Автореферат (1151504), страница 2
Текст из файла (страница 2)
+ 1мл. АБПУбой цыплят-бройлеров опытной и контрольной групп проводили на 35-есутки проведения опыта.2.2 Материалы и методы исследований. При проведении работы былииспользованы методы клинического исследования и ветеринарно-санитарнойэкспертизы продуктов убоя цыплят бройлеров.Оценка клинического статуса птицы происходила по клиническим игематологическим показателям. Оценивалось общее состояние птицы - поведение,аппетит, жажда, диурез, дефекация, внешний вид.
Ежедневно проводилосьвзвешивание. Так же контрольное взвешивание проводилось перед убоем.Термометрия проводилась 1 раз в неделю.6Отбор образцов крови. Взятие проб крови проводилось в 14-ти и 35-тисуточном возрасте цыплят. При взятии крови соблюдались все правила асептики иантисептики, место взятия обрабатывалось 70% этиловым спиртом. Взятие кровипроводили до кормления цыплят из подкрыловой вены.Количество эритроцитов. Полученная кровь разводилась однопроцентнымраствором хлорида натрия в соотношении 1:200.
Смесь эритроцитов с растворомплавно перемешивается в течение 5 минут, для равномерного распределенияклеток, затем помещается в счетную камеру Горяева и подсчитываются клетки впяти больших разлинованных квадратах по диагонали. Полученное число клетокделится на 100Лейкоциты подсчитывались в окрашенном мазке по количеству в полезрения. Так же подсчитывалось в 10 полях. Далее рассчитывалось по формуле(ЛЕЙ*100/ЭР)*ЭРаб/100000 где ЛЕЙ - число лейкоцитов в 10 полях, ЭР - числоэритроцитов в 10 полях, ЭРаб - абсолютное число эритроцитов подсчитанное вкамере Горяева.Лейкограмма – подсчётом 100 лейкоцитов в мазках. Окраска мазковпроисходила следующим образом - на изготовленный высушенный мазокнаносилось 0,5 мл реактива Май-Грюнвальда.
Через 2 минуты поверх реактивананосилось 0,5 мл дистиллированной воды. Через 5 минут раствор реактивасливался, сверху наносилось 2-3 мл рабочего раствора реактива Романовского.После окрашивания в течение 25-30 минут краска смывалась большим объемомдистиллированной воды, после этого готовый и окрашенный мазок высушивался иисследовался под микроскопом под тысячекратным увеличением.Гемоглобин – гемоглобинцианидным методом.
Кровь разбавляласьтрансферным раствором в соотношении 1:250 с последующим измерениемоптической плотности при длине волны 530 нм, в сравнении с контрольнымраствором гемоглобина, с последующим расчетом по формуле:Hb=δе оптим.\ δе станд. х Hb станд, где Hb - гемоглобин.Биохимическое исследование крови проводилось на биохимическоманализаторе «Stat Fax 4200+». При проведении исследований использовалисьготовые наборы реагентов фирмы «Vital Diagnostik».Для созревания мяса тушки хранись при температуре +4°С в течение суток.Послеубойный ветеринарно-санитарный осмотр тушек и внутренних органовпроводился согласно нормативного документа «Правила ветеринарного осмотраубойныйживотныхиветеринарно-санитарнойэкспертиземясаимясопродуктов»(1988).Органолептическое исследование проводили по ГОСТ 51944-2002 «Мясоптицы.
Методы определения органолептических показателей температуры и7массы». При этом учитывали такие показатели как внешний вид, цвет,консистенцию, запах, состояние мышц и жира, аромат и прозрачность бульона.Органолептическое исследование вареного мяса, пробу варки для оценкойбульона проводили согласно ГОСТ 7269-79 «Мясо. Методы отбора образцов иорганолептические методы определения свежести мяса», СанПиН 2.3.2.1078-01«Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья,и пищевых продуктов».
Сравнивался внешний вид тушек, упитанность, масса,морфологический состав тканей бройлеров (соотношение и выход белого икрасного мяса, внутреннего жира, кожи, костей), по методическим указаниямВНИИМП.Для исследования доброкачественности мяса использовали методы,изложенные в ГОСТ Р 53747-2009 «Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты измяса птицы.
Методы органолептических и физико-химических исследований».Реакция на пероксидазу. Реакция позволяет установить присутствиефермента пероксидазы в экстракте из мышечной ткани. Она заключается вокислении бензидина перекисью водорода в присутствии пероксидазы.Для определения физико-химических показателей мяса использовалиметоды, изложенные в ГОСТ 7702.1-74 «Мясо птицы. Методы химического имикробиологического анализа свежести».Общую влагу в мышечной ткани определяли по общепринятой методикепутем высушивания навески в сушильном шкафу при 105°С до постоянной массы(ГОСТ 9793-74 «Мясо и мясные продукты. Методы определения влаги»).Количество общего белка - по методу Кьельдаля (ГОСТ 25011-81 «Мясо и мясныепродукты».
«Методы определения белка»), массовую долю жира - по Сокслету(ГОСТ 23042-86 «Мясо и мясные продукты». «Методы определения жира»). Общееколичество минеральных веществ - сжиганием сухой навески в муфельной печипри 800°С.Определение количества калия проводили по ГОСТ 30504-97, кальцияГОСТ 26570-95, фосфора ГОСТ 26657-97, меди и цинка ГОСТ 3092-00, железаГОСТ 27998-88, марганца ГОСТ 27997-88.Значение рН мяса определяли потенциометрическим методом согласноГОСТ Р 51478-99 (ИСО 2917-74) «Мясо и мясные продукты. Контрольный методопределения концентрации водородных ионов (рН)».Отбор проб и подготовку к микробиологическим исследованиям проводилисогласно ГОСТ 7702.2.0-95 /ГОСТ Р 50396.0-92 «Мясо птицы, субпродукты иполуфабрикаты птичьи.
Методы отбора проб и подготовка к микробиологическимисследованиям». Для микробиологического контроля отбирали по пять тушекптиц каждой группы. Микробиологические исследования проводили подействующим ГОСТ в соответствии с требованиями СанПиН 2.3.2.1078-01.Определяли общее микробное число (КМАФАнМ) по ГОСТ 7702.2.1-95 /ГОСТ Р850396.1-92; бактерии рода Salmonella в 25 г. продукта по ГОСТ 7702.2.3-93 и ГОСТР 53665-2009, бактерии L.
monocytogenes согласно ГОСТ Р 51921-2002 ииммунологическим экспресс-методом Singlepath по Методическим указаниям«Методы выявления патогенных микроорганизмов с использованием экспресстестов Singlepath (Merck, Германия)». Микробиологические исследования образцовметодом импедансной микробиологии проводили в соответствии с МУК 4.2.581-96«Метод санитарно-бактериологического анализа пищевых продуктов сиспользованием бактериологического экспресс-анализатора» (РЭБИТ).Метод определения количества мезофильных аэробных и факультативноанаэробных микроорганизмов» путем высева продукта в агаризованныепитательные среды (мясопептонного агара).
Культивировали посевы притемпературе 30°С в течение 72 часов. Подсчет колониеобразующих единицпроводили по разведениям, в которых количество колоний находилось в пределахот 30 до 300 КОЕ/г.Выявление сальмонелл проводили согласно ГОСТ 7702.2.3-93 «Мясо птицы,субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Метод выявления сальмонелл». Методоснован на высеве определенного количества продукта на жидкие неселективные иселективные питательные среды с выделением чистых культур на диагностическихсредах с морфологическими и культуральными признаками сальмонелл, в проверкебиохимических свойств выделенных культур, определении антигенной структуры.Выращивание бактериальных культур проводили путем высева навески продукта впептонно-буферную воду.
После инкубации при температуре 37±1°С в течение 1624 часов культуру, в объеме 10 см3 , пересевали на магниевую среду обогащения иинкубировали в течение 48 часов при температуре 37±1 °С. После чего магниевойсреды обогащения пересевали культуру на висмут-сульфиный агар и инкубировалидвое суток при температуре 37±1 °СГистологический метод исследования проводили по ГОСТ 23481-79 «Мясоптицы. Метод гистологического анализа».Отбор проб грудных и бедренных мышцпроводили в течение 30 минут после убоя птицы в количестве 6 проб от каждойгруппы. Для фиксации использовали 1% раствор формальдегида. В даннойжидкости кусочки мышечной ткани толщиной 0,5-1 см фиксировали в течение 7-14дней.После фиксации материал промыли проточной водопроводной водой втечение 24 часов, после произвели обезвоживание и уплотнение по схеме: по 24часа - спирт 70°; 80°; 96°;100°; смесь 100° спирта и толуола, взятых поровну; 3 часа(в термостате при температуре 37° С) смесь толуола и парафина взятых поровну;две порциипарафина (в термостате при температуре 50-55°С) по 2 часа в каждойпорции.
После этого провели заливку объектов мышечной ткани в новой порции9парафина, заранее налитого в чашки Петри. Для получения гистологических срезовиспользовали микротом ротационный, системы Майонетта.Окраску мышечных срезов проводили гематоксилином и эозином длявыявления общей гистологической характеристики мышечной ткани цыплятбройлеров, пикрофуксином по Ван-Гизону для выявления волокнистойсоединительной ткани (А. Меркулов, 1961; Л.Ф. Бодрова, и В.А. Шестаков, 2007).Токсичность проб определяли согласно «Методическим указаниям поускоренному определению токсичности продуктов животноводства кормов»(утвержденных Департаментом ветеринарии МСХ РФ 16.10.2000 г., № 13-7-2/2156)при помощью инфузорий Теtrahymenapyriformis.Статистическую обработку цифрового материала проводили методомвариационной статистики с использованием ПЭВМ пакет программ "SPSS 2,0".Достоверность устанавливали при помощи G-критерия по методу Стьюдента(Стентон Гланц, 1999). Оформление диссертационной работы проводили спомощью пакета Microsoft Office 2013 на персональном компьютере.3.
Результаты собственных исследованийВведение в повседневный рацион цыплят-бройлеров кормовых добавокявляется актуальной темой уже долгий период времени. Но так же существуетнеобходимость разработки выгодных и оптимальных схем применения препаратадля увеличения продуктивности, улучшения продукции и повышенияэкономической эффективности при выращивании птицы в птицеводческиххозяйствах.Учитывая эти данные, нами было проведено исследование влияния препарата"Абиопептид" на результаты ветеринарно-санитарной экспертизы продуктов убояцыплят-бройлеров. Для этого мы провели две серии опытов, результаты которыхне имели разительных отличий.Одним из основных показателей при проведении выращивания цыплятявлялась живая масса. Очень сильное влияние на которую оказывает содержание икормление птицы. Изменение массы с первых суток откорма представлена нарисунке 1 и 2.На 35-е сутки эксперимента цыплята-бройлеры опытных групп по живоймассе превышали контрольную на 9% в первой серии, и на 7,5% во второй.