Диссертация (Разработка инъекционных лекарственных форм цифетрилина), страница 9

Все главные показателисистемы представляют собой дисперсный состав, отсутствие продуктовПОЛ и содержание ЛП, которые связаны с липосомами, при облучениидозами до 30 КГР полностью сохраняются, обеспечивают нужнуюнадёжностьстерильности.[17].Длялипосомальныхдисперсийвбольшинстве случаев тем не менее используют через мембраны фильтр сразмером пор 0,45 и 0,22 мкм стерилизующую фильтрацию.

[3,13]481.3.8. Контроль качества ЛЛФНаследующиетригруппыможноразделитькачественныепоказатели:I – показатели, которые характеризуют индивидуальные свойствавспомогательных и действующих веществ;II – показатели качества, которые характеризуют готовую формупрепарата (величина рН, стерильность, пирогенность, токсичность);III – показатели, которые характеризуют свойства липосом (размервезикул, включение ЛВ, дзета-потенциал и пр.) [8].Испытания должны касаться таких свойств продукта, которыеподвергаются изменениям при хранении и могут вполне влиять накачествоготовогопрепарата.Ктомуже,стабильностьдолжныхарактеризовать методы количественного определения.Необходимо уделять особое внимание свойствам и структуре новыхпродуктов, которые образуются при разложении компонентов препарата.Новые продукты разложения в таком случае нужно квалифицировать. Так,к примеру, должны быть указаны и идентифицированы граничныеколичествапримесей,которыеобразуются,например,дляфосфатидилхолина (свободные жирные кислоты и лизопродукты) [7].Испытания должны указать на те свойства, которые при технологииполучения препаратов или при их хранении подвержены изменению, имогут влиять на качество липосомальных препаратов, их безопасностьприменения и эффективность.

Разработка метода определения количества,включённого в липосомы ЛВ, является важным вопросом, к тому жеданные определения должны проводиться не только в процессеизготовления липосом и их лиофилизации, но и при хранении препарата на49протяжении срока его годности. Данный вопрос должен для каждого видалипосом решаться непосредственно разработчиком препарата. В такомслучаевалидацияаналитическихметодовсчитаетсяобязательнымусловием его применения.Испытание на механические включения можно отнести к одному изпроблемных вопросов (посторонние частицы). Их определение весьмазатруднительно.Этосвязанос тем,что,во-первых,препаратпредставляет собой окрашенную эмульсионную жидкость.

Во-вторых,препарат лиофилизирован, требует высокого качества укупорочныхматериалов и стекла, класса чистоты при производстве препарата и егорозливе (класс А) [8].Одним из главных требований к препаратам парэнтеральноговведения считается отсутствие пирогенности. Если принимать во вниманиепирогенные вещества, то в большинстве случаев, онибактериальнымиустойчивостьюлипополисахаридамикнагреванию(лишьитакжеприобладаютдлительнойявляютсясильнойобработкеразрушаются, а именно при температуре более 200°С), получениелипосомальных препаратов, от липидной субстанции до готовогопрепарата, требуется выполнять в условиях асептики, что предотвращаетзагрязнение материалов не только микроорганизмами, но и продуктами ихжизнедеятельности.

При учёте данных факторов из-за невозможностиприменения термической обработки отдельныхкомпонентов формируемыхлипосом. Стоит использовать при изготовлении липосомных препаратовапирогенныеи стерильные составляющие: воду для инъекций, липидныесубстанции, стабилизаторы [7].50ЗАКЛЮЧЕНИЕСовременные представления о значении гормонов гипоталамуса вразвитии гормнозависимых опухолей послужили основанием для поискапринципиально новых противоопухолевых веществ среди аналоговсоматостатина. Механизм их противоопухолевого действия основан наингибировании секреции ряда белковых истероидныхгормонов,участвующих в пролиферации опухолевых клеток.

Этот механизмреализуется через специфические рецепторы, высокая экспрессия которыхшироко представлена на клетках ряда злокаечтсвенных опухолей.Цифетрилин – один из аналогов соматостатина, синтезированный вФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Висследованиях in vivo цифетрилин подавляет секрецию СТГ, пролактина иинсулина. Показана противоопухолевая активность цифетрилина наперевиваемыхмоделяхопухолеймышей:Ca-755(аденокарциномемолочной железы), РМ-1 (раке молочной железы человека), РШМ-5 (ракешейки матки), LLC (эпидермоидной карциноме легкого Льюис) и крыс: R3327-H(аденокарциномепредстательнойжелезы)иДМБА-индуцированных опухолях молочной железы.В связи с доказанной эффективностью цифетрилина при егопероральном применении, а также из-за его плохой растворимости в воде влаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ФГБУ «НМИЦонкологии им.

Н.Н. Блохина» Минздрава России создана таблетированнаяЛФ цифетрилина «Цифетрилин, таблетки 6 мг».Поскольку цифетрилин не растворим в воде, для созданияинъекционной ЛФ в качестве способа солюбилизации данного веществапредложеноеговключениевлипосомы.ПреимуществамиЛЛФзаключаются в защите здоровых клеток от токсического действия ЛВ, авключеннойсубстанцииотдеградациивусаловияхорганизма,пролонгировании действия ЛВ; селективном накоплении в области51поражения; возможности создания водорастворимой ЛФ для рядагидрофобных препаратов и увеличении тем самым их биодоступности.При разработке ЛЛФ требуется детальное научное теоретическое ипрактическое обоснование всех технологических параметров: выбороптимального состава и метода получения липосом, способа стерилизациии стабилизации липосомальной дисперсии и т.п.52ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬГлава 2.

Материалы и методы исследования2.1. Материалы и реактивыПри проведении технологических и химико-фармацевтическихисследованийсубстанцииЛЛФ-лиоиреактивы,цифетрилинакоторыеиспользовалихимическиесоответствовалитребованиямнормативной документации (ГОСТов, ТУ, фармакопейных статей ГФ XIII,Ph Eur 8.0, USP30-NF25).Действующее вещество:Цифетрилин – белый или белый со слабым желтоватым оттенкомкристаллический порошок без запаха с температурой плавления в пределах121–125 °С; практически нерастворим в воде, очень мало растворим вразбавленных минеральных кислотах и щелочах, мало растворим в спиртеэтиловом 95 % и ацетоне, растворим в хлороформе.

Молекулярная масса(М) = 1016,2 г/моль.Компоненты липосомальной мембраны:Яичный фосфатидилхолин Е РС S (Lipoid, Германия) (ЯФХ) – порошокбелого цвета с желтоватым оттенком; растворим в хлороформе, метаноле,этаноле, толуоле, эфире; не растворим в воде и ацетоне. М = 751 г/моль.Холестерин (Avanti Polar Lipids, Inc., США) – кристаллический порошок отбелого до бледно-желтого цвета без запаха или со слабым запахом,чувствителен к действию света. Легко растворим в хлороформе идиэтиловом эфире, растворим в 1,4-диоксане, умеренно растворим вацетоне и этаноле, практически не растворим в воде и метаноле. М = 386,7г/моль.PEG-2000-DSPE 18:0 (1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N[метокси (полиэтиленгликоль)-2000] аммониевая соль) (Lipoid, Германия)(ПЭГ-ДГФА) – порошок белого цвета, растворим в хлороформе, толуоле,метаноле и этаноле, не растворим в воде и ацетоне.

М = 2787,49 г/моль.53Криопротекторы:Сахароза, ГОСТ 5833-75 (Химмед, Россия);Трегалоза-D дигидрат ОСЧ (Химмед, Россия);Лактоза безводная Ph Eur (Sigma-Aldrich GmbH, Германия);Глюкоза моногидрат, ГОСТ 975-88 (Химмед, Россия);Растворители:Аммиак водный 25 % ОСЧ, ГОСТ 24147-80 (Химмед, Россия);Ацетон ЧДА, ГОСТ 2603-79 изм. 1, 2 (Химмед, Россия);Вода очищенная, ФС.2.2.0019.15;Вода для инъекций, ФС.2.2.0020.15;н-Бутанол ЧДА, ГОСТ 6006-78 (ЗАО ЭКОС-1, Россия);Ледяная уксусная кислота ХЧ, ГОСТ 61–75, изм. 1–3 (ЗАО «Мосреактив»,Россия);Метанол ХЧ, ГОСТ 6995-77 (Химмед, Россия);Пропанол-2 (изопропиловый спирт) ОСЧ, ТУ-6-09-07-1718-91 (Химмед,Россия);Спирт этиловый 95 %, ФС.2.1.0036.15 (ЗАО «Брынцалов-А» Ферейн,Россия);Хлороформ(трихлорметан)стабилизированныйХЧ, ТУ2631-001-29483781-04 изм. 1,2 (Химмед, Россия);Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты) ХЧ, ГОСТ 22300-76(Химмед, Россия).Иные реактивы:α-Токоферола ацетат, раствор масляный 30 % (Марбиофарм, Россия);Калия перманганат ЧДА, ГОСТ 20490-75 (изм.

1, 2 ,3) (Химмед, Россия)Йод кристаллический Ч, ГОСТ 4159-79 (Химмед, Россия);Кислота серная «ОСЧ 11-5», ГОСТ 14262-78 (ООО «Сигма Тек», Россия);Соляная кислота концентрированная ОС.Ч. «20-4», ГОСТ 14261-77 (ООО«Сигма Тек», Россия);Тиобарбитуровая кислота, ≥ 98 % (Sigma-Aldrich, Со., Германия);54Трихлоруксусная кислота Ph. Eur.

(AppliChem Panreac, Германия).Вспомогательные материалы для фильтрации и экструзии:Нейлоновые мембранные фильтры «Pall» N66 диаметром 25, 47 и 90 мм иразмером пор 1,2; 0,45 и 0,22 мкм (ООО Палл Евразия, Россия);Поликарбонатные мембранные фильтры «Nuclepore» диаметром 25, 47 и90 мм и размером пор 0,2 мкм (Whatman, Великобритания);Фильтр из сложных эфиров целлюлозы диаметром 25 и 47 мм и размеромпор 0,22 мкм (Merck Millipore, Ирландия).Вспомогательные материалы для проведения ТСХ:Пластинки «Sorbfil» ПТСХ-АФ-А (Россия).

Тип сорбента – силикагельСТХ-1ВЭ. Зернение – 8–12 мкм. Толщина слоя – 100 мкм. Связующеевещество – силиказоль. Тип подложки – алюминий. Размер пластин – 10 ×15 см.Стеклянная камера с крышкой для ТСХ-анализа размером 17,5 × 6,5 × 18,5см (Россия).Вспомогательные материалы для спектрофотометрии:Кюветы кварцевые с крышкой для спектрофотометрии размером 10 × 10мм (Россия).2.2. ОборудованиеВесы аналитические Sartorius 2405 (Sartorius AG, Германия);Весы лабораторные DL-120 (AND, Япония);Весы лабораторные GF-600 (AND, Япония);Испаритель роторный Heidolph Hei-VAP Advantage (Heidolph, Германия);Ультразвуковая ванна Transsonic T310 (Elma, Германия);Экструдеры LipexTM Thermobarrel Extruder 10, 100 и 800 мл (Northern LipidsInc., Lipex Biomembranes, Inc., Канада);Гомогенизатор Microfluidizer M-110S (Microfluidics, США);pH-метр HANNA HI 2211 (Hanna Instruments, Румыния);55Наносайзер Nicomp 380 Submicron Particle Sizer (Particle Sizing Systems,США);Электронный микроскоп марки JEM-100CX (JEOL, Япония)Спектрофотометр Cary 100 (Varian, Inс., Австралия);Сублимационная сушка «Edwards Minifast DO.2» (Ero Electronic S.p.