Диссертация (1150402)
Текст из файла
САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВННЫЙ УНИВЕРСИТЕТИНСТИТУТ ХИМИИНа правах рукописиПротас Александра ВладимировнаСВОБОДНЫЕ И КООРДИНИРОВАННЫЕ ИОНАМИ Pt(II), Pd(II)ТЕТРАЗОЛИЛУКСУСНЫЕ КИСЛОТЫКАК ПЕРСПЕКТИВНЫЕ СКАФФОЛДЫ В СИНТЕЗЕНОВЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВДИССЕРТАЦИЯна соискание учёной степени кандидата химических наукпо специальности 02.00.10 – биоорганическая химияНаучный руководитель:доктор химических наук,профессорТрифонов Ростислав ЕвгеньевичСанкт-Петербург2018ОГЛАВЛЕНИЕОбщая характеристика работы …………………………………………………..7ГЛАВА 1.
ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОРТЕТРАЗОЛЫКАКПЕРСПЕКТИВНЫЕАНТИПРОЛИФЕРАТИВНЫЕАГЕНТЫ …………………………………………………………………………131.1.Основныетипыифундаментальныеподходыксинтезутетразолов ………………………………………………………………………..131.2. Противоопухолевые агенты, содержащие координированные с ионамиметаллов тетразолы ………………………………………………………….….181.2.1. Комплексы металлов платиновой группы ………..………………….…181.2.2.Комплексыметалловнеплатиновойгруппыс тетразольными лигандами ………………...………………………………….251.3. Аналоги и производные природных соединений ...………………………291.3.1.Тетразолыкаканалогиприродныхцис-стибленов(комбретастатина А-4) …………...……………………………………………..291.3.2.Тетразолильныеаналогиипроизводныебиогенныхкислоти пептидов …………...…………………………………………………………..331.3.3 Тетразолильные аналоги стероидов ………...…………………………...371.4. 5-Оксо- и 5-тиотетразолы …………...……………………………………..381.5.
Другие типы ……………...…………………………………………………41ГЛАВА 2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ2.1. Приборы и методы ……………...………………………………………….502.2. Реагенты и растворители …………...……………………………………...522.3. Синтез тетразолилуксусных кислот и их производных ………………….532.3.1. Синтез эфиров тетразол-5-илуксусных кислот ………………..……….532.3.2. Синтез 2R-тетразол-5-илуксусных кислот …………………………...…552.3.3. Синтез амидов 2R-2H-тетразол-5-илуксусных кислот ……………...…562.4. Производные 5-метил-1Н-тетразол-1-илуксусной кислоты ……...…….572.4.1.
Синтез эфиров 5-метил-1Н-тетразол-1-илуксусной кислоты …...…….5722.4.2. Синтез 5-метил-1Н-тетразол-1-илуксусной кислоты ………...………...582.4.3. Синтез амидов 5-метил-тетразол-1-илуксусной кислоты …………..…582.5. Синтез аналогов аминокислот, в которых NH2-группа замещенатетразолильной группой ……………...……………………………………...…612.6. Синтез тетразол-1-ильных производных L- и D-фенилаланина ……...…622.7.Синтезкомплексовметалловплатиновойгруппыстетразолсодержащими лигандами …………………………………......………642.7.1.Синтезкомплексовхлоридапалладия(II)с2-R-тетразол-5-илуксусными и 5-метил-тетразол-1-илуксусной кислотой………….......……642.7.2. Синтез комплексов хлоридов платины(II) и палладия(II) с эфирамитетразолилуксусных кислот …...……………………………………………….652.7.3.
Синтез комплексов хлоридов платины(II) и палладия(II) с амидамитетразолилуксусных кислот …...……………………………………………….692.8. Взаимодействие комплексов с ДНК …………...………………………….722.8.1. Исследования методом УФ-спектроскопии …...………………………..732.8.2. Исследования методом спектроскопии кругового дихроизма …...……732.8.3. Исследование термической денатурации ДНК …………..…………….742.8.4. Исследование электрофоретической подвижности ………...………….712.8.5. Исследование вязкости …………………………...……………………...712.8.6.ИсследованиевзаимодействиякомплексовсДНКметодоммолекулярного докинга …………………………………………………………722.9.
Взаимодействие комплексов с бычьим сывороточным альбумином2.9.1. Спектральные исследования ………………...………………………….752.9.2.ИсследованиевзаимодействиякомплексовсБСАметодоммолекулярного докинга …………………………………………………………762.10. Изучение противовирусной активности соединений ………….……….762.11 Цитотоксическое определение жизнеспособности опухолевых клетокHT-29, MDA-MB-231 и RC-124 (для соединений 27-31) ……………………..782.12. Биологические эксперименты для соединений 25, 26, 33, 34, 37-40(анализ клеточной культуры и цитотоксичности в клетках MCF-7) ……..….7832.12.1.
Колориметрические тесты оценки жизнеспособности клеток …….....792.12.2. Исследование клеточного цикла ………………………………...……..80ГЛАВА 3 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ3.1.Синтез тетразолилуксусных кислот и их производных …………………..823.1.1Синтез1Н-тетразол-1-ил-и2Н-тетразол-5-илуксусныхкислоти их производных ……………………………………………...………………..823.2. Синтез аналогов аминокислот, в которых α-NH2-группа замещена на 1Нтетразол-1-ильный фрагмент ……………………………………..…..………...863.3. Синтез тетразол-1-ильных производных L- и D-фенилаланина ......…….883.4. Синтез и свойства комплексов Pd(II) и Pt(II), содержащих тетразольныелиганды …………………………………………………………………………..913.4.1.Синтезкомплексовпалладия(II)иплатины(II)с тетразолилуксусными кислотами и их производными …………..………....913.4.2.
Спектральные характеристики транс-комплексов Pt(II), Pd(II) стетразолилуксусными кислотами и их производными ……………..…….…..933.4.3. Рентгенографические исследования комплексов …………..…….…….953.4.4.Термическийанализкомплексовпалладия(II)с тетразольными лигандами ……………...…………………………………...1003.5. Взаимодействие комплексов Pt(II), Pd(II) с тетразолилуксуснымикислотами в качестве лигандов с некоторыми биополимерами ………..…..1043.5.1. Взаимодействие с ДНК …………………...…………………………….1043.5.1.1. Исследование методом УФ-спектроскопии ………...………………1043.5.1.2.
Исследование методом спектроскопии кругового дихроизма …......1103.5.1.3. Термическая денатурация ДНК …………………...…………………1123.5.1.4. Исследование методом вискозиметрии …………………...…………1153.5.1.5. Исследование методом гель-электрофореза …………………...……1173.5.1.6.МолекулярныйдокингкомплексовPd(II)иPt(II)с додекамером ДНК d(CGCGAATTCGCG)2 …………………...…………….1193.5.2. Исследование взаимодействия между БСА и комплексами металлов спроизводными тетразолилуксусных кислот ………………………………....12043.5.2.1.ИсследованиевзаимодействияметаллокомплексовсБСАметодом УФ-спектроскопии …………………………………………………..1203.5.2.2 Метод флуоресцентной спектроскопии ………………...……………1263.5.2.3.
Определение места связывания тетразолсодержащих комплексовметаллов с БСА методом молекулярного докинга ..........................................1333.6. Оценка противоопухолевой активности тетразолсодержащих комплексовPt(II) и Pd(II) in vitro ………………..…………………………………….……136ВЫВОДЫ ……………………………………………………………………...138ЛИТЕРАТУРА........…………………………………………………………….1415ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ1Н ЯМР13– cпектроскопия ядерного магнитного резонанса на ядрах 1НС{1H} ЯМР – спектроскопия ядерного магнитного резонанса на ядрах 13СМТТ– 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромидВЭЖХ– высокоэффективная жидкостная хроматографияДМСО– диметилсульфоксидДМФА– диметилформамидДСК– дифференциальная сканирующая калориметрияIC50– концентрация, вызывающая ингибирование пролиферацииклеток на 50%КД– круговой дихроизмРСА– рентгеноструктурный анализТГФ– тетрагидрофуранУФ– электронная спектроскопия в ультрафиолетовом диапазонеТТ–титус телёнкаTrxR–тиоредоксинредуктаза6ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы:Тетразолы,редковстречающиесявживойприроде,являютсяизвестными фармакафорами и широко используются при разработке новыхвысокоэффективных лекарственных средств [1-8].
Тетразолильный фрагментявляется биоизостерическим аналогом карбоксильной, цис-амидной инекоторых других функциональных групп [1-4]. Известно, что введениететразолильного фрагмента в молекулу биологически активного субстратанередко способствует повышению его эффективности и увеличениюпролонгируемости действия при снижении общей токсичности. На основететразолов был получен ряд высокоэффективных лекарственных препаратовразличногодействия:лазартан,вальсартан,цефазолин,агонистыиантагонисты глутаматных рецепторов и др.[2,3].Тетразолилуксусные кислоты и их производные можно рассматриватькак аналоги природных аминокислот, в которых аминогруппа замещена натетразолильныйфрагмент,чтопозволяетрассматриватьихкакперспективные скаффолды в синтезе новых биологически активных веществ.абвгСхема 1.1.
Структурные изомеры тетразолилуксусных кислот: а – тетразолильныйфрагмент находится в α-положении по отношению к карбоксильной группе (замещениеамино-группы); б – тетразолильный фрагмент находится в боковой цепи аминокислоты(замещениедругихфункциональныхгрупп);в–тетразолсодержащиеаналогинепротеиногенных аминокислот (например, тетразолсодержащий аналог γ-аминомаслянойкислоты, в котором тетразолильный фрагмент замещает карбоксильную группу (г)).7Различныеизомерыданныхсоединенийобладаютхорошейрастворимостью в водных средах, могут выступать в качестве кислоты иоснования, а также обладают способностью эффективно участвовать вразличных межмолекулярных взаимодействиях. Кроме того, варьируязаместители у атома азота тетразольного цикла можно добиться оптимальнойлипофильностиданныхсоединений.Несмотрянаочевиднуюперспективность данных соединений как ключевых скаффолдов приразработке новых биологически активных веществ, исследований в этойобласти недостаточно.Координационные соединения тетразолов и ионов перехоодныхметаллов с тетразолилуксусными кислотами также могут проявлятьзначительную биологическую активность.Цель работы: Создание перспективных биологически активныхвеществ на основе свободных и координированных с ионами Pt(II), Pd(II)тетразолилуксусных кислот.
Для достижения поставленной цели необходимобыло решить следующие задачи:▪ Синтезировать и охарактеризовать тетразол-1-ил- и тетразол-5илуксусные кислоты, их производные;▪ Синтезировать и охарактеризовать комплексные соединения Pt(II),Pd(II), содержащие в качестве лигандов тетразолилуксусные кислоты иих производные;▪ Исследовать взаимодействие тетразолсодержащих комплексов Pt(II) иPd(II) с биологическими мишенями противораковых препаратов – ДНКи альбумином.▪ Оценить противовирусные свойства полученных тетразолильныханалоговаминокислоткоординационныхисоединенийцитотоксическуютетразолилуксусныхактивностькислотсхлоридами платины(II) и палладия(II).8Объекты исследования: Тетразол-1-ил- и тетразол-5-илуксусныекислоты и их производные, тетразолильные аналоги аминокислот, а также ихкомплексы с хлоридами(II) и палладия(II).
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
