Автореферат (1141298), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Вкачественном составе антоциановых соединений и органических кислот наблюдаетсязначительные различия, которые можно связать с различным местом произрастания.Следующимэтапомисследованиябылосравнительноеизучениеколичественногосодержания БАВ в высушенных плодах рябины черноплодной. Результаты количественногоопределения представлены в таблице 3:Таблица 3Количественное содержание некоторых групп биологически активных веществ ввысушенных плодах аронии черноплоднойГруппы БАВСорт«Мичуринская»ВоронежскаяСодержание БАВ, %СортСортСорт «Вениса»«Викинг»,«АлтайскаяКалининградскРеспублика крупноплодная»ая область13областьАдыгеяАлтайский крайСумма антоцианов (в1,300±0,0110,980±0,0033,700±0,011пересчете на цианидин3-О-глюкозид)Сумма флавоноидов (в1,800±0,0971,500±0,0232,200±0,021пересчете на рутины)Сумма дубильных8,810±0,00511,700±0,035*16,900±0,033веществ (в пересчете на**1,490±0,0241,300±0,0100,980±0,003танин)Сумма органических1,660±0,0911,520±0,0251,530±0,026кислотАскорбиновая кислота0,030±0,0710,032±0,0131,600±0,070* Определение проводилось перманганатометрическим методом1,530±0,0341,600±0,08016,000±0,0291,530±0,0341,710±0,0851,530±0,024** Определение проводилось УФ-спектрофотометрическим методомАнализируя данные таблицы 3, можно сделать вывод о том, что наибольшее количествоантоцианов содержат плоды аронии сорта «Мичуринская» (содержание антоцианов в немпревышает более, чем в 2 раза содержание в других образцах).
Максимальное количествофлавоноидов содержится в плодах сорта «Викинг», хотя отличия от других сортов в данномслучае невелики. Сорта «Мичуринская» и «Вениса» лидируют по содержанию дубильныхвеществ, органических кислот и аскорбиновой кислоты.На следующем этапе исследования было проведено определение в плодах арониисодержания ряда индивидуальных органических кислот. Для определения использовали методкапиллярного электрофореза на приборе марки «Капель-105/105М».
Полученные данныепредставлены в табл. 4:Таблица 4Содержание органических кислот (%) в плодах рябины черноплоднойОрганическаякислотаНД наметодыиспытанияЯблочнаяМ04-74-2012ЯнтарнаяМаслянаяФумароваяЛимоннаяУксуснаяПропионоваяСорбиновая*нижний предел измеренияСорт«Мичуринска»Воронежскаяобл.1,188±0,1150,015±0,00013Менее 0,05*0,006±0,00020,309±0,0120,036±0,00130,030±0,00110,042±0,0010СортСортСорт «Вениса»«Викинг»,«АлтайскаяКалининградсРеспублика крупноплодная» кая областьАдыгеяАлтайский край1,287±0,1131,302±0,1141,312±0,1130,008±0,0020,007±0,00020,010±0,007Менее 0,05*Менее 0,05*Менее 0,05*0,003±0,00020,002±0,00010,004±0,0060,113±0,00120,125±0,00130,275±0,1240,027±0,00130,026±0,00130,030±0,0120,015±0,00130,027±0,00130,020±0,0130,038±0,00120,039±0,00120,032±0,011Как следует из данных таблицы 4 во всех образцах содержится весь набор анализируемыхкислот.
Сорт «Мичуринская» лидирует по количественному содержанию таких органическихкислот, как янтарная, фумаровая, лимонная, уксусная, пропионовая и сорбиновая кислоты.14Приблизительноодинаковоеколичествояблочнойкислотыобнаруженовобразцах,заготовленных на территории республики Адыгея и Калининградской области. В двух другихобразцах содержание этой кислоты несколько меньше. Содержание масляной кислоты во всехчетырех образцах одинаково.3.
Получение и анализ экстракционных препаратов плодов рябины черноплоднойК экстракционным препаратам растительного происхождения, производство которыхсосредоточено на крупных фармацевтических предприятиях, относятся настойки, экстракты,максимально очищенные препараты и препараты индивидуальных веществ. Основной стадиейихполученияявляетсяэкстрагированиелекарственногорастительногосырья.Клекарственным препаратам аптечного изготовления, имеющим малые сроки хранения, могутбыть отнесены так же настои.На данном этапе исследования провели анализ полученных лекарственных форм иопределили количественное содержание основных групп БАВ в полученных извлечениях.Передэкстрагированиемсырьеизмельчали.Дляполучениялекарственныхформиспользовали фракции с размером частиц 1,0 – 0,5 мм.
Были получены следующиелекарственные формы: жидкий экстракт в соотношении 1:1; настойка в соотношении 1:5 инастой в соотношении 1:10. Настой готовили из цельных и измельченных плодов согласнолитературным данным.В качестве экстрагента для получения спиртсодержащих извлечений использовали этанол40%, имеющий максимальную извлекающую способность согласно данным предварительныхисследований.Для изготовления жидкого экстракта использовали метод перколяции; дляизготовления настойки – метод дробной мацерации.
Настой получали настаиванием накипящей водяной бане в течение 15 минут с последующим охлаждением до комнатнойтемпературы в течение 45 минут.На следующем этапе исследований определялось количественное содержание некоторыхгрупп БАВ плодов Рябины черноплодной.Содержание антоцианов, флавоноидов и дубильных веществ в извлечении послесоответствующих разведений определяли согласно методикам, указанным выше.Определение антиоксидантной активности полученных лекарственных форм проводилититриметрически, используя в качестве титранта 0,01 М раствор перманганата калия.Извлечение перед определением разбавляли до исчезновения розового окрашивания.Полученные данные приведены в табл.5:Таблица 5Результаты определения некоторых групп БАВ - антиоксидантов в лекарственных формахплодов рябины черноплодной15Лекарственная формаАнтоцианы,%0,620,180,06Флавоноиды,%1,150,240,05Дубильныевещества, %0,10,020,008АОА, %2,06Жидкий экстракт (1:1)0,59Настойка (1:5)0,72Настой (1:10)(измельченные плоды)0,0020,030,0040,02Настой (1:10)(цельные плоды)На основании результатов, представленных в таблице, можно сделать вывод о том, что поколичественномусодержаниюБАВ–антиоксидантов,наиболеепредпочтительнойлекарственной формой является жидкий экстракт как наиболее концентрированное извлечение.Наименее рационально получение настоя из цельных плодов.Важной характеристикой эффективности процесса извлечения БАВ из сырья является ихвыход.
Данные представлены в таблице 6:Таблица 6Сравнительная оценка выхода отдельных групп БАВ при получении различныхлекарственных форм плодов Рябины черноплоднойВыход некоторых групп БАВ при получении различныхАнализируемаялекарственных форм, %лекарственная формаАнтоцианыФлавоноидыДубильные вещества16,863,89,8Жидкий экстракт (1:1)24,366,79,8Настойка (1:5)16,227,77,8Настой (1:10)(измельченные плоды)0,5416,73,9Настой (1:10)(цельные плоды)На основании данных таблицы 6 можно сделать вывод о том, что при получении изучаемыхлекарственных форм происходит наиболее полное истощение сырья по флавоноидам.
Выход ихв случае спиртовых извлечений (настоек и экстрактов) составляет порядка 60 -70 %. Тем неменее антиоксидантная активность настоя из измельченных плодов достаточно высока, чтоможет свидетельствовать о переходе в него из сырья других групп БАВ-антиоксидантов, неявлявшихся объектом настоящего исследования.Таким образом, показано, что по количественному содержанию БАВ – антиоксидантов,наиболее предпочтительной лекарственной формой является жидкий экстракт 1:1.4.
Стандартизация жидкого экстракта (1:1)Жидкий экстракт плодов рябины черноплодной получали методом перколяции.50,0 г. высушенного измельченного растительного сырья намачивали и настаивали с 50мл40% спиртом этиловым в течение суток. Затем намоченное растительное сырье помещали вперколятор и подавали чистый экстрагент до состояния «зеркала». Оставляли заполненныйперколятор на 24 часа.
После этого 15% от заданного объема упаривают под вакуумом до 7,516мл. Остальной объем сливают в приемник. Упаренный объем объединяют с оставшемсяобъемом. Полученную вытяжку фильтровали через двойной слой марли (для удалениябалластных веществ).В итоге было получено излечение темно-фиолетового цвета с характерным сладковатымзапахом.На следующем этапе нами была проведена стандартизация 3 серий экстракта жидкого (1:1)согласно проекту Общей фармакопейной статьи (ОФС) «Экстракты» согласно ГФ РоссийскойФедерации XIII по показателям: описание, содержание спирта, тяжелые металлы, сухойостаток, содержание действующих веществ. Полученные результаты представлены в таблице7:Таблица 7Характеристика жидкого экстракта плодов Рябины черноплодной и показатели для оценкикачества согласно ГФ XIIIПоказательЖидкий экстракт (1:1)ПрозрачностьПрозрачная жидкостьЦветТемно-фиолетовыйЗапахСпецифический, сладковатыйВкусГорьковатыйСодержание спирта65%Тяжелые металлыНе более 0,01%Сухой остаток0,64%Содержание антоцианов, %0,42%± 0,011%Получен и стандартизован жидкий экстракт (1:1) плодов рябины черноплодной.
Проведенанализ жидкого экстракта по показателям, рекомендованным Государственной ФармакопеейРоссийской Федерации XIII издания: описание, содержание спирта, тяжелые металлы, сухойостаток, содержание действующих веществ.5. Сравнительный анализ антиоксидантной активности экстракционных препаратовплодов рябины черноплодной различных сортовНа следующем этапе исследования провели сравнительное изучение антиоксидантнойактивности(АОА) полученных препаратовна основевысушенныхчерноплодной.
Определение антиоксидантной активности проводилиБузламы.Вработенамибылаиспользованакультураплодов рябиныпо методике В.С.инфузорий,содержащаявэкспоненциальной фазе не менее 2500 особей в 1 мл среды, а в стационарной фазе - не менее7000 особей. В качестве повреждающего фактора выступал 3% раствор перекиси водорода.Полученные результаты представлены в табл. 8:Таблица 8Индекс биологической активности экстракционных препаратов плодов рябинычерноплодной17РазведениеIБА11*10-21*10-31*10-41*10-51*10-61*10-71*10-81*10-91*10-101*10-111*10-121*10-131*10-141*10-151*10-161*10-171*10-181*10-191*1,370,961,191,681,851,121,291,511,731,681,881,431,491,421,551,5521**1,231,041,071,181,070,880,981,10,930,930,941,051,070,981,050,850,822*1,290,991,321,241,451,121,391,201,131,181,161,341,471,321,301,211,111,2132**0,820,710,730,740,760,690,730,690,720,700,730,660,750,780,730,620,680,6143*1,121,120,930,991,061,021,011,031,071,061,011,111,11,071,151,111,151,043**0,871,131,151,071,191,130,971,051,081,041,441,171,091,101,061,281,141,084*0,990,960,980,930,890,920,931,000,890,850,870,750,880,860,890,850,790,7751,391,411,180,940,920,890,940,950,860,680,780,690,720,670,590,710,650,670,674**0,811,141,131,041,001,131,030,940,961,111,141,10,981,000,890,950,791,031*- Настой измельченных плодов аронии («Мичуринская»)1** -Настой цельных плодов аронии («Мичуринская»)2* - Настой измельченных плодов аронии («Викинг»)2**- Настой цельных плодов аронии («Викинг»)3*- Настой измельченных плодов аронии («Алтайская крупноплодная»)3** Настой цельных плодов аронии («Алтайская крупноплодная»)4* Настой измельченных плодов аронии(«Вениса»)4** Настой цельных плодов аронии(«Вениса»)5 – Жидкий экстракт (1:1) плодов аронии («Мичуринская»)Для настоя, полученного из цельных плодов сорта «Мичуринская», прослеживается высокаяантиоксидантная активность (IБА>1,1) для всей серии разведений по сравнению с другимианализируемым образцами.