Автореферат (1151594), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Полученные данныеобработаны статистически на ПЭВМ.Результаты собственных исследований изложены убедительно ипоследовательно и отражают основное содержание диссертационной работы.Практические предложения аргументированы.Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждены на:международных (XXII съезде Физиологического общества им.
И.П.Павлова, 1620 сентября 2013 г. (г. Волгоград), межвузовских (посвященной 140-летиюКазанской ГАВМ имени Н.Э. Баумана, 30-31 мая 2013 г. (г. Казань) конференцияхи межкафедральных совещаниях, 2014, 2015 гг. (г. Москва).Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ‚ из них5 в рецензируемых изданиях‚ рекомендованных ВАК РФ.Структура и объем диссертации.
Диссертация изложена на 1562страницах компьютерного текста и состоит из общей характеристики работы‚обзора литературы‚ материала и методики исследований‚ результатовсобственных исследований‚ обсуждения результатов, выводов‚ практическихпредложений‚ списка литературы‚ включающего 246 источника‚ в том числе 55зарубежных, и приложения (16 стр.). Работа иллюстрирована 26 таблицами и 7рисунками.2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙРабота выполнена в 2008-2014 г.г.
на кафедре физиологии, фармакологии итоксикологии им. А.Н. Голикова и И.Е. Мозгова ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВАимени К.И. Скрябина. Исследования были проведены на базе племзавода"Салтыковский" Балашихинского района Московской области в соответствии спланами научных исследований «Разработка материалов для создания сенсорныхэлементов устройств оптического контроля химических веществ» в рамкахгосударственного контракта № 02.434.11.2039 от 09.11.2005 г., а также по проектуФЦНТП "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развитиянаучно-технического комплекса в России на 2007-2012 годы" № 02.523.12.3009 от09.08.2007 г., осуществляемых в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ.6Объекты исследованиявозрастные группыIIIIIIIVVстандартная норка1 мес.2 мес.3 мес.7 мес.12 мес.Методы исследованийМорфобиологическиеФизиолого-биохимическиекровькожаволосФизико-химическиекровьрационыпитанияВнедрение результатов научных исследованийУчебный процесс:ФГБОУ ВО «Московскаягосударственная академияветеринарной медицины ибиотехнологии- МВА им.К.И.Скрябина»Учебный процесс:ФГБОУ ВО «Орловскийгосударственныйаграрный университет»Учебный процесс:ФГБОУ ВО «Казанскаягосударственная академияветеринарной медицины им.Н.Э.Баумана»Рисунок 1.
Схема экспериментаТаблица 1. Характер, объекты и объемы исследования№п/п123456Наименование серии опытовЗакономерности изменения минеральногосостава кровив постнатальномонтогенезеЗакономерности изменения минеральногосоставакожногопокровавпостнатальном онтогенезеЗакономерности изменения минеральногосостававолосяногопокровавпостнатальном онтогенезеУстановление межвозрастных различийминерального состава кровиУстановление межвозрастных различийминеральногосоставакожногоиволосяного покрововОбщее количествочислочисловозрастных зверейгруппв серии:биохимическиеанализы45кровь100кожа волос-45-100--55--12545100--45-1001001251001001257Исследования проводились в соответствии со схемой (рисунок 1).
Объемисследований представлен в таблице 1.Материалы исследований. Исследования были проведены нафизиологически здоровых стандартных норках, принадлежавших зверохозяйству"Салтыковский", Балашихинского района Московской области. В ходеэксперимента были использованы пушные звери, из которых по принципуусловных аналогов сформировали группы в соответствии с породой, живоймассой, состоянием кожного и волосяного покровов, морфологическихпоказателей крови, возрастом.Для выполнения поставленных задач пробы цельной крови, биосубстратыкожного покрова и волоса были взяты у зверей в разные возрасты раннегопостнатального онтогенеза: в переходную фазу - у 30-ти сут.; в фазыестественного питания – у 60-сут.
и 90 сут. (становление естественного питания);- у 7-ми мес. (наступление половой зрелости); - у 12-ти мес. (наступление зрелоготела), т.е. в сроки, которые наиболее характеризуют морфофизиологическоестановление организма животного, его органов, тканей и систем.
В возрасте от 2-хдо 3-х мес. значительно увеличиваются размеры животного, всех его органов итканей, массы тела; стабилизируется морфобиохимические показатели крови,созревает первичный и формируется вторичный волосяной покров, в 3 мес.возрасте в кожном покрове созревает вторичный волосяной покров, протекаетлинька первичного и происходит закладка зимнего волосяного покрова; ввозрасте 7 мес.уже полностью сформированы все органы и ткани,стабилизируются все обменные процессы в организме, происходит созреваниезимнего волосяного покрова; в возрасте 12 мес. заканчивается физиологическоесозревание всего организма животного, осуществляется весенняя линька. Такимобразом, были сформированы возрастные группы животных от 1 мес.
до года сучетом наиболее важных фаз постнатального развития как дляморфофизиологического становления организма животного в целом, так и длякожно-волосяного покрова, в частности.Звери находились в типовых шедах, при принятых условиях содержания (ссоблюдением ветеринарных и зоотехнических требований). В кормлениистандартных норок был использован мясо-рыбный тип кормления, составкоторого разработан на основе многочисленных научно-хозяйственных ибалансовых опытов в НИИПЗК. Составы кормовых рационов, используемые вразные фазы постнатального онтогенеза стандартных норок в зависимости от ихфизиологического состояния и сезона года, были нормированы по соотношениюпереваримых белка, жира и углеводов в расчете на 418 кДж обменной энергии ибыли исследованы на минеральный состав (Н.Ш.
Перельдик и др. 1987; БалакиревН.А. и др. 2007).Работу с экспериментальными животными выполняли в соответствии с«Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных»(приложение к приказу министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. №7550) и Хельсинской Декларацией 2000 г.Методы исследований.В работе были использованы физиологическиздоровые звери, масса тела которых, а также гематологические показатели крови8(гемоглобин, общий белок, соотношение белковых фракций в сыворотке крови)находились в пределах нормы и соответствовали возрасту (Берестов В.А., 1971).Исследование минерального состава пробы цельной крови, биосубстратовкожного и волосяного покровов были взяты у зверей в указанные выше возрасты.Пробы крови у стандартных норок забирали натощак из кончика хвоста илипальца.
После забора и исследования крови звери указанного возраста былиубиты,шкурки сняты, пробированы и запаяны в полиэтиленовые пакеты. Согузка парной шкурки со стороны мездры с помощью просечки были взяты пробыкожи. Волосяной покров у щенков месячного возраста брали со всей шкурки,старше 2-х месячного возраста – только с огузка. Предварительная подготовкапроб волос к анализу включала тщательную очистку образцов волосяного покроваот загрязнений, затем волосы выщипывали и хранили в бумажном пакете прикомнатной температуре.
Отбор корма (фарша) проводили после забора крови упушных зверей перед кормлением. Фарш частями из разных мест отбирали водноразовые чашки Петри. Навеску фарша (1,0- 1,5г) помещали вофторопластовые цилиндры и выдерживали под вытяжкой до полного удаленияводы. В течение выдержки под вытяжкой несколько раз взвешивали пробу идоводили до постоянной массы. После чего проводили минерализацию пробы.Отбор, хранение, подготовку проб крови, биосубстратов кожного иволосяного покровов, высушенного фарша, их минерализацию и исследованиеминерального состава проводили согласно «Методическим указаниям:Определение химических элементов в биологических средах и препаратахметодами АЭС- ИСП и ИСП-МС» (МУК 4.1.11482-03 и МУК4.1.11483-03);Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2003.Минеральные элементы биосубстратов волос и кожи: Fe; K; Ca; Co; Mg, Mn,Cu, Na, P, Cr, Zn определяли атомной эмиссионной спектрометрией с индуктивносвязанной аргоновой плазмой на приборе Optima 2000 DM (Perkin-Elmer, USA) вдиапазоне 165-800 нм; элементы: Se и I - масс-спектрометрией с индуктивносвязанной аргоновой плазмой на квадрупольном масс-спектрометре ELAN-9000(Perkin-Elmer, USA).
Обработку результатов измерений проводили согласноГОСТ 8.207.Биометрическая обработка данных. Данные, полученные в опытах, подвергалибиометрической обработке (И.А. Ойвин, 1960; Е.К. Меркурьева, 1970; Г.Ф. Лакин, 1990) свычислением общепринятых констант с использованием программного обеспечения MS Office2003, с использованием пакета программ Microsoft Office 2003, Clarity Chrom 305.В работе приняты следующие условные обозначения: достоверность обозначалась: * - р <0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001, ٭- различия недостоверны при р≤0,05; проводили различияпо минеральным составам рационов и волосяных покровов между возрастными группаминорок: 2-мес и 1-мес – одна серия звездочек; 3-мес, 2-мес и 1-мес -две серии звездочек, 7-мес,3-мес, 2-мес и 1-мес - три серии звездочек, 12-мес (последний столбец таблицы), 7-мес, 3-мес,2-мес и 1-мес - четыре серии звездочек; проводили различия по минеральным составам крови икожных покровов между возрастными группами норок: 3-мес и 1-мес - одна серия звездочек,7-мес, 3-мес и 1-мес - две серии звездочек, 12-мес (последний столбец таблицы), 7-мес, 3-мес и1-мес - три серии звездочек; корреляционная связь обозначалась: слабая положительнаякорреляционная связь между параметрами (↑), если коэффициент корреляции r<0,3; слабаяотрицательная (↓), если r>-0,3; средняя положительная корреляционная связь (↑↑), есликоэффициент корреляции 0,3< r< 0,69; средняя отрицательная (↓↓), если -0,69< r< -0,3; сильная9положительная корреляционная связь (↑↑↑), если r> 0,69; сильная отрицательнаякорреляционная связь (↓↓↓), если r<-0,69.
Для средней и сильной корреляционной связи(р<0,05; р<0,01, р<0,001) значения корреляционного коэффициента достоверны. ИСП-МС масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой; АЭС-ИСП - атомно-эмиссионнаяспектрометрия с индуктивно-связанной плазмой; сут – сутки; мес – месяц.