Автореферат (1173331), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Проводилось стандартное исследование в аксиальной,сагиттальной и фронтальной плоскости с построением 3D модели. Измеряласьплотность губчатой кости HU (единиц Хаунсфилда) в толще нижней челюсти справаи слева на уровне верхушек 2 и 3 зубов в области искусственно созданного дефектакостной ткани на расстоянии 3 мм от кортикальной пластины площадью измерения в1мм2и толщиной слоя в 1 мм.Материалы и методы статистического анализаДля статистической обработки результатов лабораторных и экспериментальныхисследований применяли метод доверительных интервалов на заданном уровнезначимости.Объем выборок для испытаний рассчитывали по обобщенной формуле Лера[MachinD.
и соавт., 2007].Доверительные интервалы медианы вычисляли по Кобзарю А.И. (2006).Стандартные коэффициенты корреляции, которые считали достоверными,определяли по Каминскому Л.С.(1964).РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕУсовершенствованная методика культивирования аутологичных клеток и оценкаизмененияадгезивногоипролиферативногопотенциалаостеопластическихматериалов после оптимизации их свойств позволили разработать композиционныйматериал для замещения костных дефектов челюстей (положительное решение № 2685 148) и способы его изготовления и применения (положительное решение № 2 692452.)12Для проведенния скриннинга остееопластичческих маатериалов при исслледованииипролиферрационнойй активноости приименяли перевиваепемую линнию фибрробластовв3Т3/NIH, котораяя входит в списоок рекоммендованныых ГОСТТ РИСО 10993.5-99.Аналиизируя реззультаты исследовааний, саммыми лучшшими проолифератиивными иадгезивныыми свойсствами облладает осттеопластичческий маттериал Bioo-Oss.Коммпозиционный матерриал для замещениия костныхх дефектоов состоитт из смесиигранулированного синтетичческого гиидроксиаппатита и бета-триккальций фосфатафиМСК пацциента, прри этом гранулыгггидроксиаппатита сттандартизиированы поп форме,,имеют раазмер часттиц 150–4400 мкм и имбибиррованы МСК,Мкулььтивированнными иззприкреплленной дессны пациента.Резуультаты эксперимеэентальныых исследоованийНамми проведеено морфоологическоое исследоование косстной тканни нижнейй челюстиикролика.По результатарам исследования в опытной группегчерез 1 месяяц гистологическаяякартина препаратопов четырехх кроликоов была схожа.сКосстный деффект был заполненнмелкими фрагменттами косттной тканни (матерриалом Biio-Oss), ккоторые полностьюпюлишены клеток и окрашивваются геематоксилиином и эозиномэс разной степеньююинтенсивности (рис.1).1Рис.1.
Опыытная групппа, 1 месяяц наблюдеений. Окрасска гематокксилином и эозином, ув. х100.Полость дефекта,дзааполненнаяя фрагментаами Bio-Osss, в центре фрагментт новообраазованнойкостной тккани (1).Прии окраске по Ван-Гиизону намми установлено, чтоо фрагменнты окрашшивалисьфуксиноффильно с разной степеньюю интенссивности. При фаазово-конттрастноймикроскоопии в коостных фррагментахх выявляллась фибрриллярная структурра ткани.Микроскоопия в теемном полле также выявлялаа фибрилллярность, но структтура приэтом знаачительноо отличаллась от структурры здороввой косттной тканни. При13поляризацционной микроскопмпии костнные фрагмменты импплантата были анизоотропны,то есть они былии лишеныы двойногго лучепрреломлениия, в отлиичие от здоровойзкостной тканит(рисс.
2).Рис.2. Опыытная групппа, 1 месяцц наблюденний. Полярризационнаая микроскопия, ув. х100.Наммиустанновленаанизотроопиякоостнойтканисстенкидефекта,изотропнность(отсуттствие двоойного прреломлениия)Bio-Oss, новообразованнаяя кость, вотличие ото материннской костти, имела слабую аннизотропиию.Средди фрагментов маттериала отмечалосьь формироование неебольших участковвновообраазованной костной ткани, в которой былибчеткко видны остеоцитыы (рис.1)..Нами пооказано, что структура внеклеточнвного маттрикса быыла недоостаточноосформироована, о чем свиддетельствуует слабаяя анизотрропия прии поляриззационнойймикроскоопии. Покаазательно, что на сттенках поолости деффекта к этому времеени такжееформируеется новоообразованнная косттная тканнь(регенеррат), которрая отличчается оттсобственнной комппактной костикобрразованиеем новыхх трабекуул с увелличенныммколичестввом остеооцитов и остеобластотов, но ещще без четткого офоррмления структурысыматриксаа.
При окрраске гемматоксилинном и эоззином усттановлено, что маттрикс быллгомогеннный, а прии фазово-кконтрастноой микросскопии замметна егоо волокнисстость, ноонет четккого форрмированиия гаверссовой сисстемы, каккв зррелой коссти. Прииполяризацционной микроскоопии, в отличиеоото близлеежащей ссобственноой кости,,новообраазованные участки давалидочеень слабуюю анизотроопию.По результатарам исследоования в опытнойогруппегчеррез 3 месяяца бывшаая полостььдефекта былабуже полностьью заполннена губчаатой (траббекулярноой) костноой тканьюю(рис.3), которая имела хаарактернуюю структтуру: отнносительноо многоччисленныееигоммогенную структуруу, иногда с тонкимиифрагментты Bio-Osss лишены клеток и имеюттрещинамми.
Большшую частьь бывшей полости занималии новообраазованныее костныеетрабекулыы, между которымии местами располагаался жировой костнный мозг, а местамии14– рыхлая соединиттельная тккань с умеренной лиимфо-макррофагальнной инфилльтрацией..Часть трабекул быыла сформмирована на основве фрагмеентов Bio-Oss, котоорые ещееостаются в их центтре. Костнные трабеккулы даваали четкуюю анизотроопию, в отличие оттматериалла Bio-Oss..Важжным набллюдением является то,т что в полостипдеефекта срееди соединнительноййткани осттаются фррагменты Bio-Oss,Bккоторыеоккружаются новообрразованнойй костноййтканью.
Таким образом,омы считаем, чтоо остеогенез идеет двумя путями:новообраазованием соединиттельной ткани в стенках полости и формиированиеммнеобразовванных балокбна основе фрагментофов Bio-Osss. При ффазово-коннтрастнойймикроскоопии намии установвлено, чтоо Bio-Oss остается аморфныым, а окрружающаяяткань приобретаетт костнуюю структурру, при поляризациионной миикроскопиии даннаяяном изотроопна, но имеетианиззотропныее участки, тогда каккнезрелая ткань ещёё в основнBio-Oss полностьюпю изотропеен.12Рис.3.Опыытная группа, 3 месяцца наблюдеений.
Окрааска гематооксилином и эозиномм, ув. х50.Полость дефектадзапполнена траабекулами новообраззованной коости(1) и ннемногочиссленнымифрагментаами Bio-Osss(2).нтрольная группа,3гмесяца набллюдений. ПоляризациПионная миккроскопия, ув. х100.Рис.4.КонПолость дефектадзапполнена фииброзной сооединителььной тканьюю с фрагмеентами Bio--Oss.15ми установвлено, чтоо в контроольной группе череез 3 месяцца полостьь дефектааНамбыла запоолнена соеединителььной тканьью разного типа. В одних учаастках онаа плотная,,зрелая, состоит изз тяжей фибробластфтов и колллагеновых волоконн (рис.4), однако вм полость заполненна сравниттельно рыыхлой соеддинительнной тканью фибро-основномретикуляррного типпа. В стенкках полостти отмечаюются участтки остеоггенеза.Череез 6 месяяцев в опыытной грууппе выяввлено, чтоо полостьь бывшегоо дефектаазаполнена трабекуллярной коостной ткаанью.
У жиивотных даннойдгрууппы косттная тканььначительноо более зррелый харрактер, чеем в конттрольной группе: трабекулытыимела знбыли боллее толстыые, с праавильной организаццией костнной струкктуры. Вннутри ниххвстречалиись фрагмменты Biio-Oss, ноо реже, чемчв коонтрольноой группее. Однакооотдельныые фрагмеенты былли видныы в костнномозговыых полосттях, одноовременнооотмечалиись и участтки компакктизации костнойксттруктуры (рис.5).Такиим образоом, в опыытной групппе, где нарядунс Bio-Oss ббыли испоользованыыМСК, осттеогенез в полости дефекта значительнзно опережжал контроольную грруппу. К 6месяцу полостьпзаполнялассь зрелойй трабекуллярной коостью с жировым костнымммозгом.
В контролльной грууппе полоость дефеккта также заполняеется трабеекулярноййкостью, но менеее зрелой,, причем новообрразованныые трабекуулы в этто времяяются еще на фрагмеентах Bio-Oss.формируюРис.5. Оппытная грууппа, 6 мессяцев набллюдений. ОкраскаОгематоксилиином и эозиином, ув.х50.Участток зрелой компактизикированной костной тккани.Череез 6 месяццев в коннтрольной группе полостьпдеефекта ужже полностью былаазаполненакостноойтканььютрабеекулярноййый мозг жирового тиипа.образоваллся костныструктууры.Мееждутраабекуламии16Такиим образоом, к 6 месяцумнааблюденияя в контррольной ггруппе оттмечалосььформироввание в бывшейбпоолости дефекта траабекулярноой костноой ткани нан основеефрагменттов Bio-OOss.
При этом по степенни развиттия и зррелости этаэтканььсоответсттвовала тоой, котораяя заполнялла полостьь через 3 месяцамв оппытной грруппе.Рис.6. Опыытная групппа, 6 месяяцев наблююдений. Ув.. х200. Фаззово-контраастная миккроскопияпредыдущщего участкка: костная ткань имееет характеррную струкктуру.ной ткании в областти дефектта нижнейй челюстииГисттологическкое изучеение костнкролика позволяетт сделать следующеее заключчение: в опытеои коонтроле остеогенезозми: 1) образованиоие новооббразованнных костнных балоок вокруггидет двуумя путямфрагменттов Bio-OOss и 2) формироование коости на перифериипи полости вблизии«материннской» коссти.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
