А.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений (1134226), страница 41
Текст из файла (страница 41)
Установить камеры на штатив. 9. Подключить камеры нижним шлангом к мнкрокомпрессору, верхним — к ячейке с электродом. Включить компрессор. 10. Отметить на микровольтнаноамперметре Ф-!36 величину начального тока, проходящего через электрод. 11.Вл к.ючить протяжку диаграммной ленты на многоканальном самописце. Записать кинетику изменения величяны тока, которое соответствует изменению концентрации кислорода в канале, вызываемому темновым дйхаинем (10 †мнн). 12.
Включить осветитель и записать на самописце изменения величины тока, вызванные увеличением концентрации кислорода в результате фотосинтеза растений (10 — 15 мии). 13. Провести калибровку измерительной системы, предварительно сняв камеры с растениями и переключив тумблер на панели регулировки в положение «Имитация». Прн калибровке отметить на диаграммной ленте начальное положение пера и соответствующее ему значение тока, регистрируемое на Ф-136. Затем рукояткой иа панели регулировки изменить величину подаваемого напряжения (и тем самым величину проходящего тока) и отметить новое положение пера на диаграмме и соответствующее ему значение тока.
14. Выключить тумблер «Батарея» на панели регулировки, выключить тумблеры на приборах. Отключить приборы от сети, Полярографическая установка с термостатнруемой ячейкой для регистрации изменения содержания кислорода в жидкой смеси (рнс. 30) Рис. 30. Блок-схема полярографической установки с термостатируемой фото- ячейкой: ! — батарея 165У, 2 — регулятор поляризационного напряжения, 3 — имитирующий электрод-резистор, 4 — переключатель (Электрод — Имитация), б — электрод Кларка, б — ячейка термостатируемая, 7 — магнитная мешалка, 8 — тепловой водяной фильтр, 9 — осветитель, 10 — микровольтнаноамперметр, 11 — регулятор чувствительности установки 1: 10, 12 — переключатель (Работа †Провер), 13 — ультратермостат, 74 — потенциометр лабораторный ЛПУ-01, 1б — регистратор КСП-4 1.
Выполнить операции, указанные в и. 1 — 7 предыдущего описания. 2. Заполнить ячейку реакционной смесью и закоыть ее крышкой. Следить за тем, чтобы в ячейке нс осталось пузырька воздуха. 3. Подключить к ячейке ультратермостат (1= 10 (поток воды, охлаждающей ячейку, направлен снизу вверх).
4. Включить мешалку. 5. Включить самописец и произвести необходимые записи (при регистрации фотоснвтетического выделения кислорода вначале дождаться установления в темноте стационарного тока, а затем включить осветитель). 6. Произвести калибровку электрода дрожжами нлн добавлением небольших количеств Иаз50» в ячейку, заполненную соответствующим буфе:ром.
7. Выключить тумблеры Отключить приборы от сети, Работа в ламииар-боксе г."3«» — ««. тес т ту Аппарат Варбурга 178 Потенцнометрнческая установка для регистрации фотоиндуцируемым изменений рН в суспензии хлоропластов (рис. 31) Рнс. 31. Потенциомстрическая установка для регистрации фотоиндуцируемых изменений рН в суспензия хлоропластов: 1 — источник света (диапроектор), 2 — водяной тепловой фильтр, 3 — тсрмостатируемая кювета (ячейка) со стеклянным электродам (а) и электродом сравнения (б), 4 — магнитная мешалка ММ-1, б — ультратермостат У-10, б — рН-метр р11-340, 7 — делитель выходного (ат рН-340) сигнала, 8 — самопншуптий потенциометр КСП.4, 9— компенсатор ступенчатый, 10 — регулятор шага компенсации, 11 — батарея компенсатора 1.
Проверить заземление. 2. Включить приборы в сеть. 3. Включить тумблеры на приборах (ЛПУ-01, рН.метр, КСП-4). 4. Заполнить ячейку реакционной смесью. 5. Подключить ячейку к ультратермостату, включить магнитную мешалку. 6. Включить самописец и в темноте дождаться стацнонарного уровня. рН.
7. Включить свет и записать фотонндуцнруемые изменения рН. 8. После оковчанпя опыта хорошо промыть электроды водой, выклю. чить приборы. Аппарат Варбурга представляет собой ванну болыпон емкости, в котор)ю погружаются манометры на ш~ециальных креплениях, ультратермостат с контактным термометром, поддерживающий температуру в ванне 25~. ' 0,02'С. 1, Проверить заземление прибора. 2. Заднть воду в кристаллнзатор.
3. Установить необходимую температуру на контактном термометре термостата; включить систему нагрева н перемешивання воды. 4. Включить тумблеры, проверить нсправность ътеханизча качанпя. 5. Включить тумблеры, проверить работу осветительных ламп. 6. Подготовленные для рабаты манометры с открытыми кранами установить в держатели аппарата н включить качание. 7. После 23 — 30 мвн термостатнравання сосудиков Варбурга подвести уровень жидкости в правом колене до отметки «15» и закрыть кран (при анализе фатоспнтетической актннностн нключить свет). 8. Приступить к снятию показаний. Показания снимают при закрытом кране манометра каждые 20 мнн в течение 1 ч, Во время снятия показаний тключают от общего качания, подводят уровень жидкости в праманометр отключают вом колеме до выбранного «нулевого» уровня, нспользу и р вом резервуаре с жидкостью Броди, н записывают показания по левому колену манометра.
О. После окончания опыта отключить качание, открыть краны манометров и извлечь манометры из ванны. 1О. Выключить термастат н отключить аппарат от сети. 1. П отереть поверхность стала и стен 70'1»-м раствором спирта, поместить в ламннар-бокс необходимые стерильные инструменты, посуду и сосуд с 70 юм раствором спирта, в котором находятся пинцет и другие инструменты, необходимые во время работы. 2. Включить последовательно: 1 — сеть, 2 — вентиляционную систему, а оп екающую воздух ~ерез фильтры, 3 — улщрафиолетовую лампу.
)7осле включения ультрафиолетовой лампы в ггомнаге ие должно д быть людей( Через 20 — 30 мнн улгырафиолетавую лампу выключить. 3. Повсрхнасть сосудов с растительным материалом и руки тщательно протереть 70»»-и рве~ворам спирта. Сосуды поставить в ламинар-бокс. Включить горелку. При рабате со стерильной посудой и материалом необходимо помнить, что нельзя проносить руки над открытой стерильной позелхностью.
4. Колбы и другие сосуды, закрытыс крышками из фольги н целлофана, ывать следующим образом: пеллафан снять до внесения колбы в ламина -бокс, фольгу обжечь, пронеся горло сосуда над горелкой, зат м е осторожно развернуть кран фольги к снять ее. Закончив работу (напрнмср, пересев клеток), закрыть сосуд: взять пинцет из сосуда со спиртом, обжечь его в пламени горелки, обжечь горло сосуда, взять пинцетом крышку из фольги, обжечь ее с двух сторон н закрыть горло сосуда. Когда фольга остынет, прижать ее плотно к горлу сосуда.
После этога сосуд можно выисств из ламкнар-бокса. Фольгу закрыть пеллофаном, сосуд подписать. При использовании стерильных инструментов и пнпеток разворачивать их с того конца, за которыя держат при работе. 5. Выключать ламянар-бокс последовательно: 1 — горелку, 2 — вентиляционную систему, 3 — сеть. Убрать использованную посуду и инструменты. Поверхность стола протереть 70ь(»-м раствором спирта Обработка эксперимента иых данных на ЭВМ Полученные в результате экспериментов данные статистнческн о р б аботать на ЭВМ (1ВМ РС).
Формат ввода данных и порядок работы с проч граммами определяют инструкции к этнм программам. Полученные данные и результаты статнстнческой обработки распечатать и внести в отчет. Про.вести анализ полученных данных. 51 52 Оглавление 60 62 63 63 63 Предисловие 64 64 65 66 68 70' 73 10 11 12 76 78 18 21 22 88 89 25 27 27 28 28 29 30 90 92 32 35 99 38 39 103 105 41 44 108 46 50 !81 180 РАЗДЕЛ !. ФИЗИОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНОЙ КЛЕТКИ (И. П. Ер- маков, М. И. Тукеева) Задача 1.
Выход веществ из клетки как отражение свойств ее мембран. Проницаемость клеточных мембран Работа 1. Влияние различных факторов на выход электролитов из клеток Опыт 1. Влияние биотических (фитопатогены] и абиотических (температурный, водный стресс) факторов на выход электролитов из клеток Опыт 2. Действие тспловога шока на проницаемость клеток для электролитов Работа 2. Влияние температуры иа проницаемость клеточных мембран для бетацианина Работа 3. Определение выхода веществ из пыльцы при ее прорастании Задача 2. Движение цитоплазмы Задача 3.