Osnovy_biokhimii_Uayt_tom_3 (А. Уайт - Основы биохимии в 3-х томах), страница 12

30.7. Белки узнающей группы С141, С1г и С19 ассоциируют при участии Сах+ за счет нековалентных взаимодействий; образующийся комплекс связывает 120 или 1нМ. С!11, имеющий 6 связывающих участков на молекулу, присоединяется к Ес-сегментам (рис. 30.2) 160 и 1пМ. Молекула С141 сильно асимметрична; около 10% ее массы приходится на долю углеводов. При обработке детергентами С111 днссоциирует на идентичные субъединицы (М 66000 — 70000), каждая из которых имеет один 1дС-связывающий участок. При восстановлении и денатурации С111 образуются пептиды А, В и С с молекулярными массами от 2! 000 до 24000. С141 обладает не- С!ч С1г С!в С4 С2 Сз С5 Сб С7 С8 С9 Ух ах 5~ Рх р~ Рг йх !1,0 7,5 4.5 1О,О 4,5 9,5 5,5 5,5 8,0 4,5 400 ООО 180 000 86000 206 000 117 000 180 000 150 000 ! ГО ООО 100 000 163 000 79 000 !2!3 зо.

имму!чохимия Мембрана Ччиспюи П ччвсюск ! учвсюок Ш Рис. 30.7. Предполагаемые реакции классического трехучасткового пути действия системы комплемента. 11 белков системы комплемента находятся в сыворотке (жидкой фазе). Процесс иннцинруетси связыванием 1цСг или 1цМ с антигенамн иа поверхности клетки и протекает ступенчато. Сначала три белка С1, обозначенные 19, 1г и !з, присоедииюотся к участку узнавания (участок 1). Связывание сопровождается химическим превращением, в результате которого С! активируется и образуется комплекс !Ч, !з и 1г.

Этот комплекс действует затем на С4 и С2, в результате образуются 4Ь и 2а и освобождаются пептиды 2Ь и 4а. 4Ь и 2а присоединяются к участку активации (участок ПА) и затем действуют на СЗ, что приводит к отшеплению пептида За (анафилатоксииа, см. текст) и образованию комплекса 4Ь, 2а и ЗЬ, который присоединяется к участку ПВ. Присоединившийся к участку ПВ комплекс действует на С5, что приводит к отщеплению пептида ба, который также является анафнлатоксином, и образованию С5Ь. После этого становится возможной сборка группы, атакующей мембрану; в результате кооперативного последовательного взаимодействия С5„ Сб, С7, СВ и С9 образуется комплекс, который присоединяется к участку П1.

Присоединение атакующей группы к участку П1 приводит к образованию отверстия в мембране, вероятно, путем внедрения в нее фрагментов некоторых белков этой группы. Атакующая группа, по-видимому, не обладает ферментативиой активностью и, вероятно„ за счет физико-химических снл разрушает нормальный бислой, образуя в нем гидрофильиые каналы, по которым происходит свободный обмен внутри- и внеклеточной воды. Прииеденные названия белков те же, что и в табл. 30.2, толька опущена буква С. Формы, обладающие ферментативиой активностью, обозначены чертой над номером компонента, например 1г, !з, 2а.

(л(й(!ег-ЕЬегйагб Н. Х., р. 395 1п Р. Ж. Рп!паш, еб., Т!1е Р!азша Рго!е!пз, 24. еб., чо1. 1, Асаньею!с Ргезз, 1пс., Ь!ечг Уогй (!975).) обычной структурой; каждая полипептидная цепь образует два глобулярных домена, локализованных на )чс и С-концах; домены соединены коллагеноподобным участком, богатым оксипролином и оксилизином (гл.

88). С помощью электронной микроскопии было обнаружено, что в нативном С1г) имеется 6 периферических пс жидкля сгядА оггхннэмх глобулярных областей, соединенных фнбриллоподобиым тянгем; 1пО-связывающие участки находятся, по-видимому, на этих периферических глобулах. С(о не обладает ферментативной активностью, а С1г н С1з являются зимогенамн. Предполагается, что С!г! после связывания 1пО активирует С1г; актнвнрованный С!г расщепляет пептндную связь в С!з; последний в свою очередь становится активным ферментом.

Активированные С!г и С1з являются сернновыми протеиназами, пнгибпруемыми ДФФ (гл. 8), структурно сходными с трипснном, химотрипсином и протенназами системы свертывания крови. С!г н С1з функционируют как протеолитнческие ферменты, однако простые модельные пептиды не могут служить им субстратами (следует отметить, что у С!з обнаружена эстеразная активность). Подобная характеристика справедлива н для других ферментов системы комплемента; повидимому, естественными субстратами этих ферментов являются только другие компоненты системы комплемента.

Процесс активации продолжает актпнированный С(з, который реагирует с С2 н С4, отщепляя от ннх пептиды С2Ь н С4а соответственно. Актпвированные С2 и С4 образуют комплекс, который временно присоединяется к клетке-мишени (через С4); этот комплекс, который называют СЗ-конвертазой, действует на СЗ с освобождением пептида СЗа. Некоторые молекулы активированного СЗ остаются связанными с активированным комплексом С2-С4, в то время как другие молекулы собираются вокруг комплекса С2-С4-СЗ.

Пептнд СЗа (77 амннокислотиых остатков) занимает в СЗ 1ч'-концевое положение; установлена его полная аминокислотная последовательность. Он обладает аиафнлатокснновой активностью, вызывая освобождение гистамина нз тучных клеток, направленную хемотактическую миграцию полиморфноядерных лимфоцитов н сокращение гладкой мускулатуры. Внутрикожное введение столь малых количеств СЗа, как 10-" моль, немедленно вызывает образование волдыря. Активированный комплекс С2-С4-СЗ, называемый Сб-конаерталой, действуя на С5, активирует его; при этом освобождается пептнд С5а. Эта стадия инициирует процесс самосборки.

Актнвнрованный С5 временно присоединяет Сб н С7, и к образовавшемуся комплексу С5-Сб-С7 присоединяется С8, а затем С9. Полностью собранная атакующая мембрану группа представляет собой комплекс из 10 молекул, включающий актнвированные Сб, Сб, С7 и С8 (по одной молекуле) и 6 молекул С9. Если С5-С9-атакующая группа не успевает связаться с клеточной поверхностью, она быстро теряет свою активность.

Пептид С5з, подобно пептиду СЗа, также обладает анафилатоксиновой активностью, однако он, по-видимому, реагирует с рецепторами, отличными от рецепторов СЗа. Одни реакции процесса активации системы комплемента являются стехиометрическими, в результате других наблюдается амп- ао. нагмунохиргия !21Ь Таблице! 80.8 Белки альтернативного пути актнаапии комплемента' Конгтаггга сепнмен- гапви Когщеит раним в смвороне, ыг!!ео мл ' Мщ м У- лнрнан масса КлассиЕнкаОн» Сокращенное осюанааение Белок 7 150 000 5,4 ! 84 000 2,5 9,5 180 000 150 †1 9.0 !7! 000 5-б 93 000 20 4 бв 000 3 24 000 Нефрптнма фактор Проперпнп СЗ СЗЬ СЗ-проантиватор СЗ-активатор СЗ-провнтиватор-! пипер тала 1т!Г Р СЗ СЗЬ СЗРА СЗД СЗРЛааа а мапаоеьегалп! и. у., р. атз !и Р.

тр. Рмпвнн еа., тие Р!вима Рго!е!па, ва еа., то!. ! Асааемгс Ргеав, 1пс., Нем тоги, !Рта. лнфнкация. Так, активированный С1г активирует только одну илн две молекулы С1з; из активированного комплекса С2-С4 образуется только один комплекс С2-С4-СЗ.

В то же время в результате действия активированного С! (С1с1, С1г, С1Б) образуется большое число активированных комплексов С4-С2 и Сб-конвертаза. Таким образом, при функционирования системы комплемента обнаруживаются черты биологического каскада. Система комплемента находится под строгим контролем.

Быстрая утрата активности группой, атакующей мембрану, ограничивает ее действие небольшой зоной около места ее образования. Кроме того, активированный С2, по-видимому, легко днссоцнирует из комплекса С2-С4-СЗ. В регуляции системы комплемента может участвовать также один из белков сыворотки крови — С!-ингибитор, который является мощным ингибитором активированных С!г н С(з, а также некоторых актнвированных факторов системы свертывания крови. Прн врожденном заболевании, наследственном ангионеаротическол! отеке, С1-ннгибитор (или его актишюсть) отсутствует; у больных наблюдаются отеки, они подвержены пифскцяонным поражениям верхних дыхательных путей, которые могут приводить к внезапной гибели больного.

В регуляции может участ'вовать также еще одни белок плазмы — СЗЬ-инактиватор (см. ниже). Анафилатокспн полностью ннактивируется при отщеплении его С-концевого остатка (аргиннна); зто происходит под действием сывороточного фермента, обладающего активностью карбоксипептидазы В (гл. 6). Альтернативный путь функционирования системы комплемента активируется агрегатами 1дА с определенными полисахаридами и гу. жидкая срндд Организма 1216 амана мембраны с(зь-с9)» анвивнрйняцее вепщстпво ! ! 1— 1 1 ! хр) ! ! р~~р+ сз СЗРАааа ма*' -! сз сзьа сб СЗРА Фрагм сз Рнс. 30.8. Предполагаемый механизм альтернативнога пути активации комплемента. Сокращения приведены в табл.

30.3 н в тексте. Подробности процесса описаны в тексте (Мй!!ег-Ейегйагг! П. У., р. 421 1п Г. й!. Рп!пап, еб., Тье Р1ааща Рго!е!пв, 26. еб., чо1. 1, Асабещ!с Ргеав, 1пс., Мен Уогк (!976).) липополисахаридамн. На этом пути функционируют 5 белков, в том числе СЗ из классического пути; некоторые свойства этих белков приведены в табл. 30.3. Альтернативный путь, в котором не участвуют С1, Сй и С4, также приводит к образованию Сб-С9- атакующей группы, которая действует таким же образом, как и в классическом пути. Предполагаемые стадии альтернативного пути показаны на рис.

30.8. Активация происходит под действием агрегатов 1цА, но не 1дб или 1нЛ1; в отсутствие иммуноглобулинов в качестве активаторов могут выступать бактериальные полисахариды или лнпополисахариды, а также некоторые вещества фагов и растений (инулин). О начальа!ых активирующпх стадиях альтернативного пути известно мало; предполагается, что инициирующий фактор 1Г реагирует с активируюшими соединениями, образуется активный 1Р, который необходим для превращения лропердинп Р (табл. 30.3) в активированный пропердин Р. Далее СЗ и активироваиный Р взаимодейстнуют с СЗ-проактиваторконаертозой (СЗРАаза), что приводит к появлению СЗ-конвертазной активности.

Это достигается в результате взаимодействия комплекса СЗ, активировашюго Р, СЗРАазы и СЗ-проокгиааторо (СЗРА), которое приводит к образованию СЗ-актыаатора (СЯА): последний в свою очередь активирует СЗ. Белок„называемый ю. иммчнояимия 1217 нефритным фактором, ИГ, может заменять актнвированный пропердии; неизвестно, однако, имеется ли он в нормальной сыворотке.