Диссертация (Разработка методик хроматомасс-спектрометрического определения наркотических средств, психотропных веществ и лекарственных препаратов в биообъектах), страница 7

В качестве детектораиспользовали времяпролетный масс-спектрометр. Пробоподготовку проводилиметодами щелочного гидролиза и ЖЖЭ. Степени извлечения аналитов при такихусловиях анализа были выше 61%, а определяемые концентрации составили0,01-1,28 нг/мг. На рисунке 1.4.8.1 приведена хроматограмма и масс-спектрJWH-081, полученные авторами [118].Рисунок 1.4.8.1.

Хроматограмма (а) и масс-спектр (в) JWH-081, полученныеавторами [118] по результатам анализа волос.Авторы [125] анализировали в волосах каннабимиметики классовнафтоилиндолы и адамантаниндолы методом ВЭЖХ-МС/МС. Всеанализируемые ими соединения обнаружены в волосах в нативном виде.Также с помощью модельных образцов волос авторами была построенакалибровочная зависимость для количественной оценки содержания целевыхвеществ в диапазоне 0,5-75 нг/мг.Hutter M., Kneisel S., Auwarter V. и Neukamm M.A. [126] такжепроводили исследования синтетических каннабиноидов в волосах методомВЭЖХ-МС/МС.

Ими были проанализированы вещества классов нафтоил-,бензил- и адамантаниндолов. В качестве пробоподготовки был использованметод щелочного гидролиза с последующей ЖЖЭ. Пределы обнаружения поцелевым веществам лежали в диапазоне 0,2-24 пг/мг. Область линейностикалибровочной кривой составила 5-250 пг/мг.42Авторы [120] анализировали волосы пациентов наркологическихдиспансеров на наличие синтетических каннабиноидов (РВ-22, РВ-22F,AB-Pinaca и AB-Fubinaca) методом ГХ-МС. Пробоподготовку волоспроводили методами щелочного гидролиза, ТФЭи дериватизациипентафторпропионовым ангидридом. Количественный анализа целевыханалитов не проводился.

В результате исследований авторы [120]обнаружили в нативном виде PB-22, PB-22F и AB-Pinaca.В работе [127] поводили анализ волос пациентов Набережночелнинскогонаркологического диспансера методом ГХ-МС. Подготовку волос к анализупроводили методами щелочного гидролиза, ЖЖЭ и дериватизации растворамиBSTFA и PFPA. В результате исследований авторы обнаружили в пробах волосPB-22, PB-22F, AB-Pinaca и AB Fubinaca.Таким образом, для исследования волос на наличие синтетическихканнабиноидов применяется щелочной гидролиз с ЖЖЭ или ТФЭ, а вкачестве инструментального анализа – ГХ-МС или ВЭЖХ-МС/МС. Работ поприменению ГХ-МС/МС для анализа синтетических каннабиноидов вволосах в доступных литературных данных не представлено.1.5 Анализ биожидкостейНаиболее распространенными объектами анализа в области ХТЛ исудебной медицины являются кровь и моча, т.к. их пробоотбор не вызываетсложностей и может быть произведен у живых лиц.

Основными целевымивеществами при ХТА данных биообъектов являются опиаты, каннабиноидыи стимуляторы ЦНС.1.5.1 Определение амфетамина в цельной кровиАмфетамин − стимулятор центральной нервной системы, схожий поструктуре с адреналином и норадреналином. Во многих странах находитограниченное применение в медицине при лечении синдрома дефицитавнимания и гиперактивности, а также нарколепсии. В настоящее времяшироко распространен в незаконном обороте наркотиков. ПостановлениемПравительства Российской Федерации № 486 от 30 июня 2010 г.

амфетаминвнесен в список наркотических средств, психотропных веществ и ихпрекурсоров, оборот которых в Российской Федерации запрещен (список I)[93].Метаболизм амфетамина происходит в печени до фенилацетона,который затем окисляется до бензойной кислоты. Значительная частьамфетамина выводится в неизменном виде[55]. В крови амфетамин, как43правило, присутствует в неизменном виде, что делает данные биообъектнаиболее информативным для установления факта употребления данногостимулятора.Подготовка пробы цельной крови в данном случае [55] включает в себякислотный гидролиз, позволяющий избавиться от липидов и красныхкровяных телец, мешающих ХТА.

После гидролиза проводится ЖЖЭэкстракция и дериватизация. Данная пробоподготовка весьма длительная итрудозатратная. В литературе [88, 97] химико-токсикологический анализамфетамина в крови проводят преимущественно с помощью ГХ-МС, длячего необходимо получение ТФА-производной амфетамина, т.к.

даннойсоединение очень легколетучее и не обладает информативным массспектром. Альтернативой ГХ-МС, позволяющей сократить времяпробоподготовки крови и повысить пределы обнаружения амфетаминаявляется ВЭЖХ-МС/МС.1.5.2 Идентификация морфина и кодеина в мочеКодеин и морфин – алкалоиды опиума, входящие в Список II Перечнянаркотических средств, психотропных веществ и их прекурсоров, подлежащихконтролю в Российской Федерации, утвержденного постановлениемПравительства Российской Федерации от 30.06.1998 № 681 (ред.

07.11.2013№ 998) [93]. В медицинской практике морфин и кодеин используются вкачестве обезболивающих препаратов [132]. Однако морфин обладает гораздоболее высокой анальгетической активностью и при его регулярномупотреблении наблюдается эффект привыкания, поэтому он применяетсяисключительно в медицинских учреждениях и является препаратом строгойотчетности.

Кодеин входит в состав многих лекарственных препаратов,которые до 1 июня 2012 г. находились в свободной продаже на территории РФ[133]. За рубежом кодеин до сих пор присутствует в составе лекарственныхпрепаратов в свободной продаже.В экспертной практике в ходе химико-токсикологического анализа мочичасто приходится решать задачи по отличию употребления кодеина в составелекарственных препаратов от нелегального приема наркотического средстваморфин.Кодеин метаболизирует по трем основным направлениям: путемдеметилирования переходит в морфин, N-деметилированием – в норкодеин, атакже при взаимодействии с глюкуроновой кислотой образует глюкуронидыкак самого кодеина, так и его метаболитов. Пути метаболизма морфина −44коньюгирование с глюкуроновой кислотой дает морфин-3-глюкуронид иморфин-6-глюкуронид, N деметилирование – норморфин (см.

рис. 1.5.2.1).Рисунок 1.5.2.1. Обобщенная схема метаболизма морфина и кодеина в организмечеловека.Кодеин выводится из организма преимущественно с мочой в нативном исвязанном виде − 40-70%, норкодеин − 10-20%, 5-15% морфин и егоглюкуронид, в следовых количествах может находится норморфин и егоконьюгированная форма [55].При употреблении морфина до 12% введѐнной дозы выделяется почкамив неизменном виде, 65-70% − в виде глюкуронидов и 1% − норморфина [134].Таким образом, в случае употребления кодеина в моче послесоответствующей пробоподготовки будут детектироваться кодеин и норкодеин,а также в меньшем количестве − морфин. Вследствие употребления морфина вмоче будет определяться преимущественно сам морфин, а количество егометаболита – норморфина очень мало. Следует отметить, что при нелегальномупотреблении морфина в моче могут детектироваться не только сам морфин, нои кодеин, который является сопутствующей примесью.

Дифференцированиеупотребления морфина и кодеина в составе лекарственных препаратоввозможно по соотношению их концентраций в моче.Последние исследования по обнаружению опиатов в моче послеупотребления кодеинсодержащих препаратов представлены в статьеА.Б. Мелентьева и И.П.

Старцевой [135]. В своей практике авторы45использовали методы иммуноферментного анализа и газовой хроматографии смасс-селективным детектированием.Однако применение метода ГХ-МС не позволяет одновременноидентифицировать морфин и норкодеин ввиду незначительного отличия ихмасс-спектров (см. рис. 1.5.2.2).а)б)Рисунок 1.5.2.2. Библиотечные масс-спектры TMS-производных а) морфина иб) норкодеина.Проблема идентификации морфина и норкодеина в ходе ХТА мочиможет быть решена путемприменения более селективного ивысокочувствительного метода инструментального анализа – ВЭЖХМС/МС.1.5.3 Анализ природных каннабиноидов в мочеТГК-кислота – рис. 1.5.3.1.

– является конечным биологическинеактивным продуктом психоактивных компонентов наркотических средств,содержащих каннабиноиды (марихуана, гашиш, гашишное масло).Рисунок 1.5.3.1. Структурная формула 11-нор-δ9тетрагидроканнабиноловой кислоты46Данный метаболит выводится с мочой в виде глюкуронидов, поэтомупробоподготовка мочи требует стадии гидролиза для того, чтобы разрушитьего связь с глюкуроновой кислотой.