Автореферат (1150006), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Применение в качестве растворителя бензола также не привело кполучению целевого продукта: из реакционной смеси было выделено исходноесоединение 49.Положительного результата удалось достичь при использовании вкачестве растворителя метанола. Целевой 18-метил-2-фтор-8α-эстрон (14) былвыделен из реакционной смеси кристаллизацией из метанола. Небольшой выходпродукта (30%) несколько компенсируется тем, что применявшуюся ранеесхему удалось сократить на 4 стадии.Аналогичным путем был осуществлен полный синтез соединений 15 и 16(схема 9)Схема 9Строение полученных соединений 7-9 доказано методами спектроскопииЯМР 1Н и 13С. Также был проведен рентгеноструктурный анализ соединения 15(рис.
1.).Рис 1. Молекулярная структура 3-гидрокси-2-фтор -8αэстра-1,3,5(10)-триен-17а-она (15) по данным РСА12Синтез 18-метил-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-она (18)Эквилинин является одним из компонентов средств заместительнойгормональной терапии, однако, как и другие эстрогены, может подвергатьсяметаболическому гидроксилированию в положение 4 с последующимобразованием канцерогенных катехолов. Известно, что введение атома фтора вположение 4 блокирует этот путь метаболизма без потери гормональнойактивности, а о влиянии атома фтора положении 2 эквилениновых соединений ио методах синтеза таких соединений данных в литературе нет.
В связи с этим,мы решили синтезировать аналог эквилинина, содержащего фтор в положении 2, с целью изучения его биологических свойств.Путь синтеза целевого стероида 18 представлен на схеме 10. В качествеисходного соединения использовали стероид 58. Щелочным гидролизомсложноэфирной связи получили соответствующий спирт, который окисляли досоответсвующего кетона с помощью DMP (Dess-Martine Periodinane).Схема 10Необходимость столь избирательного окислительного реагента связана слегкой окисляемостью нафталиного фрагмента при применении в качествеокислителя, например, стандартного реактива Саретта. Использование DMP нетолько позволяет избежать применения токсичных реагентов, коими являютсяпиридин и соединения хрома, но и приводит к значительному повышениювыхода целевого стероида.Синтез сульфаматов аналогов эстрогенов, содержащих фтор вположении 2Известно, что сульфатаза эстрона превращает гормонально неактивныесульфаты эстрогенов в активную свободную форму.
Сульфаматы стероидныхэстрогенов могут ингибировать этот процесс, замедляя тем самым рост опухоли,опосредованной эстрогенами. При этом процесс ингибирования – необратимый,13и протекает с образованием свободных эстрогенов. Таким образом, приразработке ингибиторов сульфатазы эстрона следует учитывать гормональнуюактивность и метаболизм стероидных эстрогенов. Очевидно, чтомодифицированные аналоги эстрогенов, гормональная активность которых взначительной степени снижена по сравнению с природными эстрогенами,защищенные от метаболического гидроксилирования в кольцо А несомненно,являются перспективными.Схема 11В связи с этим мырешилисинтезироватьсульфаматы32-34,выборкоторых продиктован описанными выше соображениями.Сульфаматыаналоговстероидных гормонов 19-21получали по методу Окада,действуя сульфамоилхлоридомна соответствующие фенолы вN,N-диметилацетамиде (Схема11).Получены первые данныеисследования сульфаматов 1921 на клетках рака молочнойжелезы линии MCF-7.
Наиболее интересные свойства у соединения 21:ингибирование пролиферации клеток MCF-7 наблюдается при концентрации 20мкг/мл, тогда как блокирование роста здоровых клеток (кожные фибробластычеловека) происходит при более высокой концентрации субстрата 50 мкг/мл.Очевидно, что применение таких соединений вряд ли перспективно, хотяисключением может оказаться направленный транспорт в органы-мишени.Исследованиевозможностисинтезацелевыхсоединенийфторированием субстратов со сформированным стероидным скелетомВ литературе описан эффективный методвведения атома фтора во второе положениемолекулы эстрадиола с помощью фторирующегоагента Selectfluor.Мы попытались воспроизвести даннуюметодику, однако, вместо ожидаемого 2-Fэстрадиола был получен продукт фторирования в10-е положение стероидного скелета 64 с выходом65%, а ожидаемые продукты 5 и 63 получены в14виде трудноразделимой смеси с суммарным выходом 6% (Схема 12).Схема 12Таким образом, строение продуктов реакции определено автором статьиошибочно и получение 2-фтор аналогов эстрогенов данным методомневозможно.Исследование антиоксидантной активности целевых соединенийЭстрогены являются эффективными антиоксидантами и препятствуютразвитию атеросклероза, являющегося одной из наиболее часто встречающихсяпричин смертности в Европе и возникающего в основном в результатеокисления липопротеидов низкой плотности (ЛНП) в кровеносных сосудах.При поиске новых антиоксидантов весьма необходимо проведение серийных экспериментов in vitro с целью определения взаимосвязи «структура-активность».
Однако для широкого ряда синтетических аналогов эстрогенов исследований подобного рода не проводились, в отличие от природных эстрогенов иих производных. Важно отметить, что антиоксидантные свойства фторированных аналогов эстрогенов практически не изучены.Мы протестировали группу аналогов эстрогенов с различными модификациями молекулы методом «Lag time» – методом определения диеновых коньюгатов, образующихся при окислении ЛПНП под действием ионов Cu2+.
Важно,что метод «Lag time» хорошо воспроизводит среду живого организма, позволяяпроводить тестирование при низких концентрациях окислителя (1.66 μM) иосуществлять длительный мониторинг (10 ч).- соединения с 3-ОН группой- соединения с 3-OR группой- 2-F соединения с 3-OH группойРис. 2. Антиоксидантная активность исследованных соединений (активностьпредставлена в виде отношения к соответствующей величине в контрольномэксперименте).15Оказалось, что целевые соединения, содержащие фтор в положении 2, обладают довольно высокой антиоксидантной активностью, сравнимой с антиоксидантсной активностью 17β-эстрадиола, а эквилениновый аналог 18 продлевает лаг-фазу сильнее, чем 17β-эстрадиол.Полученный набор экспериментальных данных был использован длямолекулярного 3D моделирования взаимосвязи «структура-активность».Основные этапы построения модели показаны на рис. 3.РасчётHQSAR пол.
Нвсе HHQSAR без HCOMFA все HCOMFA без HHQSARЭксп. данные, %111101111109104115110119117137144118118130127139146131147155147154157152113116118145141194Рис.3. Этапы построения 3D-QSAR модели для предсказания антиоксидантныхсвойств.1) построение трехмерных структур аналогов эстрогенов с различнымизаместителями, сочленениями колец В, С, D и степенями их ненасыщенности2) Выравнивание структур, минимизация энергии молекул, моделированиераспределения зарядов в молекулах.3) Построение расчетных моделей HQSAR и COMFA по стерическим иэлектростатическим параметрам.
Сравнение расчётов антиоксидантнойактивности с экспериментальными даннымиНаряду с хорошей корреляцией расчетных данных с экспериментальнымистатистические параметры моделей (q2=0,48-0,55) также удовлетворяюткритериям достоверности расчетной модели (q2≥0,2).
Таким образом, подобные16расчеты могут быть использованы на стадии выбора модельных соединений сцелью создания антиоксидантов на основе аналогов эстрогенов.ВЫВОДЫ1. С целью поиска модифицированных эстрогенов с кардиопротекторнымдействием, не опосредованном ядерным α-рецептором эстрогенов, синтезирован 16,16-диметил-2-фтор-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен-17а-он, обладающий указанными свойствами. Это открывает принципиальную возможностьполучения нового класса кардиопротекторов.2. Улучшены некоторые стадии полного синтеза аналогов стероидныхэстрогенов, содержащих фтор в положении 2. Предложен альтернативный путьсинтезапромежуточного6-метокси-7-фтор-тетралина,позволяющийзначительно сократить схему синтеза.3.
Стереоселективность каталитического гидрирования торговских эстрапентаенов, содержащих фтор в положении 2 и гидроксильную группу в положении 3, сильно зависит от условий реакции. При гидрировании в МеОН в присутствии Pd/C схема получения аналогов 8α-ряда сокращается с 4 стадий до 1.4. Предложен способ синтеза 2-фтораналогов стероидных эстрогенов сцис-сочленением колец С и D.5. При комбинированном действии 17аβ-ацетокси-3-метокси- 2-фтор-Dгомо-1,3,5(10)-эстратриена и урсоловой кислоты не происходит повышенияуровня триглицеридов при сохранении гипохолестеринимического действия.6.
Показано, что аналоги эстрогенов, содержащие фтор в положении 2 исвободную гидроксильную группу в положении 3, обладают высокой антиоксидантной активностью, сравнимой с антиоксидантсной активностью природного эстрадиола. На основе экспериментальных данных построена 3D-QSARмодель c хорошей предсказательной силой.Основное содержание диссертации изложено в следующих работах:Статьи:1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
