Автореферат (1141304)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

На правах рукописиКрючков Василий БорисовичИССЛЕДОВАНИЕ ЦЕФОПЕРАЗОНА В БИОЛОГИЧЕСКИХОБЪЕКТАХ МЕТОДАМИ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозияАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание учёной степеникандидата фармацевтических наукМосква – 2019Диссертационная работа выполнена в федеральном государственномбюджетном образовательном учреждении высшего образования «Ярославскийгосударственный медицинский университет» Министерства здравоохраненияРоссийской ФедерацииНаучный руководитель:доктор фармацевтических наук, профессорНаучный консультант:доктор медицинских наук, профессорФомин Анатолий НиколаевичЛаричев Андрей БорисовичОфициальные оппоненты:Ремезова Ирина Петровна – доктор фармацевтических наук, профессор,Пятигорский медико-фармацевтический институт – филиал государственногобюджетного образовательного учреждения высшего образования «Волгоградскийгосударственный медицинский университет» Министерства здравоохраненияРоссийской Федерации (ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России), кафедрафармацевтической и токсикологической химии, профессор кафедрыСенченко Сергей Петрович – доктор фармацевтических наук, доцент,Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизысредств медицинского применения» Министерства здравоохранения РоссийскойФедерации (ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России), начальник отдела разработки иактуализации фармакопейных статей на лекарственные средства синтетическогопроисхожденияВедущая организация: Федеральное государственное бюджетноеобразовательное учреждение высшего образования «Тюменский государственныймедицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации(ФГБОУ ВО Тюменский ГМУ Минздрава России)Защита состоится «»2019 г.

вчасов на заседанииДиссертационного совета Д 208.040.09 при ФГАОУ ВО Первый Московскийгосударственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет) по адресу:119019, г. Москва, Никитский бульвар, д. 13С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной медицинскойбиблиотеке ФГАОУ ВО Первый МГМУ им И.М. Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет) поадресу:119034, г. Москва, Зубовский бульвар, д.37/1; и на сайте организации:www.sechenov.ruАвтореферат разослан «____» _____2019 г.Учёный секретарьдиссертационного совета Д 208.040.09доктор фармацевтических наук,профессорДёмина Наталья Борисовна3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследованияЦефоперазон относится к 3 поколению цефалоспориновых антибиотиков и широкоприменяется в медицинской практике при лечении многих инфекционно-воспалительныхзаболеваний, в том числе для противоинфекционной профилактики в хирургии.Вместе с тем при определенных условиях (передозировка, индивидуальная непереносимость,патология внутренних органов и др.) препарат может вызывать острые отравления, вплоть долетального исхода.

Для диагностики интоксикации цефоперазоном решающее значениеприобретают результаты химико-токсикологического (судебно-химического) исследования.Актуальной задачей в хирургической практике, с целью исключения вероятностипослеоперационных раневых осложнений является обоснование применения антибиотиков, втом числе цефоперазона, и контроль, за уровнем содержания препарата в тканях операционногополя.

В связи с этим, в целях эффективной антибиотикопрофилактики в ряде случаев возникаетнеобходимость в использовании современных аналитических методов для контроля уровнясодержания антибиотика в тканях операционного поля пациентов.Для определения микроколичеств токсических веществ в биологических объектахцелесообразно использование методов, позволяющих совместить разделение, очистку ианалитическую детекцию искомых веществ.

Такими методами являются электромиграционныеметоды: электрофорез на бумаге, сочетающий эффективную очистку токсических веществ отсопутствующих компонентов биологического субстрата с последующим обнаружением иидентификацией их непосредственно на электрофореграмме (ЭФГ), а также один изсовременных подтверждающих электромиграционных методов – капиллярный электрофорез,нашедший в последние годы в зарубежной и отечественной аналитической практикеприменение в связи с достоинствами: высокой эффективностью, экспрессностью, малымрасходованием биологического объекта для анализа, программированному обеспечению ходаисследования и расчёта полученных результатов.Степень разработанности темы исследованияОбзор зарубежной и отечественной литературы показал, что, несмотря натоксикологическое значение цефоперазона, широкого применения в хирургической практике,методы его выделения, обнаружения и определения в тканях внутренних органов разработанынедостаточно.

Отсутствуют доступные методики скрининга цефоперазона в группецефалоспориновых антибиотиков.В настоящее время опубликовано значительное количество методик определенияцефалоспориновых антибиотиков в биологических жидкостях, с помощью различныххроматографических методов. Однако, в большинстве случаев, они не пригодны дляприменения в химико-токсикологической и лабораторно-хирургической практике, главнымобразом, в связи со сложной, многостадийной пробоподготовкой, и значительным увеличениемвремени анализа, что является неприемлемым при анализе лабильного антибиотика.4Цель и задачи исследованияЦелью работы явилось изучение возможности применения электрофореза на бумаге икапиллярного электрофореза как методов удовлетворяющих требованиям аналитическойтоксикологии и клинической лабораторной практики для анализа цефоперазона вбиологических объектах.Задачи для исследования:1.

Разработать оптимальные условия электрофореза-скрининга антибиотиков цефалоспориновогоряда методом электрофореза на бумаге.2. Изучить возможность электрофореза-скрининга ряда цефалоспориновых антибиотиков, в иомчисле цефоперазона, методом электрофореза на бумаге в присутствии соэкстрактивных веществбиологических объектов.3. Разработать методику идентификации и количественного определения цефоперазона методомкапиллярного электрофореза применительно к целям химико-токсикологического и клиническоголабораторного анализа.4. Разработать экспрессные методики выделения и аналитической детекции цефоперазона вбиологических объектах (модельных смесях). Провести их валидацию.5. Установить возможность идентификации и количественного определения цефоперазона методомкапиллярного электрофореза в биологических объектах в условиях клиники.6. Изучить распределение цефоперазона в тканях операционного поля у пациентов с хирургическимвмешательством в процессе антибиотикотерапии.7.

Изучить пригодность разработанных электрофоретических методик анализа цефоперазона дляхимико-токсикологической практики клинической лабораторной диагностики.Научная новизнаВ результате проведённых исследований впервые:показана возможность предварительного скринингового обнаружения цефоперазона вряду цефалоспориновых антибиотиков методом электрофореза на бумаге («ПВЭФ–1»), как вводных растворах, так и в присутствии соэкстрактивных веществ биологических объектов;на базе отечественной системы для капиллярного электрофореза «Капель – 105М»разработаны доступные, экономичные и экспрессные методики идентификации(подтверждающего исследования) и количественного определения цефоперазона, в водномрастворе и биологических объектах, определены валидационные параметры методик;предложенные электрофоретические методики идентификации и количественногоопределения цефоперазона апробированы на клинических объектах в хирургической практике,изучено распределение цефоперазона в тканях операционного поля;5Разработанные методики обладают высокой чувствительностью, специфичностью,простотой проведения процедуры пробоподготовки, предполагают использование небольшихнавесок биологических объектов (до 0,1 г ткани внутренних органов и 0,1 мл биологическойжидкости) и малый расход органических растворителей, что обеспечивает экспрессностьанализа.Теоретическая и практическая значимость исследованияНа основании результатов исследований выработан подход к разработке системногоанализа цефоперазона в биологических объектах с учётом физико-химических свойствмолекулы антибиотика (растворимость, липофильность, устойчивость, наличиефункциональных групп), с использованием методов электрофореза на бумаге и капиллярногоэлектрофореза.

В целях оптимизации режима дозирования показана возможность определенияуровня концентрации цефоперазона в тканях операционного поля в процессеантибиотикотерапии.Практическая значимость заключается в разработке экономичных, доступных иэкспрессных методик изолирования, предварительного скринингового обнаружения,идентификации (подтверждающего исследования) и количественного определенияцефоперазона в биологических объектах на основе комплекса используемыхэлектромиграционных методов (электрофореза на бумаге, капиллярного электрофореза).Методикиобладаютвысокойэффективностью,воспроизводимостью,чувствительностью и требуют минимальных затрат исследуемых объектов и реактивов.Методология и методы исследованияМетодология исследования построена на анализе и обработке литературных данных,оценке степени разработанности и актуальности, поведении цефоперазона в растворахэлектролитов, выборе наилучших условий извлечения антибиотика из объектов, эффективнойочистки от соэкстрактивных веществ, для последующей экспрессной электрофоретическойдетекции антибиотика, как в составе модельных смесей, так и в составе биосубстратов,полученных с операционного поля пациентов в процессе антибиотикотерапии.В ходе выполнения работы были использованы методы электрофореза на бумаге икапиллярный электрофорез, при этом с целью дополнительного концентрированияцефоперазона был использован приём «стекинга» в процессе электрофореза.Основные положения, выносимые на защитуУсловия электрофореза-скрининга (предварительное обнаружение) цефоперазона вгруппе цефалоспориновых антибиотиков методом электрофореза на бумаге.Доказательство возможности электрофореза-скрининга цефоперазона в присутствиисоэкстрактивных веществ биологических объектов (тканей органов, биологической жидкости).Обоснование и выбор условий идентификации (подтверждающего исследования) иколичественного определения цефоперазона методом капиллярного электрофореза сиспользованием отечественной системы капиллярного электрофореза «Капель – 105М».6Выбор условий экстракции цефоперазона из водных растворов в зависимости отприродыорганическогорастворителя,рНсреды,объёмаэкстрагента,кратностиэкстрагирования.Результаты исследований по разработке методик выделения цефоперазона избиологических объектов (печени, мочи, крови) с последующей идентификацией иколичественным определением методом капиллярного электрофореза, применительно к целями задачам химико-токсикологической и клинической лабораторной практики.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации