Автореферат (1154690), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Получены новые данные о биостимулирующемдействии трансплантации собственных тканей организма. Выявленыособенности реализации дистантного стимулирующего действия АТПКЛ намикроциркуляцию в условиях сохраненной иннервации, а также раскрытымеханизмы ее саногенетических эффектов при повреждении нервного ствола.Результатыисследованиядополняютконцепциюиспользованияэлектростимуляции периферических нервов при травмах новыми данными,касающимисяособенностейрегенеративныхэффектовуказанногофизиотерапевтического воздействия в сочетании с биостимуляцией,осуществляемой методом трансплантации собственных тканей организма.Полученные данные о регенеративном эффекте АТПКЛ и ее комбинации с ПЭСнервного ствола при нейрорафии экспериментально обосновываютцелесообразность клинической апробации данного способа стимуляциирепаративных процессов у пациентов с повреждениями периферическихнервов.6Методология и методы исследования.
Регенеративный эффект идистантное стимулирующее действие на микроциркуляцию АТПКЛ и еекомбинации с ПЭС, а также механизмы их реализации были изучены наэкспериментальной модели повреждения седалищного нерва крысы. Привыполнении работы был использован комплекс функциональных,биохимическихигистоморфологическихметодовисследования.Функциональные методы исследования включали лазерную допплеровскуюфлоуметрию (ЛДФ) и электронейромиографию (ЭНМГ). Биохимическиеисследования концентрации нейроспецифических белков и фактора ростаэндотелия сосудов (VEGF) в сыворотке крови были выполнены методомиммуноферментного анализа. Гистоморфологические исследования включалимикроскопию и морфометрию препаратов седалищного нерва и зоны АТПКЛ.Положения, выносимые на защиту:1.
Аутотрансплантация полнослойного кожного лоскута в межлопаточнойобласти при перерезке и нейрорафии седалищного нерва в условияхэксперимента стимулирует микроциркуляцию в пораженной конечности ирегенерацию нервных волокон.2. Прямая электростимуляция седалищного нерва после нейрорафии вусловиях эксперимента усиливает регенеративный эффект аутотрансплантацииполнослойного кожного лоскута в межлопаточной области, увеличиваяинтенсивность реиннервации мышечных волокон.3.
Регенеративное действие аутотрансплантации полнослойного кожноголоскута в межлопаточной области при перерезке и нейрорафии седалищногонерва в условиях эксперимента реализуется за счет комплекса механизмов,включающего эндотелий-зависимую дилатацию и снижение нейрогенноготонуса микрососудов пораженной области, а также стимуляцию продукциифакторов роста – нейротрофина 3 и фактора роста эндотелия сосудов.Степень достоверности результатов исследования. Достоверностьрезультатов исследования определяется достаточным объемом выборкиэкспериментальных животных (92 белых крысы), применением современныхинформативных методик, выполненных с использованием сертифицированногооборудования и реактивов и включающих комплекс функциональных ибиохимических методов в сочетании с морфологической верификациейпроцесса регенерации.
В работе использованы непараметрические методыстатистической обработки в соответствии с характеристиками вариационныхрядов изучаемых показателей.7Апробация результатов исследования. Основные положения работыдоложены и обсуждены на: научно-практической конференции молодыхучёных, посвящённой 75-летию профессора В.Г. Нинеля «Вклад молодыхучёных в развитие травматологии, ортопедии и нейрохирургии (Саратов, 2014);заседании регионального общества травматологов-ортопедов (Саратов, 2014);Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых истудентов с международным участием «Медицинская весна 2015» (Москва,2015); X Международной конференции: Микроциркуляция и гемореология.Клиника и эксперимент: из лаборатории к постели больного (Ярославль, 2015);заседании регионального общества травматологов-ортопедов (Саратов, 2015);Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 70-летиюСарНИИТО «Травматология и ортопедия в России: традиции и инновации»(Саратов, 2015); VIII Всероссийской научно-практической конференциимолодых ученых с международным участием «Цивьяновские чтения»(Новосибирск, 2015); III Межрегиональной конференции с международнымучастием «Наследственная и приобретенная патология свертывания крови тромбозы и кровотечения: диагностика, профилактика, лечение, экономика»(Саратов, 2016); Международной научно-практической конференции «Наука,образование, общество» (Тамбов, 2016); XIV Международной заочной научнопрактической конференции «Современные тенденции развития науки итехнологий» (Белгород, 2016); научно-практической конференции «Классика иинновации в травматологии и ортопедии», посвященной 75-летию профессораА.П.
Барабаша (Саратов, 2016); 3-й Всемирный Конгресс «Controversies inThrombosis and Hemostasis» совместно с 8-й Всероссийской конференцией поклинической гемостазиологии и гемореологии (Москва, 2016).Публикации результатов исследования. По теме диссертацииопубликовано 14 научных работ, из них 5 в журналах, включенных в переченьпериодических научных и научно-практических изданий, рекомендованныхВАК Минобрнауки РФ для публикации результатов диссертационногоисследования на соискание ученой степени кандидата медицинских наук;получено 2 патента РФ на изобретение и полезную модель, а такжесвидетельство государственной регистрации программы для ЭВМ.Внедрение результатов исследования.
Полученные результатыиспользуются в процессе преподавания на кафедре патологической физиологииимени А.А. Богомольца и кафедре гистологии, цитологии и эмбриологииФГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России,8курса патологической физиологии на кафедре медико-биологическихдисциплин Филиала частного учреждения образовательной организациивысшего образования «Медицинский университет «Реавиз» в городе Саратове,научно-исследовательском процессе в ФГБУ «СарНИИТО» Минздрава России.Личный вклад автора.
Автором лично выполнялись все оперативныевмешательства; проводились функциональные исследования, забор материаладля биохимических и гистоморфологических исследований; анализ,статистическая обработка, описание и обобщение результатов исследования.Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 153 страницемашинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главыматериалов и методов, 3 глав результатов собственных исследований,заключения и выводов.
Работа иллюстрирована 11 рисунками и 20 таблицами.Библиографический список содержит 282 литературных источников, из них 72отечественных и 210 зарубежных.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯИсследования проведены на 92 белых нелинейных крысах-самцах массой180-220 г, разделенных на 5 групп: 1-я группа – ложнооперированныеживотные, которым выполнялся доступ к седалищному нерву без егопересечения; 2-я группа – животные, которым проводилось пересечение ипоследующая нейрорафия седалищного нерва; 3-я группа – животные, которымвыполнялась нейрорафия и АТПКЛ в межлопаточной области; 4-я группа –животные, которым одновременно с нейрорафией выполнялась АТПКЛ иимплантация электродов с последующей ПЭС седалищного нерва; 5-я группа –животные без повреждения нервных стволов, которым выполнялась АТПКЛ вмежлопаточной области.При проведении исследования соблюдались этические нормы,предусмотренные действующим законодательством РФ и международнымиконвенциями по защите прав животных.
Перед выполнением всех манипуляцийкрысам вводилась внутримышечно комбинация золетила (фирма «Virbac»,Франция) в дозе 0,1 мл/кг и ксилазина (фирма «Interchemie», Нидерланды) вдозе 1 мг/кг для достижения наркоза.Нейрорафияосуществляласьнепосредственнопослеперерезкиседалищного нерва на уровне средней трети бедра путем наложенияэпиневральных швов с применением специально разработанного устройства9для интраоперационной фиксации периферического нерва (Патент RUS145447), атравматических игл и шовного материала 7/0 или 8/0 USP.Для выполнения АТПКЛ в межлопаточной области в асептическихусловиях иссекали полнослойный кожный лоскут размером 0,1% от площадиповерхности тела. После обработки 3%-ным раствором Н2О2, 70%-ным –C2Н5ОН и 0,9%-ным – NaCl лоскут помещали в подкожный карман,сформированный в ране. Для фиксации лоскута рана ушивалась послойнонаглухо.Для выполнения ПЭС активные концы электродов подшивалиэпиневрально на расстоянии порядка 10 мм выше и ниже зоны нейрорафии кпроксимальному и дистальному отделам поврежденного нерва, соответственнорасстояние между активными концами электродов составляло около 20 мм.Стимуляцию нервного ствола осуществляли в период с 3-х по 21-е сутки послепроведения нейрорафии при помощи аппарата «Миоволна» («ТРИМА», Россия)с амплитудой стимулирующего тока 0,5-2,0 мА, частотой 25-30 Гц,длительностью 0,1мсбиполярнымиэлектрическимиимпульсамипрямоугольной формы в течение 20 минут 3 раза в день.