Автореферат (1154881), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Полученные результаты внедреныв лечебный процесс на базе ФГБУ «ЦКБ с поликлиникой», а также используютсяв учебном процессе и дальнейшее работе на кафедре травматологии и ортопедиина теоретических занятиях с клиническими ординаторами и аспирантами.Данные полученные в результате настоящего несравнительного клиническогоисследования послужили основой для проведения дальнейших сравнительныхклинических исследований.Основные положения, выносимые на защитуИспользование интраартикулярного введения стромально - васкулярнойфракции у пациентов с повреждением суставного хряща коленного суставаявляется безопасной методикой, и оказывает положительное влияние на течениезаболевания.6Стромально-васкулярная фракция оказывает выраженный терапевтическийэффект при дегенеративно-дистрофических заболеваниях суставного хрящаколенного сустава.
Однако степень выраженности и продолжительностьтерапевтического эффекта напрямую коррелирует со степенью повреждениясуставного хряща. Наибольшую эффективность данная методика показала прилечении пациентов с ОА 1-2 степени. У пациентов с ОА 3 степени наблюдаетсявыраженный эффект от лечения, но его продолжительность значительно нижечем у пациентов с ОА 1-2 степени.Стромально-васкулярнаяфракцияоказываетвыраженныйпротивовоспалительный эффект на ткани коленного сустава, не зависимо отстепени его проявления на момент начала исследования.Установленавысокаяудовлетворенностьбольныхрезультатамипроведенного лечения, улучшение функции коленного сустава и повышениеуровня качества жизни пациентов после внутрисуставного введения СВФ.Публикации.
По теме диссертации опубликовано 5 печатных работы, изних 3 - публикации в рецензируемых научных журналах, рекомендованныхВысшей аттестационной комиссией Министерства образования РФ дляпубликаций, основных результатов диссертаций на соискание ученой степеникандидата медицинских наук.Апробация работы. Основные положения работы представлены на кругломстоле «Регенеративная медицина» 21.12.2016 Клиническая больница УДП РФ г.Москва, I съезд травматологов-ортопедов Центрального федерального округа г.Смоленск 14-15 сентября 2017г., III Национальный конгресс по регенеративноймедицине г. Москва, МГУ 15-18 Ноября 2017г., III научно-практическаяконференция «Перспективы развития технологий регенеративной медицины» сучастием российских изарубежных специалистов г. Оренбург 8-9 февраля2018г., XI всероссийский съезд травматологов-ортопедов 11-13 апреля г.СанктПетербург.Личный вклад автора.
Автором лично проводился отбор пациентов дляучастия в исследовании, проверялось соответствие пациентов критериямвключения и невключения в исследование. Проводилось наблюдение за7пациентов в течение всего исследования, а также сбор и документация всехданных полученных от пациента на всех контрольных визитах (физикальныйосмотр, сбор анамнеза, анализ и оценка лабораторных данных и данныхинструментальных методов исследования). Проводилась процедура введенияСВФ в коленный сустав.
Проводился обсчет, статистическая обработка и анализвсех данных занесенных в ИРК.Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 151странице, состоит из введения, 4 глав, выводов, практических рекомендаций,перечнясокращенийиусловныхобозначенийиспискалитературы,включающего 194 источника, из них 194 иностранные работы.
Работаиллюстрирована 50 рисунками и 1 таблицей.Содержание работыРабота проводится в формате инициативного многоцентрового открытогонесравнительного клинического исследования, фаза IIb, протокол № RU-LYOOA2-11-17. Исследование соответствует этическим стандартам комитетов побиомедицинской этике, разработанным в соответствии с Хельсинкскойдекларацией, и правилам Надлежащей клинической практики (ГОСТ Р 523792005).ПакетмеждисциплинарногодокументовКомитетаполучилпоодобрениеэтическойэкспертизеНезависимогоклиническихисследований (протокол № 07 от 22.04.2016). Изучаемый метод исследования Внутрисуставное введение аутологичных регенеративных клеток жировойткани.За период с 2015 по 2018 на клинических базах, где проводилосьисследование было пролечено 48 пациентов в соответствии с протоколомисследования.
Возраст пациентов составил 56 (45-65) лет, при этом пациентов ввозрасте 20-39 лет было 10 (20,1%), пациентов в возрасте 40-50 лет было 8(16,6%), пациентов в возрасте 50-65 лет было 18 (37,5%), пациентов в возрасте65-85 лет было 12 (25,0%) .При классификации степени ОА использовалась классификация порентгенологическим признакам Kellgren and Lawrence.8В зависимости отиндекса массы тела (BMI) пациенты были разделены на 4 группы: 18,5—24,99норма 6 (12,5%), 25—30избыточная масса тела (предожирение) 21 (43,7%),ожирение первой степени 8 (25,0%), 35—40 ожирение второй30—35степени 6 (18,8%), больных с ИМТ 40 и более – ожирением третьей степени(морбидным) в исследование включено не было.Перед началом лечения, каждый пациент проверялся на соответствиекритериям включения и не включения, после чего проводилось подписаниеинформированного согласияСогласно протоколу исследования каждый пациент прошел 12 визитов, гдевизит № -5 – скрининг и включение пациента, визит № -4 – физикальноеобследование пациента и выполнение артроскопической санации коленногосустава.
Артроскопическая санацияколенногосустава,привключала в себя осмотр всех отделовналичиидегенеративно-дистрофическихилипосттравматических повреждений менисков выполняется их экономная резекцияс последующей обработкой краев дефекта шейвером и аблятором. Визит № -3, -2–перевязкапослеоперационныхран,Визит№-1–перевязкапослеоперационных ран, снятие послеоперационных швов, Визит № 0контрольный осмотр перед процедурой липосакции, дозированное увеличениенагрузки, Визит№1 -манипуляция (забор жировой ткани, выделение ипаспортизация аутологичных регенеративных клеток из жировой ткани,интраартикулярное введение аутологичных регенеративных клеток жировойткани).Забор биоматериала.
Жировая ткань забирается методом стандартнойшприцевой тумесцентной липосакции. Липосакция проводилась в условияхчистойперевязочной.Областьзаборажировойтканипредварительноинфильтрировалась раствором Кляйна содержащим адреналин, лидокаин ифизиологический раствор через инфильтрационную канюлю диаметром 2 мм,длиной 30 см. Липоаспират собирался в стерильные шприцы объемом 50 мл, вкоторых производилось его отстаивание до полного разделения на фракции.Объем жировой ткани составлял 150 (110-150) мл.9Получение аутологичных регенеративных клеток жировой ткани.
Вусловиях ламинарного шкафа жировую ткань переносили из шприцев встерильную одноразовую емкость и промывали 3 раза раствором Хартмана(Hemofarm, Сербия). Для ферментативной обработки в емкость добавляли 0,15%раствор коллагеназы 2 типа (Sigma, США) в количестве, равном объему отмытойжировой ткани. Емкость закрывали крышкой и инкубировали на шейкере втечение 30 минут при 37.0С.
В дальнейшем полученную суспензию клетокфильтровали через сито с диаметром пор 100 мкм, переносили в стерильныепробирки и 3 раза отмывали от коллагеназы раствором Хартмана споследующим центрифугированием в течение 7 минут при 300g. Затемклеточный осадок растворяли в 5 мл раствора Хартмана и отбирали 0,5 мл дляпаспортизации образца. Оставшиеся 4,5 мл суспензии клеток переносили встерильный шприц, который маркировали и помещали в стерильную вторичнуюупаковку.ВнутрисуставноеположениипациентавведениеСВФ.Манипуляциюлежаспине.Посленапроизводилитрехкратнойвобработкиоперационного поля (области коленного сустава, нижней трети бедра и верхнейтрети голени) растворами антисептиков (йодинол, спирт), выполняли анестезиюкожи и подкожной клетчатки в нижне-латеральной области коленного сустава2,0 мл 0,5% раствора новокаина.
Далее через прокол нижне-латеральнымдоступом иглой 20G (0,9*70 мм.) в наружный отдел полости коленного суставапроизводили введение 4,5 мл суспензии СВФ. После удаления иглынакладывалиасептическуюификсирующуюповязки.Дополнительнуюиммобилизацию не проводили.
Пациент соблюдал ограничительный режимфизической активности в течении 7 дней с момента введения, далее велпривычный для него образ жизни.Паспортизация образца СВФ. Паспортизация образцов производилась всоответствии с разработанной Стандартной операционной процедурой ивключала в себя обязательное описание общего числа клеток, жизнеспособностии субпопуляционного состава.10Подсчет клеток проводили по стандартной методике с использованиемгемоцитометраиокраскойтрипановымсинимдляопределенияжизнеспособности. Общее число ядросодержащих клеток составляло 36 (22-54)млн, жизнеспособность более 92%.
Количество выделенных клеток на единицуобъема жировой ткани составило 0,273(0,207-0,400) млн/мл.Для определения субпопуляционного состава полученных клеточныхпродуктов суспензию клеток окрашивали флюорохромно мечеными антителамик поверхностным маркерам (CD3, 4, 14, 31, 34, 45, 90, 105, 146, все - BectonDickinson, США) в соответствии с инструкциями производителя.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
