Автореферат (1173331), страница 4
Текст из файла (страница 4)
В опыытной грууппе, где былибиспоользованыы аутогеннные МСК,,остеогенеез в полостти дефектта значителльно опереежает коннтрольнуюю группу (ббез МСК).Резуультаты рентгенолрлогическиих исследоованийКоммпьютернаая томогррафия прроводиласьь эксперииментальнным живвотным ваксиальноой, сагитттальной и фронтаальной пллоскости с построеением 3DD модели..Измерялаась плотность губччатой костти HU (еддиниц Хааунсфилдаа) в толще нижнеййчелюсти справа и слева на уровне верхушекв2 и 3 зуббов, на раасстояниии 3 мм оттв мм2и тоолщиной сслоя в 1 ммм (рис.
7).кортикальной пласстины, плоощадью иззмерения в117Рис.7.Компьютерная томография головы кролика (1 месяц). Толщина слоя1 мм. Плотностькостной ткани в области имплантации стволовых клеток справа соответствует +452,7 ± 173HU, плотность костной ткани слева (без имплантации) –+433,3 ± 51,2 HU.Рис.8. Компьютерная томография головы кролика (3 месяца).
Толщина слоя1 мм. Плотностькостной ткани в области имплантации стволовых клеток слева соответствуетТаблица 2 – Результаты определения оптической плотности костной тканипри проведении компьютерной томографииСрокипослеоперационногопериода1 месяц3 месяца6 месяцевПорядковыйномер кроликаЗначения плотности костной ткани(HU)Опытная группа12345678910+452,7 ± 173+455,2 ± 163+747,9 ± 74+749 ±65+761,7 ±59,5+754,9 ±67,7+910,7 ± 53,9+918,5 ± 49,8+922,8 ± 54,5+895,1 ± 59,2Контрольнаягруппа+433,3 ± 51,2+428,5 ± 60,5+572,4 ± 68,4+566,4 ± 61+584,3±59,5+574,4 ± 69+856,7 ± 43,5+866,5 ± 44+849,2 ±39,5+858,3 ± 42,2Среднее значениеОпытнаягруппаКонтрольнаягруппа454,8435,3753,4544,4911,7857,718В результате проведённой компьютерной томографии головы кролика на сроках1, 3 и 6 месяцев послеоперационного периода были получены данные (таблица 2),наглядно показывающие динамику значительного увеличения плотности костнойткани челюсти в опытной группе, начиная со срока в 3 месяца, что доказываетсущественное сокращение срока репаративного процесса, что, в свою очередь,существенно сокращает сроки ортопедической реабилитации и обеспечивает полноевосстановление функции зубочелюстного аппарата.Впроцессеклиническойапробации,разработаннойбиокомпозициисаутологичными МСК десны, была разработана технология её применения вамбулаторно-поликлинической стоматологической практике, в результате чего былозарегистрировано изобретение «Способ замещения костных дефектов челюстей».Основой изобретения можно считать подробный протокол забора клиническогоматериала, его транспортировки и подготовки к использованию.Способ замещения костных дефектов челюстей заключается в проведении подинфильтрационной местной анестезией забора фрагмента десны размером 2х2мм упациента с планируемым послеоперационным дефектом челюсти, культивированиииз полученной ткани МСК, имбибировании указанными клетками синтетическогоксенотрансплантата до полного насыщения.Техническим результатом изобретения является восстановление архитектоникичелюсти путем стимулирования регенерации костной ткани индивидуальнымиостеоиндуктивными и синтетическими остеокондуктивными средствами.Анализируя динамикуизменений показателей микроциркуляции (М) упациентов исследуемой группы, а именно показатели до операции 12, через месяц –28, через 3 месяца – 23, а через 6 месяцев – 19, можно сделать вывод о характереостеорепаративного процесса (рис.
10).302520151050До леченияПосле лечения 1 месяцГруппа исследованияПосле лечения 3 месяцаПосле лечения 6 месяцевКонтрольная группаРис. 9.График значений показателей микроциркуляции (М) в группах сравнения.19В контрольной же группе временная динамика прослеживаетсякак11,15,13,14соответственно. Как видно, указанные значения стремятся к исходным, нопревышают их и соответствуют норме, что объясняется нарушением кровотока впроекции деструктивного костного очага в дооперационном периоде.Показатели вазомоторной активности (Кv)менялись на сроках наблюдения менеерадикально и составляли в группе сравнения значения – 15,20,18,17, а в контрольнойгруппе – 17,18,17,17 соответственно.
Изменения на 2% указанного коэффициента упациентов в группе исследования и стабилизация показателей пациентов контрольнойгруппы говорят о высокой эффективности разработанной методики замещениякостных дефектов челюстей уже через 3 месяца после операции и о необходимостидополнительного времени ожидания зубного протезирования пациентам контрольнойгруппы.Более значимая разница у пациентов исследуемой и контрольной группыпрослеживалась при анализе динамического изменения показателей σ. У пациентовисследуемой группы они составили до операции 0,92, через месяц – 1,95, через 3месяца – 1,72, а через 6 месяцев – 1,70, у пациентов контрольной группы 1,02, 1,12,0,98, 0,95 соответственно (рис.
11).2,521,510,50До леченияПосле лечения 1 месяц После лечения 3 месяцаГруппа исследованияПосле лечения 6месяцевКонтрольная группаРис. 10. Графическая характеристика коэффициентов вариации (Kv (%)),характеризующего вазомоторную активность микрососудов у пациентов в группахсравнения.Практически одинаковые значения показателей на сроках 3 и 6 месяцевпациентов обеих групп показывают формирование микроциркуляции и стабилизациюдвижения эритроцитов в области интраоперационного костного дефекта, однакоцифровые значения σ пациентов, которым применяли разработанную методикувосстановления костных дефектов челюстей, значительно превышающие значенияпациентов контрольной группы, говорит об эффективности указанной технологии.20Таким образом, проводя анализ проведенных исследований по изучениюгемодинамики пациентов с послеоперационными дефектами челюстей, можнозаключить, что применение биокомпозиции остоекондуктивного препарата всочетании аутологичными МСК десны, значительно повышает эффективностьрепаративного остеогенеза, а разработанная в рамках данной диссертационнойработы методика может применятся для коррекции альвеолярной кости, необходимойдля проведения адекватной ортопедической реабилитации пациентов.Учитывая все вышеизложенное, разработанная методика– забор клеточногоматериала у пациента, создание биокомпозиции остеокондуктивного препарата и егоприменение при замещении дефекта костной ткани как с внутрикостнымидентальными имплантатами, так и в других клинических случаях направленнойтканевой регенерации костной ткани челюстей, с последующим замещениемдефектов зубного ряда различными ортопедическими конструкциями, чтосущественно сокращает время ортопедической реабилитации пациентов.
Наряду сэтим,анализданныхрентгенологического,морфологическогоидопплерографического исследований позволяет утверждать, что дефект костнойткани челюсти, заполненный композицией с аутологичными клетками, показываетформирование как качественного, так и количественного состава костной тканичелюстей. Формирование кости в полости дефекта происходит как вокруг фрагментовсинтетического остеопластического материала, так и на периферии, что позволяетнам использовать все пространство дефекта. Все вышеизложенное говорит осущественном повышении эффективности направленной регенерации костной тканичелюстей, что и являлось целью нашей работы.1.2.3.ВЫВОДЫСпособ получения аутологичных мезенхимальных стволовых клеток прикрепленнойткани десны соответствует требованиям, предъявляемым к клеточным линиямбиомедицинского клеточного продукта, и позволяет провести экспансию клеток дляполучения необходимой дозы на ранних пассажах (р2-р3).В качестве матрицы носителя культуры аутологичных мезенхимальных стволовыхклеток был выбран остеопластический материал ксеногенного происхождения BioOss, который не оказывает цитотоксического воздействия на культуры клеток,обеспечивает высокую выживаемость клеток при invitro культивировании иформированию костной ткани invitro.Разработанная и охарактеризованная методика направленной тканевой регенерациикостной ткани заключается в использовании ксеногенного остеопластического214.5.материала, приведенного к приблизительно одному размеру и форме (гранулы 150–400 мкм) и насыщенного аутологичными клетками из прикрепленной ткани десны.Оптическая плотность образовавшейся костной ткани в дефекте, восполненном припомощи аутологичных клеток, на 19,5 HU (Р≥1) выше, чем в костной тканиконтрольной группы в сроках 1 месяц, 209 HU через 3 месяца, достигая значенийнормальной кости, что существенно сокращает сроки ортопедической реабилитации иобеспечивает полное восстановление функции зубочелюстного аппарата.По данным морфологического исследования, через 6 месяцев в опытной группевыявлено, что полость бывшего дефекта заполнена трабекулярной костной тканью.
Уданной группы костная ткань имела значительно более зрелый характер, чем вконтрольной группе: трабекулы были более толстые, с правильной организациейкостной структуры, что говорит не только о количественном росте, влияющем наобъем кости, но и о качестве костной ткани.6. Проведенный анализ исследований по изучению гемодинамики пациентов с1.2.3.послеоперационными дефектами челюстей, позволяет заключить, что применениебиокомпозиции остеокондуктивного препарата в сочетании с аутологичнымиМСК десны значительно повышает эффективность репаративного остеогенеза, аразработанная методика может применятся для коррекции альвеолярной кости,необходимой для проведения адекватной ортопедической реабилитациипациентов.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИСоздана и апробирована методика малоинвазивного забора биоматериала, нетребующая привлечения специалиста другого профиля.