозной, отсроченной).Наиболее информативными являются артериальная и венозная фазы исследования, позволяющие оценить особенности гемодинамики и строения выявляемых узловых образований.Оценка и анализ денситометрических показателей ткани узлов ОУГ и ГЦРотносительно окружающей паренхимы печени в последовательных фазахКТ сканирования способствуют проведению дифференциальной диагностики указанных новообразований печени и определению степени злокачественности ГЦР.При анализе КТ характеристик новообразований печени необходимо оценивать соотношение притоков артериальной (по печеночной артерии) и венозной (по воротной вене) крови, позволяющее планировать тактику лечения иоценивать эффективность неоадъювантной терапии.

Использование коэффициента разности концентрации притоков (КРКП) позволяет рассчитатьнаиболее объективный КТ показатель васкуляризации очагового образования печени.Для полной характеристики кровеносных сосудов ОУГ необходим анализгистологических препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином. Иммуногистохимическое выявление CD34 способствует лучшей визуализацииэндотелиоцитов, однако маркирует лишь часть имеющихся синусоидов.Экспрессия CD105 позволяет выявить активированные эндотелиальныеклетки и тем самым оценить неоангиогенез. Морфологическая оценка особенностей васкуляризации ткани ОУГ возможна лишь при комплексном гистологическом иммуногистохимическом исследовании.Для морфологической оценки степени васкуляризации ткани ГЦР и ОУГнеобходимо использовать морфометрические показатели как количества сосудов, так и удельной площади их сечения на иммуногистохимических препаратах с маркерами эндотелиальных клеток (CD34 и CD105).21СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1.

Туманова У.Н. Компьютерно-томографические характеристики гепатоцеллюлярного рака // Вестник РГМУ. 2012, № 1, спец. вып., с. 315.2. Щеголев А.И., Дубова Е.А., Туманова У.Н. Васкуляризация ткани гепатоцеллюлярного рака зависит от степени его дифференцировки // Бюллетеньэкспериментальной биологии и медицины. 2012, том 153, № 4 с. 480-484.3. Туманова У.Н., Дубова Е.А., Кармазановский Г.Г., Щеголев А.И. Компьютерно-томографические и морфологические сопоставления при гепатоцеллюлярном раке различной степени дифференцировки // Молекулярная медицина.