Автореферат (1151591), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Общие закономерностипроявляются в этапности формирования их структуры с прохождением стадиймиобластической организации, мышечных трубочек и мышечных волокон. Кчетырнадцатым суткам оформляются пучки мышечных волокон, а к моментувывода цыплят в мышечных волокнах обнаруживается поперечнаяисчерченность. В постэмбриональный период тенденция в развитии мышцхарактеризуется утолщением мышечных волокон и их пучков в соответствиис увеличением срока онтогенеза. Площадь мышечной ткани также возрастаетпропорционально возрасту птицы. Толщина соединительнотканныхкомпонентов мышечной ткани (эндомизия и перимизия) в онтогенезеварьирует.Показано, что морфологические отличия скелетных мышц у птицымясных и яичных форм выражены лишь на определенных этапах онтогенеза(8-е сутки эмбриогенеза и первые сутки после вывода цыплят).5Незначительные межпородные отличия в ходе гистогенеза скелетных мышцмогут свидетельствовать о генетически детерминированной видовойстабильности морфогенеза скелетных мышц у кур.Выявлены корреляции морфологических данных и показателейинтенсивности эмбрионального метаболизма оксида азота по соотношениюсодержания нитрата в аллантоисе и доноров оксида азота в амнионе.Теоретическая и практическая значимость исследованийУстановлены закономерности эмбриогенеза и постэмбриональногоразвития поверхностной грудной мышцы и прямой головки четырехглавоймышцы бедра у кур мясного и яичного направлений продуктивности.Особенности микроморфологической организации скелетных мышц взависимости от хозяйственного использования птицы обнаружены на восьмыесутки эмбриогенеза по показателю площади мышечной ткани (яичные формыопережают мясные) и на первые сутки после вывода цыплят по количествумышечных волокон в поле зрения (выявлена противоположная зависимость).Выявленные особенности могут явиться морфологическими критериямиоценки направления продуктивности изучаемой птицы при проведениианалогичных исследований.Выявленыкорреляциимеждупоказателеминтенсивностиэмбрионального метаболизма оксида азота и морфологическимиособенностями гистогенеза скелетных мышц у мясных и яичных кур.На основании установленных различий гистогенеза скелетных мышц иинтенсивности метаболизма NO у мясных и яичных форм кур разработанспособ прогнозирования мясной продуктивности птицы, который может бытьиспользован для селекционного отбора, а также поддержания чистоты породы,линии, кросса.Методология и методы исследованияДля изучения особенностей развития и строения скелетных мышц уэмбрионов и цыплят кур разных направлений продуктивности, а такжевыявления корреляций гистогенеза мышц с интенсивностью эмбриональногометаболизма оксида азота использован комплексный методический подход,включающий анатомическое препарирование, световую микроскопию,микроскопическую морфометрию, биохимические исследования метаболизмаоксида азота, основанные на определении доноров и метаболитов NO, истатистическую обработку полученных данных.Положения, выносимые на защиту1.
Гистогенез скелетных мышц мясных и яичных кур как отражениеобщих закономерностей миогенеза вида и его породных специфическихпризнаков на определенных этапах онтогенеза.2. В онтогенезе прямая головка четырехглавой мышцы бедра по темпамформирования опережает поверхностную грудную мышцу, что может быть6связано с особенностями биомеханики двигательного поведения изучаемоговида птиц.3. Площадь мышечной ткани на 8-е сутки эмбриогенеза и количествомышечных волокон в поле зрения на 1-е сутки постэмбрионального развития— гистологические критерии оценки направления продуктивности изучаемойптицы.4.
Интенсивность эмбрионального метаболизма NO как индикатор ростаи развития эмбриона, позволяющий прогнозировать продуктивный потенциали технологическую форму использования взрослой птицы.Степень достоверности, апробация и публикация результатовисследованийРабота выполнена на 1580 эмбрионах и цыплят кур мясного направленияпродуктивности (кроссы Кобб-500, Смена-8, отцовская линия кросса Смена-8(Б-56) «Корниш», породы Малайская бойцовая, Куланги) и яичногонаправления продуктивности (кросс Хайсекс белый, породы Юрловскаяголосистая, Андалузская голубая и Орловская ситцевая, материнская линиякросса Смена-8 (Б-79) «Плимутрок»).
В работе использован комплексныйметодический подход, включающий анатомические, гистологические,микроморфометрические и биохимические методы исследований, а такжестатистическую обработку полученных данных.Материалы исследований представлены на 55-ой Конференции молодыхученых и аспирантов по птицеводству ФГБНУ ВНИТИП (СергиевПосад, 2014), научно-практической конференции молодых ученых испециалистов ФГБОУ ВПО МГАВМиБ «Актуальные вопросы ветеринарии иветеринарной биологии» (Москва, 2014), Международной учебнометодической и научно-практической конференции «Актуальные проблемыветеринарной медицины, зоотехнии и биотехнологии», посвященной 95летию со дня основания ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2014), 23-емМосковском международном ветеринарном конгрессе, в секции молодыхученых и студентов (Москва, 2015), научно-практической конференцииФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К.И.
Скрябина «Актуальные проблемыветеринарной медицины, зоотехнии и биотехнологии» (Москва, 2015).По результатам исследования опубликовано 13 научных статей, из них8 — в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.Объем и структура диссертацииРукопись диссертации изложена на 158 страницах машинописноготекста (без учета приложений), иллюстрирована 68 рисунками, 20 таблицами,состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования,результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения,выводов, рекомендаций по использованию научных выводов, сведений опрактическом использовании результатов. Список литературы включает 219источников, из них 99 отечественных и 120 зарубежных.7СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯМатериалы и методы исследованияРабота выполнена на кафедре анатомии и гистологии животных именипрофессора А.Ф. Климова Федерального государственного бюджетногообразовательногоучреждениявысшегообразования«Московскаягосударственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВАимени К.И.
Скрябина» и на базе отдела технологии Федеральногогосударственного бюджетного научного учреждения Федеральный научныйцентр «Всероссийский научно-исследовательский и технологическийинститут птицеводства» Российской академии наук в период с 2012 по 2016годы.Объектами исследования служили эмбрионы и цыплята кур мясного ияичного направлений продуктивности. Материалом для исследования явилисьповерхностная грудная мышца и прямая головка четырехглавой мышцы бедра.Характеристика исследованного материала и методов исследованияпредставлена в таблице 1.Таблица 1Характеристика материала и методов исследований, шт.1351359220382Кобб-5001351359220382Б-561501509220412Малайская бойцовая1351359220382Куланги1351359220382Итого:ВесовыепоказателиСмена-8СветоваямикроскопиягистологическихсрезовБиохимическиеисследованияметаболизма NOМикроскопическаяморфометрияМетоды исследованийПорода, линия, кроссМясные породыЯичные породыБ-791501509220412Андалузская голубая1351359220382Орловская ситцевая1351359220382Юрловская голосистая1351359220382Хайсекс белый1351359220382Всего:138013809202003880Исследован материал от 1580 особей, из них гистологическимиметодами (n=460) в сроки: 8, 10, 14, 17, 20 суток эмбрионального и 1, 8, 20,29, 50 сутки постэмбрионального развития; биохимическими методами8(n=920) на 1-20 сутки эмбрионального развития и 7, 20, 38 суткипостэмбрионального развития; весовые показатели особей (n=200)определяли в сроки 1, 14, 28, 35 сутки постэмбрионального развития.Инкубацию яиц проводили в инкубаторе ИПХ-10 в соответствии срекомендациями ВНИТИП (Ройтер Я.С.
и др., 2005) с овоскопическимконтролем развития зародыша на 6 и 9 сутки. Содержание молодняка былоклеточным, кормление осуществляли в соответствии с рекомендациямиВНИТИП 2014 г. (Лукашенко В.С., Кавтарашвили А.Ш., 2015). Цыплятаполучали корм ПК-5, их содержали в клетках типа КБН по 20 голов в 1 клеткедо 10 дня и по 8-10 голов с 10 по 50 день.Содержание, уход и эвтаназию осуществляли согласно требованиямприказов МЗ СССР № 755 от 12.08.1977, № 701 от 27.07.1978, «Санитарныхправил по устройству, оборудованию и содержанию экспериментальнобиологических клиник (вивариев)», «Европейской конвенции по защитепозвоночных животных, используемых для экспериментальных и другихнаучных целей» (1986) и «Хельсинской декларации всемирной медицинскойассоциации» (1964).В работе использовали комплексный методический подход.Гистологические исследования.
Материал фиксировали в 10%растворе формалина, после промывки и обезвоживания в спиртах восходящихконцентраций заливали в парафин по общепринятой методике. Срезыготовили на ротационном автоматизированном микротоме HM-325 (Microminternational GmbH, Germany) и окрашивали гематоксилином и эозином длявыявления общей морфологической картины, а также пикрофуксином ифукселином для дифференцировки мышечной и соединительной ткани(Саркисов Д.С., Перов Ю.Л., 1996). Изучение гистологических срезов имикрофотосъемку проводили при помощи светового микроскопа Jenamed-2(Carl Zeiss, Jena, Germany), совмещённого с системой цифровой микроскопииImageScope C (ООО «Системы для микроскопии и анализа»).Микроскопическуюморфометриювыполнялиспомощьюсертифицированной программы ImageScope C (ООО «Системы длямикроскопии и анализа»), совмещенной с микроскопом Jenamed-2.Определяли толщину мышечных волокон и их пучков; толщину эндомизия иперимизия; количество мышечных волокон в поле зрения на продольном срезепри увеличении микроскопа в 1000 раз; площадь мышечной и соединительнойтканей в поле зрения на продольном срезе при увеличении микроскопа в 400раз.Биохимические исследования.
Для приготовления гомогената мышцприменяли гомогенизатор (экспозиция 8 мин., частота 40 фрикций в мин.,t=6ºC), измельчитель тканей и 158 мМ раствора NaCl, содержащего 20 мМфосфата калия, рН 7,4. Измерения проводили не более, чем через 30 мин. послегомогенизации. Нитро- и нитрозосоединения в амнионе и аллантоисеэмбрионов, гомогенате мышц и потрошенных тушках цыплят выявлялиферментативным методом, основанном на использовании ферментного9сенсора (совместная разработка ВНИТИП, РНИМУ и ИФХ РАН).
Принципего работы — ингибирование каталазы нитрозосоединениями в присутствиигалоид-ионов с примерно равной эффективностью, которая повышается приснижении рН. В отсутствии галоид-ионов эффективность ингибированияснижается на 2 порядка (Титов В.Ю. и др., 2008, 2010). Для определениясодержания нитрита в амнионе и аллантоисе эмбрионов и гомогенате мышц ипотрошенных тушек цыплят использовали также классический метод Грисса(Tarpey M. et al., 2004).Определение массы тела птицы. Для определения массы тела цыплятиспользовали весы с точностью до 0,1 г.
и коробку, в которую их помещалииндивидуально (по номерам крыломерок) в определённые срокипостэмбрионального развития. Массу коробки определяли после каждоговзвешивания и отнимали ее значение от общего показателя, чтобы получитьпоказатели собственной массы тела птицы.Статистическуюобработкуморфометрическихданныхосуществляли с помощью программы ImageScope C (ООО «Системы длямикроскопии и анализа»). Анализ результатов, полученных прибиохимических исследованиях, проводили общепринятым методом свычислением средней арифметической (M) и стандартной ошибки среднего(m) с использованием пакета программ «BioStat».
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
