Автореферат (1141333), страница 2
Текст из файла (страница 2)
И.М. Сеченова МинздраваРоссии (ноябрь 2018, Москва).Личный вклад автораАвтором лично были определены цели и задачи исследования, разработаны7методологические подходы к их решению, проведён анализ научной литературы,проведены экспериментальные исследования, анализ полученных результатов и ихстатистическая обработка. Автором написаны публикации и проект лабораторногорегламента. Диссертация и автореферат написаны лично автором. Вклад автораявляется определяющим и заключается в непосредственном его участии в качествеисполнителя на всех этапах исследования.Внедрение результатов исследованияРезультаты исследования внедрены в учебный процесс курса фармацевтическойтехнологии,кафедрыорганизациифармацевтическойдеятельностифармацевтического факультета ГБОУ ВПО РНИМУ имени Н.И.
Пирогова МинздраваРоссии (Акт внедрения от 29.12.2014 года), в учебный процесс и научнуюдеятельность кафедры фармацевтической технологии Института фармации ФГАОУВО Первый МГМУ им. Сеченова Минздрава России (Акт внедрения от 07.12.2018года), в учебный процесс и научную деятельность кафедры фармацевтическойтехнологии и фармакологии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М.
Сеченова Минздрава России (Акт внедрения от 07.12.2018 года), разработанпроект НД и лабораторный регламент на производство комплексного препарата наоснове ЛРС родиолы розовой в твердых желатиновых капсулах. Апробациятехнологии разработанного ЛС проведена на базе предприятия ООО «Хармс» (Актапробации технологии № 3 от 25.05.2018 г.).Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения диссертации соответствуют паспорту специальности 14.04.01– «технология получения лекарств» (фармацевтические науки). Результаты проведённогоисследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 3и 4 паспорта специальности 14.04.01 - Технологии получения лекарств.Связь задач исследования с проблемами фармацевтической наукиРабота выполнена в соответствии с тематикой и планом ФГАОУ ВО ПервыйМосковский государственный медицинский университет имени И.М.
СеченоваМинздрава России «Развитие научных и научно-методических основ, базовых и8инновационных подходов при разработке, внедрении и применении лекарственныхсредств» (№ государственной регистрации 01201261653).Объем и структура диссертацииДиссертационная работа изложена на 167 страницах машинописного текста(134 страницы основного текста), состоит из введения, обзора литературы, главы 2,посвященнойобъектамиметодамисследования,3-6главсобственныхисследований, общих выводов, списка литературы, приложений, содержит 43таблицы и 38 рисунков. Библиографический указатель включает 190 источников, изкоторых 40 на иностранных языках.ПубликацииПо теме диссертации опубликованы 12 печатных работ, в том числе 4 статьиопубликованы в изданиях, входящих в перечень российских рецензируемых научныхжурналов и изданий для опубликования основных научных результатов диссертации,рекомендуемых ВАК РФ, 1 статья - в зарубежном журнале.ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫОбъекты исследованияОбъектамиисследованияявлялосьлекарственноерастительноесырьекорневища и корни родиолы розовой, плоды шиповника собачьего и столбики срыльцами кукурузы майской.Материалы и методы исследованияПолучение извлечений из ЛРС осуществляли по разработанным методикам.Изучение химического состава ЛРС, извлечений из него и готовой ЛФ проводилиметодами градиентной ВЭЖХ на хроматографе Waters Breeze (США) с УФдетектором 2487 и ВЭЖХ-МС на приборе Agilent 1200 (США) с программнымобеспечением ChemStation B.03.01-SR1.
В качестве стандартных образцов (СО)использованы: розин, розарин, розавин, салидрозид, тирозол, рутин (Chromadex,США), а также кверцетин, аскорбиновая и хлорогеновая кислоты (Sigma-Aldrich). Приопределении витаминов использованы СО витаминов В1, B2, В6, А, D и К (Chromadex,США).9Для получения сухих экстрактов применяли метод сублимационной сушки.Сухие экстракты родиолы розовой, шиповника собачьего и столбиков с рыльцамикукурузы майской (СЭРШК) получали по общей схеме – давление 72 мБар,температура бани 60 °С и скорость вращения колбы 120-140 об/мин. Затем сгущённоеизвлечение помещали в морозильную камеру с температурой 25 °С на 6-8 часов ивысушивали в сублимационной сушилке Heto Drywinner CT/DW 60E (США) свакуумно-роторным насосом RZ 2 (Vacuumbrand, Германия) при давлении 0,010 мБари температуре 21 °С, в течение не менее 18 часов.Для полученной смеси СЭРШК определяли следующие показатели качества:фракционный состав, сыпучесть, насыпную массу, влажность, гигроскопичность,согласно методикам, описанным в ГФ РФ.При проведении исследований по разработке ЛФ в виде твёрдых желатиновыхкапсул с сухими растительными экстрактами использовали вспомогательныевещества фармакопейного качества.
Исследование процесса гранулирования сухихрастительных экстрактов проводили с использованием универсального лабораторногогранулятора модели TMG Glatt (Германия). Наполнение твёрдых желатиновых капсулпроводили на настольной капсульной машине ACG Pam MF 30 (Индия).Полученную готовую ЛФ, согласно требованиям ГФ РФ ОФС. 1.4.1.005.18«Капсулы»,оценивалипопоказателямкачества:подлинность,описание,однородность массы, распадаемость, растворение, количественное определение,микробиологическая чистота.
Испытание на распадаемость проводили по методикеГФ РФ ОФС 1.4.2.0013.15 «Распадаемость таблеток и капсул» на приборе«Качающаяся корзинка» ERWEKA CZ 221 в среде 0,1 М хлористоводороднойкислоты. Растворение капсул определяли по методике, описанной в ГФ РФ ОФС.1.4.2.0014.15 «Растворение для твердых дозированных лекарственных форм» наприборе растворения ERWEKA DT600 с «Лопастной мешалкой» (скорость вращения50 об/мин) в среде 0,1 М хлористоводородной кислоты в течение 45 минут.
Объемсреды растворения – 800 мл, температура 37±2 °С.Оценку эффективности разработанного препарата проводили in vivo всоответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению10новых фармацевтических веществ» (2012, Миронов А.Н.). Статистическую обработкурезультатов проводили с использованием метода вариационной статистики сиспользованиемТ-критерияСтьюдента.Статистическизначимымипризнавались различия при уровне значимости p≤0,05.
Статистический анализвыполнен с помощью программного обеспечения Statistica 10 (StatSoft, США).Разработка технологии получения экстрактов из ЛРСДля получения извлечения из корневищ и корней родиолы розовой, был выбранметод, используемый для промышленного получения жидкого экстракта родиолырозовой: извлечение из корневищ и корней родиолы розовой проводили методомпротивоточного многоступенчатого экстрагирования в батарее из 5 диффузоров. Вкачестве экстрагента использовали спирт этиловый 40 %, соотношение сырье-готовыйпродукт 1:1, степень измельчённости - не более 7 мм.Экстракцию БАВ из плодов шиповника собачьего проводили методом 3-хкратной мацерации. Время 1-ой экстракции – 2 часа, 2-ой – 1,5 часа, 3-ей – 1 час15 мин.
Выбор метода производили из четырех вариантов модификаций: сиспользованием измельчённого до 0,5 мм (1 и 3 варианты) и не измельчённого ЛРС (2и 4 варианты). Экстрагентом во всех случаях являлась вода очищенная (50±5 С) всоотношении сырье-экстрагент 1:10. В 3 и 4 вариантах в дополнение к описаннойсхеме после настаивания отделяли концентрированное извлечение в количестве 1/5 отобщего объёма, оставшееся извлечение подвергали циркуляции в течение 30 мин.Полученные извлечения объединяли и отстаивали в течение 24 часов при температуре2-8 С, фильтровали и оценивали по содержанию кислоты аскорбиновой ифлавоноидов методом ВЭЖХ по оригинальным методикам. Результаты исследованийсвидетельствуют, что метод 3-х кратной мацерации с циркуляцией экстрагента (3-йвариант) по полноте извлечения действующих веществ, являлся наиболеепредпочтительным (табл.
1).Подбор метода получения извлечения из столбиков с рыльцами кукурузывключал в себя экспериментальное изучение 3-х вариантов экстракции: вакуумфильтрационное экстрагирование (1 и 2 варианты) и реперколяция с законченнымциклом (3-й вариант). В 1-м случае спирт рекуперировали и экстрагировали БАВ из11шрота методом ремацерации горячей водой, во 2-м случае рекуперацию спирта непроводили.
Во всех 3-х вариантах полученные извлечения декантировали ианализировали.Таблица 1 - Cодержание БАВ в извлечениях плодов шиповника собачьегоВариантэкстракцииСодержаниеаскорбиновойкислоты, мкг/млСодержаниехлорогеновойкислоты,мкг/мл0,143±0,020,134±0,020,201±0,010,161±0,01Содержаниекверцетина,мкг/млВариант 149,10±0,030,041±0,02Вариант 246,54±0,02*0,050±0,02Вариант 354,92±0,03*0,063±0,03Вариант 445,64±0,02*0,051±0,04Примечание. Число наблюдений (n) = 5.* - Достоверные различия с результатом экстрагирования методом 1 (Р<0,05).Содержаниерутина,мкг/мл0,112±0,030,117±0,040,121±0,010,119±0,04Учитывая содержание термолабильных веществ в столбиках с рыльцамикукурузы,представлялосьцелесообразнымнеповышатьтемпературуэкстрагирования на стадии извлечения водой выше 65 С.
Проведены исследования поотработке температурного режима, в которых температуру экстракции варьировали от20 до 65 С, в результате чего установлено, что оптимальным температурнымрежимом является 50 – 55 С (табл. 2).Таблица 2 - Зависимость выхода анализируемых витаминов от температурыэкстракции*АнализируемоеТемпература экстракции, °Cвещество20-2530-3540-4550-55Витамин А0,001650,001710,001710,00175Витамин В10,010120,010150,010200,01038Витамин В20,061950,062040,065420,07400Витамин В60,001450,001580,002560,00314Витамин С0,600610,623990,631080,70828Витамин K0,006670,007510,007670,00968*В таблице приведены средние данные по трем измерениям60-650,001690,010200,072000,002470,647480,00748Для оценки эффективности сравниваемых методов экстрагирования,проводили определение в них и действующих веществ (табл. 3).Таким образом, установлено, что технология получения извлечений изстолбиков с рыльцами кукурузы по 2-й методике является оптимальной.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
