Автореферат (1141333), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Сухиеэкстракты из ЛРС получали методом сублимационной сушки в условиях,описанных в разделе «Материалы и методы исследования».12Таблица 3 - Сравнительная оценка содержания витаминов в жидких экстрактахстолбиков с рыльцами кукурузыПоказательВитамин АИзвлечение, схема 1,%0,00181*Извлечение, схема 3,%0,00154Витамин В1Извлечение, схема 2,%* **0,00293 ’0,01020*0,01014Витамин В20,07692*0,01053 ’* **0,08741 ’Витамин В60,00196*Витамин С0,60849** *** **0,00363 ’* **0,73176 ’* **0,01020 ’Витамин K0,067050,001920,601970,00669*0,00854* - достоверное различие с экстракцией методом реперколяции с законченным циклом (схема 3)(P<0.05); ** - достоверное различие с методом вакуум-фильтрационного экстрагирования срекуперацией этанола (схема 1) (P<0.05).Изучение химического состава СЭРШК и отработка оригинальныхвариантов методик определения показателей качества СЭРШК и готовой ЛФСмесь сухих экстрактов СЭРШК получали путём смешивания СЭ родиолы,шиповника и кукурузных рылец в соотношении 1:1:1 (дозы рассчитывали изсреднесуточных доз монопрепаратов ЛРС) в универсальном Y-смесителе фирмыERWEKA YB 5.
Методами ВЭЖХ и ВЭЖХ-МС определяли основные группы БАВ всоставе смеси СЭРШК. Из таблицы 4 видно, что в составе смеси СЭРШК салидрозидявляетсяосновнымдействующимвеществомэкстрактародиолырозовой,аскорбиновая кислота входит в состав плодов шиповника и столбиков с рыльцамикукурузы, кверцетин входит в состав всех трёх СЭ. Поэтому, капсулы предложеностандартизовать по действующим веществам: салидрозиду и аскорбиновой кислоте.Оригинальные варианты методик были валидированы, согласно требованиямГФ РФ ОФС 1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик», по параметрамспецифичности, линейности, прецизионности, и установлено, что все ониспецифичны, имеют линейную зависимость между концентрацией исследуемыхвеществ и площадью пика (r более 0,999) и дают сопоставимые результаты(RSD<2 %).13Таблица 4 - Содержание биологически активных веществ в смеси СЭРШКНаименование БАВСодержаниеВ 100 г (смеси сухих экстрактов), мкг/мгХлорогеновая кислота0,240±0,023Кверцетин12,11±1,2Рутин7,07±0,36Розавин1,69±0,1Розарин4,35±0,2Розин1,49±0,1Салидрозид26,47±1,4Тирозол11,08±0,5Аскорбиновая к-та54,12±0,01Витамин А0,0278±0,003Витамин В10,1±0,01Витамин В20,8±0,02Витамин В60,04±0,005Витамин K0,1 ±0,02Получение гранулята смеси СЭРШКТехнологические характеристики полученной смеси СЭ приведены в таблице 5.Показано, что полученная смесь СЭ обладает низкой сыпучестью и можетзначительно уплотняться, создавая проблемы в технологическом процессе призаполнении желатиновых капсул и транспортировке.
Для устранения данногонедостатка использовали прием гранулирования. Результаты отработки технологиигранулирования смеси СЭРШК приведены в таблице 6.Таблица 5 - Технологические свойства смеси сухих экстрактов№п/п1.2.3.4.5Технологические показателиСмесь сухих экстрактов СЭРШКСыпучесть, г/сУгол естественного откоса, Свободная насыпная плотность, кг/м3Предельная насыпная плотность, кг/м3Влажность, %142,4 ± 0,0545 ± 1,90725 ± 3,10874 ± 2,414,86 ± 0,01Таблица 6 - Составы гранулируемых смесей№Состав смеси1 СЭРШК— 66 %Starlac® — 33 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4% от массы смеси2 СЭРШК — 66 %Kleptose® — 4 %Aeropearl® 300 pharma — 2 %Лактоза моногидрат — 28 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 5 % от массы смеси3 СЭРШК — 57 %Лактоза — 28 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Kleptose® — 14 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 3 % от массы смеси4 СЭРШК — 66 %Kleptose® — 4 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Лактоза — 29 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый70% - 4% от массы смеси5 СЭРШК — 65 %Kleptose®® — 2 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Лактоза моногидрат — 32 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4 % от массы смеси6 СЭРШК — 66 %Starlac® — 25 %Vivapur® 200 — 8 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 3 % от массы смеси№Состав смеси7 СЭРШК — 66 %Starlac® — 33 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый70 % - 5 % от массы смеси8 СЭРШК — 70 %Крахмал— 20 %Лактоза моногидрат — 9 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4 % от массы смеси9 СЭРШК — 66 % Крахмал — 26 %Лактоза моногидрат — 7 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 3 % от массы смеси10 СЭРШК — 77 %Ликатаб — 15 %Vivapur® 101 — 5 %Aeropearl® 300 pharma — 3 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4 % от массы смеси11 СЭРШК — 86 %Крахмал — 6 %Лактоза моногидрат — 7 %Aeropearl® 300 pharma — 1 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4 % от массы смеси12 СЭРШК — 66 %ProSolv®SMCC — 34 %Гранулирующий агент - спиртэтиловый 70 % - 4 % от массы смесиВ качестве способа получения гранулята выбран метод ВАГ.
Грануляциюпроводили на универсальном лабораторном грануляторе TMG Glatt. Выбор режимаработы гранулятора основан на предварительных испытаниях, в ходе которыхвизуально оценивали состояние смеси при гранулировании. На первой стадиипроцесса проводилось перемешивание ингредиентов до равномерного состояния,скорость мешалки составляла 150 об/мин., скорость измельчителя – 700 об/мин., времяперемешивания – 3 мин.
Вторая стадия (агломерация) включала добавлениесвязующего вещества в количестве 3-5 % от гранулируемой массы, в течение трёхминут мешалка и измельчитель работали в режиме 300 и 700 об/мин. соответственно,15а затем – 7 минут в режиме 400 и 1000 об/мин. Третья стадия (распределение,поглощение влаги и досушивание) длилась 10 минут, скорость мешалки иизмельчителя составляла 400 и 1200 об/мин. соответственно. При этом смеси № 1, 3, 6и 8 были исключены из дальнейших исследований в виду невозможности полученияудовлетворительных гранулятов при визуальной оценке.Оценку качества полученных гранулятов проводили по показателям: сыпучесть,насыпная масса, влагосодержание, гранулометрический состав (табл.
7, 8).Удовлетворительными качествами по всем показателям обладал гранулят № 9.Таблица 7 - Технологические показатели гранулятов СЭРШК в сравнении снегранулированным продуктом.№ гранулятаСыпучесть, г/с24579101112Смесь СЭРШК2,88±0,023,62±0,045,61±0,023,42±0,023,53±0,034,24±0,044,52±0,043,35±0,032,4 ± 0,05УголСвободнаяПредельнаяестественногонасыпнаянасыпнаяоткоса, град плотность, кг/м3 плотность, кг/м328±0,03625±3,23798±2,4027±0,01663±2,42789±3,3229±0,04532±3,20610±3,132 6±0,04494±3,01658±1,2225±0,02471±2,10623±1,2024±0,02537±1,34671±2,3426±0,01545±2,21689±2,1533±0,01446±2,20636±3,4345 ± 1,90725±3,10874±2,41Влажность,%4,38±0,015,08±0,044,40±0,024,95±0,023,62±0,044,73±0,032,70±0,034,36±0,034,86±0,01Таблица 8 - Фракционный анализ гранулятов№245791112m < 0,2 мм, %54,4±0,0256,4±0,0262,3±0,0324,3±0,0221,7±0,0254,3±0,0337,9±0,02m < 0,5 мм, %22,6±0,0323,2±0,0227,4±0,0251,2±0,0444,9±0,0431,2±0,0444,4±0,02m > 0,5 мм, %23,0±0,0220,4±0,017,3±0,0124,5±0,0233,4±0,0414,5±0,0217,8±0,03Разработка технологии получения капсулс гранулятом СЭРШК-9Разработку технологии капсулирования полученного гранулята проводилисогласно данным литературы по средним суточным и разовым дозам используемогоЛРС.
Для выполнения поставленной задачи выбран размер капсулы № 00 (табл. 9).16Таблица 9 – Содержание действующих и вспомогательных веществ в одной капсулеНаименование веществаГранулят СЭРШК-9Крахмал картофельныйЛактоза моногидратAeropearl® 300ИтогоСодержание, мг375148406569Наполнение твёрдых желатиновых капсул проводили в настольной капсульноймашине ACG – Pam MF 30 в соответствии с технологической схемой, представленнойна рисунке 1. Показатели качества готовой ЛФ приведены в таблице 10.Таблица 10 - Спецификация на готовую лекарственную форму – капсулы, содержащиеСЭРШК-9ПОКАЗАТЕЛИОписаниеПодлинностьОднородностьмассыРаспадаемостьРастворениеМикробиологическая чистотаКоличественноеопределениеУпаковкаХранениеМЕТОДЫВизуальноНОРМЫБелые, желатиновые капсулы размера 00,наполненные гранулами светло-коричневогоцветаВЭЖХВремяудерживанияосновногопикасалидрозида на хроматограмме испытуемогораствора,приготовленногодляколичественногоопределения,должносоответствоватьвремениудерживанияосновного пика на хроматограмме СОсалидрозидаОФС «Однородность Невскрытых капсул: 0,673 г ± 10 %;массы дозированных Содержимое капсул: 0,568 г ± 10 %лекарственных форм»ОФС «Распадаемость Не более 20 минуттаблеток и капсул»ОФС«Растворение За45минутвраствор0,1Ндлятвердых хлористоводородной кислоты должно перейтидозированныхне менее 75 % салидрозидалекарственных форм»ОФСКатегория 3Б«Микробиологическаячистота»ВЭЖХАскорбиновая кислота – не менее 19,24 – неболее 21,26 мгСалидрозид – не менее 9,26 – не более 10,24 мгКверцетин – не менее 4,31 – не более 4,77 мгБлистерная ячейковая упаковка из поливинилхлорида и алюминиевойфольгиВ защищенном от света месте при температуре от 15 оС до 25 оСОпределение срока годности твердых желатиновых капсул, содержащихгранулят СЭРШК-9, проводили путём хранения 5 серий капсул при температуре 1822 С и влажности воздуха 64 ± 2 % (ГФ XIII ОФС.1.1.0009.15 «Сроки годности17лекарственных средств»).
Срок наблюдения составлял 24 месяца. Каждые 3 месяцаисследовали внешний вид, среднюю массу, подлинность, количественное содержание,распадаемость, растворение. Установлено, что при хранении в естественных условияхпоказатели качества твердых желатиновых капсул остаются неизменными в течениевсего срока наблюдения. Поэтому был установлен срок годности лекарственнойформы 2 года.Рисунок 1. Технологическая схема получения твёрдых желатиновых капсул,содержащих СЭРШК-918Определение токсичности твёрдых желатиновых капсул,содержащих гранулят СЭРШК-9На первом этапе оценки эффективности ЛС проводили определение остройтоксичности в соответствии с «Руководством по проведению доклиническихисследований лекарственных средств" под редакцией А.Н. Миронова (часть первая М. Гриф и К.
- 2012. - 944 с.). Опыты проводились на 86 мышах-самцах массой 18-26 г.СЭРШК-9 вводили внутрижелудочно, через зонд, предварительно растворив его в 2 млводы. Вводимую дозу вводили в три приема с интервалом в 45 минут из-за густотыполученного раствора. Статистическая обработка результатов эксперимента поисследованиюостройтоксичностиэкстрактапопоказателюсмертностиэкспериментальных животных по методу Кербера показала, что при однократномвнутрижелудочном введении белым беспородным мыщам-самцам сухого экстрактаСЭРШК-9, LD50 составляет 33,3 г/кг ± 0,18 г (табл. 11).Таблица 11 - Результаты определения LD50 препарата СЭРШК-9.№ п/п1НаименованиепрепаратаСЭРШК-9Дозы г/кгКоличество животныхВ группе, штВыжило,штПогибло,шт666666653310013356152127333642LD50,г/кг33,3±0,18На основании полученных данных было установлено, что по степенитоксичности СЭРШК-9 относится к 4у классу токсичности, т.е.
малотоксичнымвеществам (Березовская И.В., 2003).Определение актопротекторного действияИзучение актопротекторного действия смеси СЭРШК-9 осуществляли припомощи теста «повторное плавание», определяющего среднюю устойчивость кфизической нагрузке животного при плавании с грузом весом 7 % от массы телаживотного.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
