Автореферат (1173296), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Ахмедова(2012).Комплексное лечение пациентов обследуемой группы и группы сравнения дооперативного вмешательства включало: санацию полости рта, обучение пациентоврациональной гигиене, удаление зубных отложений, при необходимости пародонтологическое лечение.12При хирургическом лечении пациентов основных групп (1А, 2А, 3А)фотоактивируемую дезинфекцию зоны оперативного вмешательства проводилинепосредственнопередвыполнениемхирургическойманипуляции(периоперационно), повторно по её завершении (перед наложением швов), идвукратно - в послеоперационном периоде с интервалом в 2 дня (3-е сутки и 5-есутки после операции). Для проведения фотоактивируемой дезинфекции слизистуюоболочку густо смазывали фотосенсибилизатором высокой вязкости (толлонияхлорид), выдерживали до 60 секунд, затем облучали светом лампы Fotosan 360(Великобритания) в течение 40 секунд, используя широкий наконечник BLUNT сзатупленным концом и плотно прижимая его к поверхности десны или слизистойоболочки.Послеизотоническимпроведённойрастворомпроцедурыхлориданатрияфотосенсибилизаторсмывалиивыполнялинеобходимуюрезультатовпроведенасхирургическую операцию.Статистическаяобработкапомощьюкомпьютерной программы Biostat 9.0.
методом параметрической статистики сопределением средней величины, ошибки средней величины и вероятностиразличий Р (за достоверную разницу принимали значения P<0,05), а также спомощью непараметрического критерия Крускала-Уоллиса (для малой выборкиданных) или Манна-Уитни (p<0,05).СОДЕРЖАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯЭкспериментальное обоснование применения фотодинамической терапии длялечения пациентовОценку динамики роста микроорганизмов проводили в двух параллелях, чтоотражалось на графиках кривых роста бактериальных популяций для каждого видапри использовании ФДВ с фотосенсибилизатором толлония хлорид и без такового(контроль).
В качестве контроля оценивали рост соответствующего штаммаинтактных бактерий, до наступления логарифмической фаз роста, котораяпроисходила через 2-3 часа и достигала максимума с переходом в стационарнуюфазу роста через 12-18 часов от начала культивирования, в зависимости от вида13микроорганизма.Вовсехисследованныхслучаях(рис.1-2)показателистационарной фазы роста в контроле были достоверно выше, чем при ФДВ.На рис. 1 представлены кривые роста штамма клинического изолятаPorphyromonas gingivalis.
Кривая роста данного штамма в контроле (безвоздействия) характеризовалась медленным увеличением накопления биомассы втечение 16 часов, а затем резким переходом в фазу логарифмического роста двумяскачками концентрации в период 20 - 32 час (концентрация 2,0 OD) и 44 - 48 час(концентрация 2,2 OD), а затем переходом в стационарную фазу роста. Максимумроста с переходом в стационарную фазу отмечен через 48-50 час культивирования(концентрация составила 2,5 OD).
Этот максимум роста сохранялся в течение 96часов наблюдения, то есть культура продолжала воспроизводиться на высокомуровне. При ФДВ, напротив, наблюдали снижение оптической плотности на 2-2,5OD на протяжении всего периода наблюдения (96 час).Кривые роста штаммов дрожжевых грибов (рис. 2) отличались довольнокороткой лаг-фазой с переходом в фазу логарифмического роста на 6-й часкультивирования.Porphyromonas gingivalis3OD (λ=850 нм)2,521,510,500,3 14812 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92 96KFDTВремя, h14Рис.
1. Кривые роста штамма клинического изолята Porphyromonas gingivalisпри ФДВ (FDT) и в контроле (K)Рис. 2. Кривые роста штамма клинического изолята Candida krusei при ФДВ(FDT) и в контроле (K)Логарифмическая фаза проходила с 6 до 22 час с максимумом роста около 6,0OD. На 34 час культивирования наблюдался явный подъём кривой в стационарнойфазе до 8,0 OD. Через 66 час наблюдения культура продолжала воспроизводиться навысоком уровне. Кривая роста при ФДВ была существенно ниже (на 3,0-3,5 OD) иотличалась двугорбым характером логарифмической фазы.
При этом уровенькривой в стационарную фазу был существенно ниже, чем максимальнаяконцентрация, отмеченная в конце логарифмической фазы. Далее (срок наблюдения66 час) культура продолжала воспроизводиться, но на низком уровне с признакамитенденции к дальнейшему снижению.Таким образом, нам впервые удалось охарактеризовать кривые роста штаммов– клинических изолятов, выделенных при патологии полости рта и доказать, что15ФДВ приводит к существенным потерям в количестве жизнеспособных клетокмикробной популяции, которая далее воспроизводится, но на низком уровне(бактериостатический эффект).Клинико-лабораторная характеристика групп сравнения при амбулаторныххирургических операциях c применением фотоактивируемой дезинфекциираныСравнительная оценка клинических признаков воспаления в динамике послепроведения оперативных вмешательств в основных группах (1А, 2А и 3А), которымпроводили фотодинамическую обработку, и контрольных (1Б, 2Б и 3Б), получавшихтрадиционноелечение,выявиладостоверноесокращениесреднихсроковвоспалительной реакции по таким параметрам как болевой синдром, отёк мягкихтканей, реакция регионарных лимфатических узлов.
Течение послеоперационногопериода при ФДТ, характеризовалось более коротким периодом исчезновенияконтролируемыхклиническихсимптомовиотсутствиемвоспалительныхосложнений. В тоже время, в группах пациентов, получавших традиционноелечение, отмечено не только более длительное течение воспалительной реакции(более 5 суток), но также единичные осложнения, которые были устранены лишьпри изменении схемы лечения (назначения антибиотика с учётом чувствительностимикрофлоры).При сравнительной характеристике состава микробиоты воспалительногоочага при различных амбулаторных операциях установлены определённыеразличия.Так,относительнопридентальнойинтактныхзубахимплантации,ипослекотораявыполняласьсоответствующихпригигиеническихмероприятий, доминирующей флорой являлись представители стабилизирующихвидов, прежде всего, микроаэрофильные стрептококки (52%) и коринебактерии(23%).
При воспалительном процессе, связанном с дистопией или ретенцией третьихмоляров,существеннойпародонтопатогенныхбылавидовчастотавыделенияподдерживающих(28%),облигатно-анаэробныхперикоронит.Придлительном хроническом воспалении, приведшем к образованию кистогранулемы,выделялись не только пародонтопатогены (30%), но также актиномицеты (38%) и16дрожжевые грибы (12%).
Во всех группах проведение ФДТ способствовалоснижению микробной обсеменённости, вплоть до полной эрадикации некоторыхвидов, по сравнению с группами с традиционным лечением.Наиболее выраженные нарушения функционирования АОС отмечены намипри перикоронитах, минимальные – при проведении дентальной имплантации. Придентальной имплантации антиоксидантная ёмкость плазмы крови была пониженанезначительно (в 1,7 раза), в то время как при перикороните и кистогранулёме –примерно в 2 - 2,3 раза, что, может быть объяснено хроническим воспалительнымпроцессом у пациентов двух последних групп.
Установлены факторы рискавыражающиеся в снижении тиолдисульфидного коэффициента (менее 2,0±0,2),резком увеличении концентрации малонового диальдегида (выше 3,8±0,2 мкмоль/л)и увеличении антиоксидантной ёмкости плазмы крови (выше 30,2±0,2 %) на 3-исутки после операции (pk-u<0,01-0,02 по критерию Крускала-Уоллиса).Вместе с тем, при амбулаторных видах хирургического вмешательства, когдатравматизация тканей не значительна, а признаки оксидативных нарушений не резковыражены, ФДТ может рассматриваться как перспективный метод лечения, неприводящий к нарушениям функционирования АОС или, как было показано внашем исследовании, коррегирующий последствия операционного оксидативногостресса.При сравнительной оценке концентрации провоспалительного цитокиновустановлено следующее (табл.
2).Таблица 2Скрининг содержания цитокинов при различных видах амбулаторнойхирургической патологии (пкг/мл)ВидцитокинаIL-1βIL-4IL-6TNF-αINF-γIL-8СуммарноесодержаниеЗдоровыезубы4,6 ± 2,123,5 ± 2,30,02 ± 0,010,85 ± 0,5513,57 ± 2,1518,7 ± 5,013,57 ± 7,15Дентальнаяимплантация6,5 ± 2,321,2 ± 6,80,03 ± 0,010,96 ± 0,5010,9 ± 3,120,64 ± 6,063,88 ±34,5617Удаление3-го моляра64,7 ± 25,4**30,6 ± 3,03,68 ± 0,12**3,34 ± 0,58**62,4 ± 12,3**28,6 ± 1,8**436,82±89,1**Цистэктомия13,96 ± 3,31**27,5 ± 2,33,72± 0,22**1,92 ± 0,88**31,7 ± 3,1**23,7 ± 4,3**182,54±39,71**Примечание: ** достоверное увеличение значений по сравнению с контролем(здоровыми пациентами) (р<0,01 - для критерия Крускала-Уоллиса)При дентальной имплантации не отмечалось достоверного изменения IL-1β, вто время как в раневом отделяемом при цистэктомии среднее содержание IL-1βбыло статистически достоверно значимо примерно в 3 раза выше, а приперикороните – многократно выше ‒ 64,7 ± 25,4 пг/мл.
Это указывает на наличиерезкого локального воспаления, в отличие от операции дентальной имплантации.В отношении цитокина IL-4 статистически достоверной разницы показателейниводнойгруппесравненияневыявлено,авотношениидругогопровоспалительного цитокина IL-6 разница была незначительной и касалась группыпациентов с перикоронитом и кистогранулемой, то есть отмечалась прихроническом воспалительном процессе.Средние уровни содержания TNF-α оказались диагностически значимыми длягруппы пациентов с ретинированным 3-м моляром (перикоронит) и цистэктомией(кистогранулёма) и были достоверно выше, чем при имплантации. При удалении 3го моляра и цистэктомии концентрация TNF-α была почти в 2 и 4 раза выше, чем уздоровых зубов и в области стабильных имплантатов – в 3,5 (р < 0,05).Противовоспалительные цитокины - IL-8 и INF-γ подтверждали картинухронического воспаления и были статистически значимо повышены только вгруппах пациентов с перикоронитом и кистогранулемой.Важным вопросом, который ранее не рассматривался другими авторами,являлась оценка динамики содержания цитокинов в процессе проведениякомплексного лечения в послеоперационном периоде (табл.