Диссертация (1145825), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Штаммы СГВ, содержащие повторы на 3' концегена, кодирующего рибосомный белок 50S, могут быть реципиентами не толькоPAI-A, но и PAI 89К. СГВ и S. suis вызывают заболевания как животных, так ичеловека. Острова несут на себе гомологичные последовательности, междукоторыми возможна рекомбинация. В результате чего может возникнуть новыймобильный генетический элемент с неизвестными вирулентными свойствами.Недавно аналогичный PAI с геном, гомологичным sspB1, и системой токсинантитоксин был обнаружен в штамме S. lutetiensis, несущим устойчивость кванкомицину [72].Ген sspB1 коррелирует с возникновением инфекций в мочеполовом тракте,т.е.
ассоциируется с вирулентными свойствами СГВ. Наличие факторапатогенности, ассоциированного с вирулентностью, на острове патогенностисвидетельствует о возможном вкладе мобильного генетического элемента вформированиевирулентногофенотипабактерии.Циркуляцияостровапатогенности среди штаммов из России может привести к возникновению новыхэпидемическихштаммовсболеевысокойстепеньювирулентности.Своевременное определение штаммов с такими генетическими элементами вгеномепозволитснизитьрискинфицированиястрептококками группы В в городе Санкт-Петербурге.новорожденныхдетей95ЗаключениеСтрептококки группы В являются актуальными возбудителями тяжелых ичасто смертельных заболеваний новорожденных и взрослых людей.
СГВ такжевызывают инфекции крупного рогатого скота, собак, кошек, рыб. Быстрыеэволюционные изменения СГВ обусловлены большим количеством мобильныхгенетических элементов в геноме и в том числе островов патогенности. Наостровах патогенности локализованы гены факторов патогенности, которыеспособствуют быстрой адаптации к новым экологическим нишам. Проведенноеисследование было посвящено одному из таких мобильных генетическихэлементов – острову патогенности XII.
Данный остров, как было установлено,существует в двух основных вариантах, ассоциированных с геном одного из двухгомологичных вариантов известного фактора вирулентности СГВ: генами sspB1или sspB1a. Данные гены, относящиеся к категории генов, кодирующих глюкансвязывающие белки иадгезины у многих грамположительных патогенныхстрептококков и энтерококков, относятся к важным факторам патогенности.Рекомбинантный фрагмент белка SspB1 используется в качестве одного изкомпонентов вакцины против СГВ.ВработеосуществленоклонированиефрагментагенаsspB1вэкспрессионном векторе и созданы новые конструкции для инактивации генаsspB1.При анализе генетический организации островов показано, что островпатогенности XII СГВ состоит из трех мобильных генетических элементов:сложного транспозона PAI-C, геномного островка PAI-B, острова патогенностиPAI-A, ассоциированного с геном sspB1.Остров патогенности PAI-A преимущественно циркулирует среди штаммовСГВ из России и отсутствует в штаммах СГВ из зарубежных стран, что имеетзначение для эпидемиологической диагностики СГВ инфекций.96Остров патогенности PAI-A, ассоциированный с геном sspB1, и островпатогенности PAI-A1, ассоциированный с геном sspB1а (гомологом sspB1),являются независимыми генетическими элементами, имеющими как сходства, таки различия в организации.
Ген sspB1а и остров патогенности PAI-A1 былиобнаруженыуштаммовСГВ,выделенныхвразличныхстранах.Распространенность острова патогенности PAI-A1 значительно превышаетчастоту встречаемости острова патогенности PAI-A, ассоциированного с геномsspB1.Наличие нескольких мобильных генетических элементов в одной областигенома стрептококков группы В позволяет сделать предположение о том, что вданном локусе возможно возникновение новых мобильных генетическихэлементов посредством горизонтального переноса генов.97Выводы1)Остров патогенности XII стрептококков группы В состоит из трехмобильных генетических элементов: сложного транспозона PAI-C, геномногоостровка PAI-B и острова патогенности PAI-A, ассоциированного с геном sspB1.Геномный островок и остров патогенности фланкированы прямыми повторами.2)Остров патогенности PAI-A был обнаружен только в штаммах стрептококковгруппы В из России и отсутствовал в геномах штаммов из ряда зарубежных стран.3)Острова патогенности PAI-A и PAI-A1, ассоциированные с генами sspB1 иsspB1a соответственно, являются независимыми генетическими элементами,способными самостоятельно «выщепляться» из хромосомы.4)Распространенность острова патогенности PAI-A1 составила 33% средироссийскихизарубежныхштаммов,чтозначительнопревышаетраспространенность острова патогенности PAI-A (14%).5)Сконструированы векторы для экспрессии и инактивации гена sspB1.98Список сокращенийСГВ – стрептококки группы ВPAI – остров патогенностиPI – остров патогенности, который кодирует пилиFI острова – острова, улучшающие «фитнес» бактерийТА – токсин-антитоксинcag PAI – остров патогенности cag Helicobacter pyloriTHB – бульон Todd Hewitt BrothПЦР – полимеразная цепная реакцияSDS – додецил сульфат натрияSLS – Sample Loading solution, буфер для погруженияIPTG – изопропил-β-D-тиогалактопиранозидPMSF – фенилметилсульфонилфторидПААГ – полиакриламидный гельPSA – персульфат аммонияТМБ – 3, 3’, 5, 5’ ТетраметилбензидинXgal – 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозидHIT белок – белок из семейства гистидиновых триадFtsK/SpoIIIE – система хромосомной сегрегации99Список литературы1.Анализ штаммов стрептококков группы В на наличие генов потенциальныхадгезинов, локализованных на островах патогенности[Текст] / А.
Н.Суворов [и др.] // Ж. акушерства и женских болезней. – 2005. – Т. LIV, № 2. –С. 50–55.2.Гланц, С. Медико-биологическая статистика. [Электронная книга] / СтентонГланц; пер. с англ. Ю. А. Данилова; под ред. Н. Е. Бузикашвили, Д. В.Самойлова. – М.: Практика, 1998. – 459 с.3.Дмитриев, А. В. Геномный полиморфизм стрептококка группы В –возбудителя заболеваний человека и животных [Текст]: автореф. дис. … д-рабиол. наук: 03.00.04, 03.00.07 / Дмитриев Александр Валентинович. – СПб.,2004. – 34 с.4.Колонизация урогенитального тракта женщин стрептококками группы В,содержащими гены sspB семейства [Текст] / С.
Л. Зациорская [и др.] // Ж.акушерства и женских болезней. – 2006. – С. 33–34.5.Мавзютов, А.Р. острова патогенности условно патогенных энтеробактерий[Текст] / А.Р. Мавзютов, С. В. Фиалкина, В. М. Бондаренко // Ж. микробиол.,эпидемиол. и иммунобиол. – 2002. – Т. 6. – С. 5–9.6.Покровский, В. И.
Стрептококки и стрептококкозы [Текст] / В. И.Покровский, Н. И. Брико, Л. А. Ряпис. – М.: "ГЭОТАР-Медиа", 2006. – 544 с.7.Прозоров, А. А Системы "токсин-антитоксин" у бактерий: инструментапоптоза или модуляторы метаболизма? [Текст] / А. А. Прозоров, В. Н.Даниленко // Микробиология. – 2010.
– Т. 79, № 2. – С. 147–159.8.Регуляторная роль системы секреции III типа грамотрицательных бактерий вразвитии хронического инфекционного процесса [Текст] / Н. А. Зигангирова[и др.] // Мол. генетика, микробиол. и вирусол. – 2012. – № 3. – С. 3–13.1009.Рекомбинантные вакцины и пробиотики как возможные средства защиты отстрептококковых заболеваний [Текст] / А. Н. Суворов [и др.] // Мед. Акад. Ж.– 2010. – С. 32–39.10. Рекомбинантные фрагменты консервативных белков СГВ как основаспецифической вакцины [Текст] / А. Н.
Суворов [и др.] // Журн. микробиол. –2010. – С. 44–50.11. Сингер, М. Гены и геномы [Текст]: в 2 т. / М. Сингер, П. Берг. – М.: Мир,1998. – 1 т.12. Сингер, М. Гены и геномы [Текст]: в 2 т. / М. Сингер, П. Берг. – М.: Мир,1998. – 2 т.13. Суворов, А. Н. Поиск эффективных путей решения проблемы борьбы сбактериальной инфекционной патологией [Текст] / А. Н. Суворов // Мед.Акад. Ж. – 2010. – Т. 10, № 4.
– С. 267–280.14. Тотолян, А. А. Стрептококки группы В в патологии человека [Текст] / А. А.Тотолян, А. Н. Суворов, А. В. Дмитриев; под общ. ред. А. А. Тотоляна. –СПб.: Человек, 2009. – 212 с.15. Эпидемиологическая ситуация по острым кишечным инфекциям натерриториях республики Башкортостан, отличных по антропогеннымнагрузкам [Текст] / Г. М. Шайхиева [и др.] // Бюллетень ВСНЦ.
– 2013. – Т. 1,№ 89. – С. 152–159.16. A fibrinogen receptor from group B Streptococcus interacts with fibrinogen byrepetitive units with novel ligand binding sites [Text] / A. Schubert [et al.] // Mol.Microbiol. – 2002. – Vol. 46, N 2. – P. 557–569.17. A glimpse of streptococcal toxic shock syndrome from comparative genomics of S.suis 2 Chinese isolates [Text] / C.
Chen [et al.] // PLoS One. – 2007. – Vol. 2, N 3.– P. 1–9.18. A novel mechanism of programmed cell death in bacteria by toxin–antitoxinsystems corrupts peptidoglycan synthesis [Text] / H. Mutschler [et al.] // PLoSBiol. – 2011. – Vol. 9, N 3. – P. 1–12.10119. Adherence of group B streptococci to human rectal and vaginal epithelial cell linesin relation to capsular polysaccharides as well as alpha-like protein genes – pilotstudy [Text] / M. Bodaszewska-Lubas [et al.] // Pol. J. Microbiol. – 2013.
– Vol.62, N 1. – P. 85–90.20. Adjacent location of the bac gene and two-component regulatory system geneswithin the putative Streptococcus agalactiae pathogenicity island [Text] / A.Dmitriev [et al.] // Folia Microbiol. (Praha). – 2006. – Vol. 51, N 3. – P. 229–235.21. Alvarez-Martinez, C. E. Biological diversity of prokaryotic type IV secretionsystems [Text] / C. E.
Alvarez-Martinez, P. J. Christie // Microbiol. Mol. Biol.Rev. – 2009. – Vol. 73. – P. 775–808.22. Backert, S. Role of type IV secretion in Helicobacter pylori pathogenesis [Text] /S. Backert, M. Selbach // Cell Microbiol. – 2008. – Vol. 10, N 8. – P. 1573–1581.23. BibA induces opsonizing antibodies conferring in vivo protection against group BStreptococcus [Text] / I. Santi [et al.] // J.