Автореферат (1139515), страница 2
Текст из файла (страница 2)
На основании клиникомикробиологических и иммунологических исследований впервые получены новые данныепосовременнойэтиологическойструктуре,факторамврожденногоиммунитета,особенностям клинического течения неонатальных пневмоний и антибиотикорезистентностивыделенных штаммов микроорганизмов, с учетом которой была обоснована стратегияадекватной антибактериальной терапии.Впервые определены доминирующие виды условно-патогенных грамположительных играмотрицательных микроорганизмов и выявлена их роль в возникновении пневмоний уноворожденных. Установлено, что среди основных возбудителей ВУП превалируютмикроорганизмы семействамикроорганизмыStaphylococcus (S.epidermidis) -15,5 %, аРНПсемейства Enterobacteriacea (K. pneumoniae, E.
coli) -лидируют19,7 и 17,1%соответственно.Учитывая генотипические особенности и различия в формировании устойчивости кантибактериальным химиопрепаратам у штаммов, доминирующих в структуре неонатальныхпневмоний, предложены рекомендации по коррекции стандартов лечения и организациимикробиологического мониторинга в родильных стационарах.Впервые проведен биоинформационный анализ, позволяющий выявить основныепотенциальные факторы врожденного и адаптивного иммунитета, которые могут игратьбольшую боль в патогенезе пневмонии новорожденных. Определен дисбаланс факторовврожденного иммунитета на уровне слизистых оболочек верхних дыхательных путей уноворожденных с неонатальной пневмонией.
Выявлены генетические маркеры в генах IL-17,IL10, DEFB1, TLR4, ассоциированные с риском развития неонатальных пневмоний. Впервые7выявленодостоверноемикробиологическимииувеличениекорреляционныхиммунологическиминеонатальными пневмониями.взаимодействийпоказателямиумеждуноворожденныхсПолучены новые региональные данные о высокойинформативности иммунных показателейв качестве маркеров развития пневмоний уноворожденных.Теоретическая и практическая значимостьМатериалыдиссертационнойработывносятвкладвизучениепроблемынеонатальных пневмоний и расширяют представление об этиологии НП, в частности, овлиянии микробного фактора на клиническое течение и исход заболевания. В практическомплане установлено, что для микробиологической диагностики НП у новорожденных вкачестве исследуемого материла целесообразно использовать трахеобронхиальный аспират(ТБА), а также мазки из зева, пуповинную кровь.
Разработаны основные критерии оценкиэтиологической значимости УПМ, выделенных из дыхательных путей. Научно обоснованарольфакторовпатогенностивозбудителейнеонатальных пневмонийна организмноворожденного и их влияние на показатели врожденного иммунитета.Высокая специфичность, прогностическая ценность и прямая корреляция синфекционным возбудителем НП с тяжестью течения, позволяетпредположить, чтонепосредственно возбудитель за счет действия факторов патогенности влияет на показателиврожденного иммунитета. Зафиксированные при ВУП и РНПкардинальные отличия в микробиологических иобщие закономерности ииммунологических показателях,сопряженные с тяжестью течения неонатальных пневмоний, дополняют представления омеханизмах формирования врожденного иммунитета.
Снижение экспрессии генов TLR2,TLR4 и увеличение экспрессии генов TNFα и NF-kB в дебюте неонатальных пневмонийявляютсяважнымипрогностическимифактораминеблагоприятноготеченияидополнительными предикторами развития НП.Найдена ассоциация полиморфных маркеров в генах IL-17, DEFB1,TLR4 с рискомразвития внутриутробного инфицирования плода. Показано, что генотип AG (ген IL10 -1082A>G) и GG (TNFα -308 G>A) ассоциированы с риском развития неонатальных пневмоний.Разработан алгоритм диагностики неонатальных пневмоний.В результате работы разработан алгоритм диагностики неонатальных пневмоний наоснове комплекса клинико-рентгенологических, микробиологических и иммунологическихданных, которые в перспективе позволят выбрать ирациональную этиотропную терапию.оптимизировать адекватную и8Положения диссертации, выносимые на защиту:1.Выявлены клинико-микробиологические предикторы развития внутриутробных иранних неонатальных пневмоний. Риск развития ВУП ассоциирован микроорганизмамисемействаStaphylococcus (S.epidermidis).
аРНП -ассоциированмикроорганизмамисемейства Enterobacteriacea (K. pneumoniae, E. coli), безводным периодом более 24 часов иасфиксией новорожденных.2.Проведенаоценкаантибиотикорезистентностивозбудителейнеонатальныхпневмоний, которая показала, что между заболеваемостью новорожденных неонатальнымипневмониями и резистентностью к антибактериальным препаратам имеется умереннаяположительная связь, что свидетельствует о возможности формирования в ОРИТН«госпитальных» штаммов, которые и вызывают данные инфекционные осложнения.3.У новорожденных с пневмониями определен дисбаланс в факторах врожденногоиммунитета на уровне эпителиальных клеток верхних дыхательных путей: значительноеснижение экспрессии рецепторов TLR2 и TLR4 на фоне высокого экспрессионного уровняэффекторных молекул.4.Скрининг полиморфизмов в генах TLRs, цитокинов и DEFB1 у родильниц и уноворожденных обладает высокой прогностической ценностью и позволяет оценить рискразвития неонатальных пневмоний, и потенциально может быть использовандлядифференциальной диагностики пневмоний у новорожденных.Методология и методы исследованияМетодология настоящего исследования спланирована, исходя из современныхпринципов научного познания (И.Н.
Кузнецов, 2006). Методология организована адекватнопоставленной цели. Предметом исследования стали проблемы, связанные с диагностикойнеонатальных пневмоний.Основными объектами исследования являлись биоматериал от новорожденных(пупочная кровь, трахеобронхиальный аспират, мазки с зева), смывы с медицинскогооборудования (контуры ИВЛ). В работе применялись следующие методы исследования:бактериологические, иммунологические, молекулярно-генетические; метод иммерсионноймикроскопии.
Результаты анализировались при помощи статистических методов.Использованные аппараты и оборудование: ламинарные шкафы, лабораторная посуда,холодильники, термостаты, сухожаровые шкафы, автоклавы, амплификатор для ПЦР-РВДТ96 (ДНК-технология, РФ), световые микроскопы, дозаторы пипеточные автоматические идругие устройства и инструменты.Использованные реактивы: питательные среды для культивирования микроорганизмов,красители, антикоагулянты, микротестсистемы для биохимическойидентификации9возбудителей, наборы «РИБОсорб» (ИЛС, РФ), «ОТ-1» (Синтол, РФ), HotStart Taq DNAPolymerase (Синтол, РФ) и др. Использованные информационные средства: программныепакеты Statistica, международные компьютерные базы данных и информационные научныересурсы (PubMed, Sciense Direct, Scirus и другие).Степень достоверности и апробация работыО достоверности результатов работы свидетельствует использование современныхметодовисследования,которыехарактеризуютсявысокойчувствительностью,объективностью, а также поддерживаются программным обеспечением, позволяющимпроводить статистический анализ больших массивов данных.
Использование указанныхметодов, а также корректной статистической обработки позволило количественно оценитьстепень КОЕ/мл выделенных микроорганизмов, выделить и идентифицировать культурымикроорганизмов.Диссертация апробировалась на заседании кафедры микробиологии и иммунологииФГБОУ ВО «Дагестанский государственный медицинский университет» Минздрава России11 октября 2017 года (протокол № 5).Основные положения работы доложены и апробированы на следующих научныхфорумах: IV международной научно-практической конференции «Современные концепциинаучных исследований»,Москва,2014;IV международной научно-практическойконференции «Фундаментальные и прикладные науки сегодня», North Charleston, USA, 2014;на International scientific conference Science, Technology And Life – 2014, Czech Republic,Karlovy Vary, 2015; Всероссийской научно-практической конференции «Новые методыэкспресс диагностики микроорганизмов в медицине, фармации, ветеринарии и экологии»,Санкт-Петербург, 2015;I междисциплинарной конференции «Научно-практическаяревматология.
Аутоиммунные и иммунодефицитные заболевания», Москва, 2016; IVВсероссийской научно-практической конференции Антибиотикорезистентность и тактикаантимикробной химиотерапии», Махачкала, 2017.Личный вклад автораУчастие автора заключалось в выборе темы диссертации, формулировке цели и задач,разработке критериев включения/не включения пациентов в исследование, в анализемедицинскойистатистическойдокументации(историиродов,историиразвитияноворожденных) по заболеваемости неонатальными пневмониями в республике Дагестан, вкомплексном клинико-лабораторном обследовании новорожденных, сборе материала.Анализ данных отечественной и зарубежной литературы по теме диссертации,статистическаядифференциальнойобработкаполученныхдиагностикирезультатов,неонатальныхпневмонийразработканаосновеалгоритмаклинико-10рентгенологических, микробиологических, иммунологических и генетических данных инаписание диссертации выполнено лично автором.Изучение выделенной микробиоты осуществлялось на базе кафедры микробиологии,вирусологии и иммунологии ФГБОУ ВО «Дагестанский государственный медицинскийуниверситет» МЗ РФ и в лаборатории «Клиническая микробиология» ООО НПП«Питательные среды» г.
Махачкала. Иммунологические исследования были выполнены влаборатории молекулярной иммунологии ФГБНУ «Научно-исследовательский институтвакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», Москва. Личный вклад автора составляет 85%.Вклад коллег отражен в соавторстве в ряде работ, опубликованных в периодическихнаучных изданиях.Внедрения результатов исследованияЗначение полученных результатов исследования для практики подтверждается тем, чтополучена приоритетная справка на изобретение Федеральной службы по интеллектуальнойсобственности, патентам и товарным знакам (Роспатент) о государственной регистрации«Способ диагностики неонатальных пневмоний смешанной этиологии» № 2016150053/15(080352) от 19.02.2016. Разработан ивнедрен «Способ прогнозирования неонатальныхпневмоний» (№ заявки 2017133564/15(059224) от 28.05.2018.По результатам исследования получены акты внедрения в практику родильного домаГБУ РД РКБ г.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
